#洋迪[超话]#
今天这俩 间隔17分钟 先后官宣了新代言[鼓掌] 难道又是巧合吗?那真的是好巧啊[喵喵] 就不能一个今天宣 一个明天宣 或者一个上午宣 一个下午宣吗?你俩巧合真的是太多了吧!既然如此有缘 就赶紧一起过吧! [暖一下]
今日事今日毕 结合最近的发现 有感而发一下

两个磕点[并不简单]:
- 2021/3/20,8在kb宣传某剧的时候唱了失恋阵线联盟 跑调跑到xj [笑cry]我都觉得太可爱了啊!!
2021/4/09,dy发了个失恋阵线联盟dj版调戏lp(这是4/5号参加完活动录的,9号发出来)。
总,你是不是看了kb觉得lp太可爱了!!你这满脸荡漾的我都没眼看!!我不懂!!我看你是感情稳定了胆儿肥了吧,小心回家被lp揍[挖鼻] 这里一前一后差不多一首歌,别告诉我只是巧合[并不简单]

- 2021/9/01,8发了微博:“抓住夏天的尾巴[太阳][太阳]” 我们一开始都只是以为是跟[太阳][太阳]2021/8/31的wb“8月最后一个wb”的回应和“8yy”。But通过昨天给我留言的一个小可爱的提醒,我联系前后文又重新磕了一遍,发现之前的认知也许太肤浅了,磕的鸡皮疙瘩都起来了:原来这是一句歌词啊!!这首歌是2013年发行的歌,13年8还没出道呢吧,这歌并没什么知名度,所以她应该是特意找的这首歌,为什么特意找,只能是因为跟歌词有了共鸣。
来,柚子们一起品一下歌词,磕到的这一瞬间其实我的心情很难用语言形容了,千言万语汇成一句话,歌词的中心思想为珍惜眼前,享受爱情,我不后悔[心][心]

此时此刻我还能说什么呢?我突然感受到了 你们对彼此的感情、用心和勇敢应该比我们目前看到的要深的多的多。㊗️你们享受爱情,互为依靠,珍惜眼前。你们在一起的时候,不是万众瞩目的dl,不是一言一行都受到大众sj的大明星,你们应该享受普通xql都应该享受到的甜蜜,做普通xql都应该有的日常。双向奔赴,无怨无悔。等你们正式GX!![男孩儿][心][女孩儿]

RDP Trio™试剂
英文:RDP Trio™Reagent
品牌:HiMedia 货号:MB566 规格:100ml 用途:【DNA】、【RNA】和【蛋白】的快速分离
简介
RDP Trio™试剂用于从人、动物和植物样品中方便快捷地分离RNA、DNA和蛋白。获得的RNA可用于下游的Northern 杂交、mRNA分离、体外翻译、RT-PCR等。RNA长度从0.1~15kb,DNA可用于PCR、酶切、Southern杂交,蛋白可用于Western Blotting。

原理
RDP Trio™试剂为硫氰酸胍和苯酚的单相混合液,能有效溶解RNA。加入氯仿并离心后,溶液分为3相,水相含RNA,中间相含DNA,有机相含蛋白质。1ml RDP Trio™试剂可用于50-100 mg组织、5-10×10 6细胞、或

10 cm2平皿单细胞层。该方法对Chomczynski和Sacchi发明的RNA一步分离法进行了改进,可在1小时内完成。

操作流程
1) 样本制备
1a. 组织:采用匀浆器将样品和RDP Tri™o试剂试剂充分混匀, 1ml RDP Trio™试剂适合50-100mg组织
1b. 单细胞层: 在平皿中直接裂解细胞,10 cm2平皿单细胞层加1mlRDP Trio™试剂,用移液器吹打。平皿要求为玻璃皿,不能为塑料皿。
1c. 悬浮细胞:最多离心1×107细胞,4℃,300 × g,5min。弃上清,加1ml RDP Trio™试剂,反复吹打。(动物细胞、细菌、酵母、植物细胞数量均同上)
注意:
1.

细胞用RDP Trio™试剂匀浆或裂解后,在-70℃可放1个月时间。
2.

