《小普课堂十四》
[哆啦A梦花心]【质粒抽提】
质粒作为载体广泛应用于目的基因的克隆、测序、表达等工作。质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。
理论基础：
细菌质粒是一类双链闭环的小分子DNA，独立存在于染色体之外，能够进行自我复制。
提取质粒DNA的方法：
（一）碱裂解法
碱裂解法即用碱与SDS从E. coli（大肠杆菌）中分离制备质粒DNA。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。在处理时间和强度合适的情况下，当PH值恢复中性时，质粒DNA双链就会再次形成。
（二）煮沸法
将细菌悬浮于含有Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，然后加热到100℃破坏细菌外壁、使蛋白质和染色体DNA变性、并解开DNA链的碱基配对。但是。闭环质粒DNA链因为它们的磷酸二酯骨架具有互相缠绕的拓扑结构，所以彼此不会分离。当温度下降后，闭环DNA的碱基又各就各位，形成超螺旋分子。接着离心除去变性的染色体DNA和蛋白质，就可从上清中回收质粒DNA。
（三）质粒提取试剂盒
用于大肠杆菌中质粒DNA的小量提取，它结合了优化的碱裂解法，以及方便快捷的硅膜离心技术，具有高效，快捷的特点，能在30min内完成全部操作。
其中：碱裂解法是从事生物分子学研究的实验室每天都要用到的常规技术，我们一起来看下吧~#小普课堂#
[哆啦A梦花心]【质粒抽提】
质粒作为载体广泛应用于目的基因的克隆、测序、表达等工作。质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。
理论基础：
细菌质粒是一类双链闭环的小分子DNA，独立存在于染色体之外，能够进行自我复制。
提取质粒DNA的方法：
（一）碱裂解法
碱裂解法即用碱与SDS从E. coli（大肠杆菌）中分离制备质粒DNA。将细菌悬浮液暴露于高pH值的强阴离子洗涤剂中，使细胞壁破裂，染色体DNA和蛋白质变性，将质粒DNA释放到上清中。在处理时间和强度合适的情况下，当PH值恢复中性时，质粒DNA双链就会再次形成。
（二）煮沸法
将细菌悬浮于含有Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，然后加热到100℃破坏细菌外壁、使蛋白质和染色体DNA变性、并解开DNA链的碱基配对。但是。闭环质粒DNA链因为它们的磷酸二酯骨架具有互相缠绕的拓扑结构，所以彼此不会分离。当温度下降后，闭环DNA的碱基又各就各位，形成超螺旋分子。接着离心除去变性的染色体DNA和蛋白质，就可从上清中回收质粒DNA。
（三）质粒提取试剂盒
用于大肠杆菌中质粒DNA的小量提取，它结合了优化的碱裂解法，以及方便快捷的硅膜离心技术，具有高效，快捷的特点，能在30min内完成全部操作。
其中：碱裂解法是从事生物分子学研究的实验室每天都要用到的常规技术，我们一起来看下吧~#小普课堂#
寰基基因芯片高通量核酸检测，创新性的实现多种病原体及人体自身基因的并行检测。例如我公司开发的呼吸系统检测项目（见下表），高通量检测即一次检测既可检测冠状病毒，还可同时检测其它的43种呼吸道病原体，满足诊断、治疗、防疫等多种应用需要。
只需一次检测，可覆盖44种呼吸道病原体：
病毒27项 细菌14项 真菌1项 支原体、衣原体2项
新型冠状病毒（SARS-CoV-2019） 肺炎链球菌（SP） 白色念珠菌（CAL） 肺炎支原体（MP）
甲型流感病毒（H1N1） 流感嗜血杆菌（HI） 肺炎衣原体（CP）
甲型流感病毒（H1N2） 鲍曼不动杆菌（AB）
甲型流感病毒（H3N2） 结核分枝杆菌（TB）
乙型流感病毒（IFV-B） 嗜肺军团菌（LP）
合胞体病毒（RSV-A） 百日咳杆菌（BP）
合胞体病毒（RSV-B） 肺炎克雷伯氏菌（KP）
鼻病毒（RHV） 脑膜炎球菌（NM）
偏肺病毒（MPV-RP） 绿脓杆菌（PA）
副流感病毒1型（PFLU-1） 金黄色葡萄球菌（SA）
副流感病毒2型（PFLU-2） 大肠杆菌（E.coli）
副流感病毒3型（PFLU-3） 布鲁氏菌（Bru）
副流感病毒4型（PFLU-4） A族溶血性链球菌（GAS）
EB病毒（EB） B族溶血性链球菌（GBS）
巨细胞病毒（HCMV）
腺病毒1.2.5.6亚型（AV I）
腺病毒3.4.7.21亚型（AV II）
腺病毒8.14.19.25亚型（AV III）
只需一次检测，可覆盖44种呼吸道病原体：
病毒27项 细菌14项 真菌1项 支原体、衣原体2项
新型冠状病毒（SARS-CoV-2019） 肺炎链球菌（SP） 白色念珠菌（CAL） 肺炎支原体（MP）
甲型流感病毒（H1N1） 流感嗜血杆菌（HI） 肺炎衣原体（CP）
甲型流感病毒（H1N2） 鲍曼不动杆菌（AB）
甲型流感病毒（H3N2） 结核分枝杆菌（TB）
乙型流感病毒（IFV-B） 嗜肺军团菌（LP）
合胞体病毒（RSV-A） 百日咳杆菌（BP）
合胞体病毒（RSV-B） 肺炎克雷伯氏菌（KP）
鼻病毒（RHV） 脑膜炎球菌（NM）
偏肺病毒（MPV-RP） 绿脓杆菌（PA）
副流感病毒1型（PFLU-1） 金黄色葡萄球菌（SA）
副流感病毒2型（PFLU-2） 大肠杆菌（E.coli）
副流感病毒3型（PFLU-3） 布鲁氏菌（Bru）
副流感病毒4型（PFLU-4） A族溶血性链球菌（GAS）
EB病毒（EB） B族溶血性链球菌（GBS）
巨细胞病毒（HCMV）
腺病毒1.2.5.6亚型（AV I）
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只需一次检测，可覆盖44种呼吸道病原体：
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甲型流感病毒（H1N1） 流感嗜血杆菌（HI） 肺炎衣原体（CP）
甲型流感病毒（H1N2） 鲍曼不动杆菌（AB）
甲型流感病毒（H3N2） 结核分枝杆菌（TB）
乙型流感病毒（IFV-B） 嗜肺军团菌（LP）
合胞体病毒（RSV-A） 百日咳杆菌（BP）
合胞体病毒（RSV-B） 肺炎克雷伯氏菌（KP）
鼻病毒（RHV） 脑膜炎球菌（NM）
偏肺病毒（MPV-RP） 绿脓杆菌（PA）
副流感病毒1型（PFLU-1） 金黄色葡萄球菌（SA）
副流感病毒2型（PFLU-2） 大肠杆菌（E.coli）
副流感病毒3型（PFLU-3） 布鲁氏菌（Bru）
副流感病毒4型（PFLU-4） A族溶血性链球菌（GAS）
EB病毒（EB） B族溶血性链球菌（GBS）
巨细胞病毒（HCMV）
腺病毒1.2.5.6亚型（AV I）
腺病毒3.4.7.21亚型（AV II）
腺病毒8.14.19.25亚型（AV III）
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甲型流感病毒（H1N1） 流感嗜血杆菌（HI） 肺炎衣原体（CP）
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EB病毒（EB） B族溶血性链球菌（GBS）
巨细胞病毒（HCMV）
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腺病毒8.14.19.25亚型（AV III）
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