全自动固相萃取仪的使用步骤
1.选择小柱或滤膜
小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品, 一般应选用尽量少的固定相填料萃取较大体积的样品。
2.活化
萃取前先用充满小柱的溶剂冲洗小柱或用5-10ml 溶剂冲洗滤膜使填料保持湿润, 因为填料干燥会降低样品保留值,而各小柱的干燥程度不一,也会影响回收率的重现性。
3.上样
一般可采取以下四种方法:
(1) 用0.1mol/L 酸或碱调节, 使pH<3或pH>9, 离心取上层液萃取;
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白质后取上清液, 以水或缓冲液稀释后萃取;
(3)用酸或无机盐沉淀蛋白质后取上清液, 调节pH 值后萃取;
(4)超声15min后加入水、缓冲液, 取上清液萃取。流速应控制为1ml/min, 流速快不利于待测物与固定相结合。
4.淋洗
反相SPE的清洗溶剂多为水或缓冲液, 可在清洗液中加入少量有机溶剂、无机盐或调节pH值。加入小柱的清洗液应不超过一个小柱的容积, 而SPE滤膜为5~10ml。
5.洗脱
应选用5~10ml离子强度较弱但能洗下待测物的洗脱溶剂。若需较高灵敏度, 则可先将洗脱液挥干后, 再用流动相重组残留物后进样。体内样品洗脱后多含有水, 可选用冷冻干燥法。保留能力较弱的SPE 填料可用小体积、较弱的洗脱液洗下待测物,再用极性较强的HPLC 分析柱分析洗脱物。
1.选择小柱或滤膜
小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品, 一般应选用尽量少的固定相填料萃取较大体积的样品。
2.活化
萃取前先用充满小柱的溶剂冲洗小柱或用5-10ml 溶剂冲洗滤膜使填料保持湿润, 因为填料干燥会降低样品保留值,而各小柱的干燥程度不一,也会影响回收率的重现性。
3.上样
一般可采取以下四种方法:
(1) 用0.1mol/L 酸或碱调节, 使pH<3或pH>9, 离心取上层液萃取;
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白质后取上清液, 以水或缓冲液稀释后萃取;
(3)用酸或无机盐沉淀蛋白质后取上清液, 调节pH 值后萃取;
(4)超声15min后加入水、缓冲液, 取上清液萃取。流速应控制为1ml/min, 流速快不利于待测物与固定相结合。
4.淋洗
反相SPE的清洗溶剂多为水或缓冲液, 可在清洗液中加入少量有机溶剂、无机盐或调节pH值。加入小柱的清洗液应不超过一个小柱的容积, 而SPE滤膜为5~10ml。
5.洗脱
应选用5~10ml离子强度较弱但能洗下待测物的洗脱溶剂。若需较高灵敏度, 则可先将洗脱液挥干后, 再用流动相重组残留物后进样。体内样品洗脱后多含有水, 可选用冷冻干燥法。保留能力较弱的SPE 填料可用小体积、较弱的洗脱液洗下待测物,再用极性较强的HPLC 分析柱分析洗脱物。
固相萃取的一般操作程序如下
1、预处理活化:
用适当的溶液对固相萃取柱进行预处理活化,可以展开碳氢链,增加和目标分析物作用的表面积,可以除去柱上吸附的对分析有影响的杂质,保证良好的萃取再现性,同时注意在上样前预处理好的固相柱必须保持湿润。
2、上样:
将样品加于固相萃取柱中,用正压或负压使样品通过柱子,控制好样品的流速,对于生物样品,一般控制在1.5 ml/min。对于以离子交换为作用机理的萃取,样品通过固相萃取柱的速度应该适当的降低,以保证分析物有足够的时间与SPE柱填料的离子交换功能团发生充分的作用。
3、淋洗:
用适当的清洗溶剂选择性地洗掉附着力弱的杂质而保留目标分析物于固相萃取柱上。清洗溶剂的选择取决于最后的分析手段。
4、干燥:
如最后的清洗溶剂为缓冲溶液或水溶性有机溶剂,而分析手段为反相HPLC,固相柱上的残留水对分析影响不大。但是,当洗脱剂为非水溶性有机溶剂或分析手段又为GC或GC-MS时,固相柱的干燥就显得特别重要。
5、目标分析物洗脱:
选择洗脱溶剂时必须考虑有足够强度的洗脱剂,要以最小用量的洗脱剂将尽可能多的目标分析物洗脱下来;同时还要兼顾洗脱剂必须有足够的选择性,选择只将目标分析物洗脱,而吸附力强的杂质保留在柱上。
1、预处理活化:
用适当的溶液对固相萃取柱进行预处理活化,可以展开碳氢链,增加和目标分析物作用的表面积,可以除去柱上吸附的对分析有影响的杂质,保证良好的萃取再现性,同时注意在上样前预处理好的固相柱必须保持湿润。
2、上样:
将样品加于固相萃取柱中,用正压或负压使样品通过柱子,控制好样品的流速,对于生物样品,一般控制在1.5 ml/min。对于以离子交换为作用机理的萃取,样品通过固相萃取柱的速度应该适当的降低,以保证分析物有足够的时间与SPE柱填料的离子交换功能团发生充分的作用。
3、淋洗:
用适当的清洗溶剂选择性地洗掉附着力弱的杂质而保留目标分析物于固相萃取柱上。清洗溶剂的选择取决于最后的分析手段。