如果下列成分含量较高,可能需要额外的操作步骤,具体参考原版说明书:脂肪、蛋白、多糖和细胞外基质(如肌肉)。

2)相分离
将均质化的样品在室温(15-25℃)孵育5分钟,使核蛋白复合物完全解离。
每毫升RDP Trio™试剂加入200μl氯仿。盖紧样品,剧烈摇动15秒,在室温(15-25℃)下静置10分钟。将得到的混合液以12,000×g(≈13,000rpm)在4°C时离心15分钟。离心后,混合液分成底部深红色有机相(含蛋白质),中间相(含DNA)和无色含有RNA的上层水相。(以下继续下面相应的RNA/DNA/蛋白分离步骤)
注意:用于相分离的氯仿不应含有异戊醇和其他添加剂。


RNA分离步骤
1) RNA沉淀
将含有RNA的水相转移到新管中并加入500μl异丙醇。 让样品在室温(15-25℃)下静置5-10分钟。 在4℃下以12,000×g(≈13,000rpm)离心10分钟。通常在离心前不可见的RNA沉淀,在管底或侧面形成胶质状沉淀。
提示:2-8℃保存中间相(含DNA)和有机相(含蛋白质)。

2)RNA清洗
去除上清液而勿碰到沉淀。加入1ml75%乙醇清洗RNA沉淀。涡旋样品,然后在4℃下以

750×g(≈10,500rpm)离心5分钟。

3)RNA复溶
去除上清液而勿碰到沉淀。风干RNA沉淀5-10min。不要让RNA完全干燥。加50µl无RNA酶水溶解RNA。为方便溶解,可用移液器反复吹打。在55-60°C孵育10-15分钟。提取的RNA可在-80°C保存。避免反复冻融。

DNA分离步骤
1)DNA沉淀
去除中间相上面的水相。转移包含DNA的中间相至新管中。每mlRDP Trio™试剂中加入300μl无水乙醇。混匀,室温静置3min。4℃离心12000 ×g(≈13000rpm)5分钟。

2)DNA清洗
取上清,勿碰沉淀。上清2-8℃保存用于蛋白提取。用1 ml 含0.1M柠檬酸三钠和10%乙醇的溶液清洗DNA沉淀。DNA沉淀室温下静置30分钟。7500×g (≈10,500 rpm)4°C离心5分钟。弃上清,重复清洗1次。
弃上清,用1.5ml75%乙醇溶解DNA沉淀。再室温静置10~20分钟,再7500×g (≈10,500 rpm) 4°C离心5分钟。
提示:乙醇中的样本可在2-8°C保存几个月。

3)DNA复溶
弃上清,勿碰沉淀。风干DNA沉淀5~10分钟。加DNA沉淀中加100l洗脱缓冲液(10mM Tris-Cl, pH 8.5,货号DS0040) ,7500×g (≈10,500 rpm)4°C离心10分钟,以去掉不溶物。转移上清至新管中。纯化的DNA即为基因组DNA,2-8°C可保存1-2天。-20°C或-80°C可长期保存。避免反复冻融,因其可能造成DNA变性。洗脱液有助于稳定DNA。

蛋白分离步骤
1) 蛋白质沉淀
从纯化DNA第2步分离到的上清液中沉淀蛋白质。每ml RDP Trio™ 试剂加入1.5ml异丙醇。让样品在室温

(15-25℃)下静置10分钟。再在4℃下离心12,000xg(13,000rpm)10分钟。

2)蛋白质清洗
弃掉上清液而勿碰沉淀。加入2ml 0.3M盐酸胍、95%乙醇溶液洗涤沉淀。让沉淀在室温(15-25℃)静置20分钟。在4℃离心7,500 x g(10,500rpm)5分钟。弃去上清液并重复该洗涤步骤两次。弃去上清液,加2ml 96-100%乙醇,涡旋以溶解蛋白质沉淀。让样品在室温下(15-25℃)静置20分钟。再4°C下

以 7,500 x g(10,500rpm)离心5分钟。

3)蛋白质复溶
弃掉上清液而勿碰沉淀。将蛋白质沉淀短暂风干5-10分钟。向蛋白质沉淀添加适量的1%SDS。以7,500 x g(≈10,500rpm)4°C离心10分钟,以去除任何不溶物质。将上清液转移到新管中。
提取的蛋白质溶液可立即用于Western蛋白印迹或储存在-20℃。

存储条件及效期
15--25°C,效期1年

参考文献
1. Chomczynski P., BioTechniques 15,532-537(1993).
2. Chomczynski P. and Sacchi,N., Anal .Biochem.,162,156-159(1987).

