【基于 CRISPR/Cas9 的 gRNA-tRNA 阵列猪胎儿成纤维细胞多重基因组工程】#tandf优秀文章推荐# Multiplexed genome engineering for porcine fetal fibroblasts with gRNA–tRNA arrays based on CRISPR/Cas9
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多重基因修饰遍布于猪的各个研究领域。在许多物种中，CRISPR/Cas9 系统已被广泛应用于基因组编辑，为同时引入多重基因组突变提供了潜在的工具。在这篇研究中，作者介绍了一种用于猪胎儿成纤维细胞（PFFs）多重工程的 CRISPR-Cas9 gRNA-tRNA 阵列（GTR-CRISPR）。作者利用猪细胞的内源性 tRNA 处理机制，仅用一个 Pol III 启动子就成功地生产出了多个 sgRNA。利用携带 GTR 和 Cas9 的一体化构建体，作者在一个 PFF 细胞中同时破坏了多个密码子区的 IGFBP3、MSTN、MC4R 和 SOCS2 基因。这种技术可以同时破坏四个基因，效率高达 5.5%。因此，这种方法可以同时有效地靶向多个基因，是在猪体内建立多基因突变细胞的有力工具。

*图1：GTR–CRISPR is a CRISPR/Cas9 system for multiplex genome editing in porcine. (A) The secondary structure of tRNA. (B) Schematic of GTR–CRISPR for CRISPR/Cas9 multiplex genome editing in PFFs. The primary RNA transcript is split by porcine endogenous tRNA-processing enzymes, endogenous RNase P and RNase Z, after transformation to PFFs, resulting in functional guide RNAs for genome editing.

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p1 想鼠，上班都想鼠
p2 上完班无聊住了，狗豚还要上班呜呜呜，我孤独溜达，狗狗乐园，很多玩具也没用，他们只喜欢打架[汗]

走着走了累了，自己去吃烤肉了，店里好多海报，继承者，来着星星的你，梦回了呜呜呜

p7 路过一家书店，好像魔法小屋，1200bookstore好宝藏啊

p11 科研人的福是tRNA

p12 518的小伙伴

p13 和同门一起吃的重庆小面，跟贺老师的学生一起，那个女生很像苏大碟，真的感觉好亲切

p14 游泳完，清爽出街

p15 我们在考察这个冬天能哈出气吗哈哈哈哈哈

游玩泳去吃牛杂煲咯，我跟zzm说两个师兄都带我们去这家店吃过，去尝尝他家别的东西，好吃！

p18 找一天空出发顺德啦…

启动子
是RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA 序列，它含有RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列，多数位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身不被转录。但有一些启动子(如tRNA启动子)位于转录起始点的下游,这些DNA序列可以被转录。启动子的特性最初是通过能增加或降低基因转录速率的突变而鉴定的。启动子一般位于转录起始位点的上游。