专业人工修改样例一
原文:
AT89C51是一种带4KB字节在系统可编程Flash存储器的低电压、高性能CMOS 8位微控制器。由于将多功能的8位CPU和闪速存储器组合在单个芯片中,使得AT89C51单片机为众多嵌入式控制系统提供灵活性好、高效的解决方案。
P1口:P1口是一个内部提供上拉电阻的8位双向I/O口,P1口缓冲器能接收输出4TTL门电流。P1口管脚写入1后,被内部上拉为高,可用作输入,P1口被外部下拉为低电平时,将输出电流,这是由于内部上拉的缘故。

改后:
AT89C51作为一种CMOS 8位微控制器,具有低电压以及高性能的特征,其自带4KB字节系统编程Flash存储器。因为能够在单个芯片里面组合有多功能8位CPU与闪速存储器,所以AT89C51单片机可以给多种类型的嵌入式控制系统提供高效且灵活的解决方案。
P1口:P1口作为典型的8位双向I/O口,可以在内部提供上拉电阻,其缓冲器可以接收与输出4TTL门电流。在P1口管脚当中写入1之后,可以在内部上拉成高,并用于输入。在P1口被外部下拉成低电平的情况下,可以直接输出电流,由此实现内部上拉。

样例二

原文:
3. 但是,要建立一个综合、完善、有效的水权制度还需要在许多重要的方面进行完善。2012年1月12日,国务院以国发〔2012〕3号文件发布了《国务院关于实行最严格水资源管理制度的意见》(以下简称《意见》),这是继2011年中央1号文件和中央水利工作会议明确要求实行最严格水资源管理制度以来,国务院对实行该制度做出全面部署和具体安排,是指导当前和今后一个时期我国水资源工作十分重要的纲领性文件。

改后:
3. 然而如果想要构建一套完善且有效的水权制度,尚需要在多个关键环节予以完善。国务院在2012年初下发了《关于严格执行水资源管理制度的意见》(下文统一简称为《意见》),此为自2011年中央1号文件以及中央水利工作会议针对水资源管理制度做出明确要求开始,由国务院负责的一次全面安排部署该制度,能够为当前以及未来一段时间内我国开展水资源管理工作提供纲领文件支持。
样例三

原文:
一般情况下,护患沟通都传递了患者在当时特定环境下的需要和信息。护士要对患者反应的信息或非语言信息做到及时的反馈。这样不仅可以及时的解决患者的问题,满足患者的需要,并使患者感受到关心、温暖以及重视,增进了护患关系。
2.5随时向患者提供健康的相关信息并进行健康教育,在护理过程中,护士应随时发现机会,为病人提供健康信息及健康教育。如患者将面临痛苦的检查及治疗时,会有焦虑、恐惧和不安的感觉,护士应该仔细观察患者的表现,及时为患者提供信息和指导。正确的选择提供信息的时间,护士应该首先评估患者接收信息状态和承受能力,然后再进行有针对性的教育。

改后:
通常而言,护患之间的沟通能够传递出患者在特定条件下所表现出的需求信息。护士应该及时反馈患者所反应出来的信息或者是非语言信息,如此不但能够及时且有针对性的解决患者的实际问题,切实满足患者需求,同时还能够让患者感受到温暖与关怀,进而密切护患关系。
2.5开展健康教育,引导患者掌握相关的健康信息。护士在为患者提供护理的时候,需要做到随时发现机会,帮助患者掌握必要的健康知识与信息。比如患者在接受具有痛苦的检查或者是治疗之前,往往都会表现出焦虑感以及恐惧感,在这种情况下,护士应随时观察患者表现,针对患者的信息接收状态以及心理承受能力做出评估,并选择恰当机会针对患者开展健康指导。

样例四

原文:
不少国内外企业纷纷跻身这一市场,市场日趋饱和,市场价格存在压力,使得国内市场竞争尤为激烈
建立一套合理的绩效考核体系来激励和留住生产线员工
使员工了解自己的工作绩效,感受到自己的工作绩效得到认可与尊重,了解自己有待于提高的地方。
通过整体绩效管理,可以发现公司运营状况,及时了解发展战略实施过程中存在的问题,并通过修正策略,跟踪行动计划和绩效结果
也可以为员工招聘录用、岗位轮换、职位迁升、薪酬调整、员工培训发展等人力资源管理活动提供翔实的资料和信息

改后:
有大量国内外企业陆续进军该市场,使得市场空间逐渐饱和,市场价格压力明显,导致国内市场竞争日趋白热化
通过构建完善的绩效考核体系,可以有效激励以及留住生产线员工
引导员工全面了解个人的工作绩效情况,明确感受到企业尊重与认可个人的工作绩效,并且掌握需要进一步强化之处。
在开展整体绩效管理的基础上,能够全面了解企业当前运营状况,明确在发展战略实施的过程当中所暴露出来的问题,然后采取修正策略,对行动计划以及绩效结果进行随时跟踪
同时也能够给员工招录、职位晋升、岗位轮换、员工培训以及薪资待遇调整等各项人力资源管理工作提供可靠的资料信息支持

样例五

原文:
互联网时代,手机等移动终端的出现,给卷烟企业提供了新颖、有效的营销手段以补充原有的专营制度下营销模式的缺陷,低成本地构建卷烟企业与消费者之间信息交换的渠道,使
信息和数据能有效地在二者之间流通,能有效地提升行业发展的动力和活力。
李克强总理在出席首届世界互联网大会时指出,互联网是大众创业、万众创新的新工具。其
中“大众创业、万众创新”正是此次政府工作报告中的重要主题,被称作中国经济提质增效
升级的“新引擎”,可见其重要作用。
改后:
在互联网的浪潮之下,以智能手机为代表的移动终端相继出现,能够为卷烟企业提供具有创新性与高效性的营销手段,对传统专营制度之下的营销模式不足可以起到补充作用,通过较低成本建立卷烟生产企业与消费者间的信息沟通渠道,促使信息与数据的快速流通,为卷烟行业的发展赋予新的活力。
李克强总理在全球第一届互联网会议上发表重要讲话,明确提出互联网应作为大众创业以及万众创新的重要工具,其中“大众创业与万众创新”也是本次政府工作报告的核心议题之一,更是中国经济健康发展以及产业升级转型的原动力,重要性可见一斑。
样例六

原文:
刘小兵提出监管即公共关注,是指政府以效率和公平为管制目标,以不完全竞争、外部性、信息失灵和偏好不合理等市场缺陷为管制对象,凭借行政权力做出并直接执行的直接干预市场配置机制和改变企业与消费者的供需决策的一般规则或特殊行为[11]。
经济合作和发展组织(OECD)对监管的界定则包括了政府和有政府授予了监管权力的所有非政府部门、自律组织所颁布的所有法律、法规、正式与非正式调控、行政规章等,是政府为保证市场有效运行所做的一切[12]。

改后:
刘小兵研究认为,监管等同于公共关注,具体指的是政府为达到公平与效率的管制目的,针对不完全竞争、信息失灵、外部性以及偏好不合理等一系列市场缺陷问题,通过行政权力制定规范标准,从而能够直接干预市场配置机制以及供需决策等行为 [11]。
世界经合与发展组织(OECD)针对监管做出的定义是:政府部门及其授予监管职权的其他非政府组织通过制定行政规章、颁发法律法规以及实施正式或非正式调控的手段开展一切监督管理活动,其目的是要确保市场的稳定合理运行 [12]。


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