4、干燥:
如最后的清洗溶剂为缓冲溶液或水溶性有机溶剂,而分析手段为反相HPLC,固相柱上的残留水对分析影响不大。但是,当洗脱剂为非水溶性有机溶剂或分析手段又为GC或GC-MS时,固相柱的干燥就显得特别重要。
5、目标分析物洗脱:
选择洗脱溶剂时必须考虑有足够强度的洗脱剂,要以最小用量的洗脱剂将尽可能多的目标分析物洗脱下来;同时还要兼顾洗脱剂必须有足够的选择性,选择只将目标分析物洗脱,而吸附力强的杂质保留在柱上。
#固相萃取#
BM-QuEChERS 基质分散前处理快速试剂,是近年来国际上最新发展起来的一种用于农产品检測的快速样品前处理技术。最早由美国农业部 M Anastassisdes 等(2003)研发,后经过多方面的验证和改进,正式提出了 QuEChERS 方法。Q农残前处理方法属于 SPE 的升级版本,它具有与 SPE 相似的净化效果,但处理步骤更简洁,具有省时、高效、经济等特点,逐渐为广大分析工作者所接受。使用Q试剂盒、只需要几个简单的步骤,即可完成多类别、多残留农药分析的样品制备。
BM-Q 系列产品是百迈生命科学基于 Q 开发的一系列样品快速处理产品,可以应用于农药残留检测,兽药残留检測,食品添加剂检测等多种领域;该类产品可以使用的吸附剂种类很多,例如 BM-GCB 除色素,BM-PSA 去除蛋白及有机酸,BM-NH2 去除有机酸,BM-WCX 去除碱性物质,BM-C18 去除脂肪等 有机物,氧化铝去除脂肪,无水硫酸镁去除水份,另外通过加入一些缓冲盐,可以希助对药物更好的提取。可以采取多种搭配方法,适应不同的前处理需求.
产品特色:
★包装多样(袋装/管装)
★药物回收率高
★适用范囤广
★流程简捷
★结果可靠
★产品环保
流程说明:样品处理;为保证样品均一性良好,使用前需要对蔬菜水果等固态样品进行切碎匀浆,通常使用蔬菜水果样品 10-1 5g,高速蛆织匀浆机勾浆(转速 11000r/min-24000 r/min).
第一步:样品提取;称量适量的打碎的样品到 BM-Q 提取管中,加入适当的有机溶剂充分混合,均质或超声提取后离心 取上清液待净化.
笫二步:净化根据样品选择合适的 BM-Q 净化管,将提取液加入到净化管中,充分震荡混匀,离心取上清液浓缩 或直接进样检測。复杂基质经过一次净化管净化后可将上清液继续使用其他净化管净化达别理想的 净化效果.
注意事项:当样品加入含有无水硫酸镁成分的净化管时,可能会有发热和产气现象产生,建议振摇一段时间后间断 的打开离心管放气后继续振摇和其他操作。含水量大的样品加入含有无水硫酸镁成分的净化管时,操作 时请先加入提取溶剂后再加入样品,防止样品与无水硫酸镁产生结块现象。请注意产品的密封保存。 产品拆开包装以后如果一次使用不完,可以用密封袋密闭保存,或将产品放在干燥皿或干燥通风处储存.
BM-Q 产品是 Anastassiades 于 2003 年提出的一种样品前处理方法,目前已经广泛应用于食品、环境水样和土壤污染物的检測。我公司该类产品适用于中国农业部 NY/T、美国 A0AC 和欧盟 EN 相关方法。
#专业生产样本前处理耗材#
BM-QuEChERS 基质分散前处理快速试剂,是近年来国际上最新发展起来的一种用于农产品检測的快速样品前处理技术。最早由美国农业部 M Anastassisdes 等(2003)研发,后经过多方面的验证和改进,正式提出了 QuEChERS 方法。Q农残前处理方法属于 SPE 的升级版本,它具有与 SPE 相似的净化效果,但处理步骤更简洁,具有省时、高效、经济等特点,逐渐为广大分析工作者所接受。使用Q试剂盒、只需要几个简单的步骤,即可完成多类别、多残留农药分析的样品制备。
BM-Q 系列产品是百迈生命科学基于 Q 开发的一系列样品快速处理产品,可以应用于农药残留检测,兽药残留检測,食品添加剂检测等多种领域;该类产品可以使用的吸附剂种类很多,例如 BM-GCB 除色素,BM-PSA 去除蛋白及有机酸,BM-NH2 去除有机酸,BM-WCX 去除碱性物质,BM-C18 去除脂肪等 有机物,氧化铝去除脂肪,无水硫酸镁去除水份,另外通过加入一些缓冲盐,可以希助对药物更好的提取。可以采取多种搭配方法,适应不同的前处理需求.
产品特色:
★包装多样(袋装/管装)
★药物回收率高
★适用范囤广
★流程简捷
★结果可靠
★产品环保
流程说明:样品处理;为保证样品均一性良好,使用前需要对蔬菜水果等固态样品进行切碎匀浆,通常使用蔬菜水果样品 10-1 5g,高速蛆织匀浆机勾浆(转速 11000r/min-24000 r/min).
第一步:样品提取;称量适量的打碎的样品到 BM-Q 提取管中,加入适当的有机溶剂充分混合,均质或超声提取后离心 取上清液待净化.
笫二步:净化根据样品选择合适的 BM-Q 净化管,将提取液加入到净化管中,充分震荡混匀,离心取上清液浓缩 或直接进样检測。复杂基质经过一次净化管净化后可将上清液继续使用其他净化管净化达别理想的 净化效果.
注意事项:当样品加入含有无水硫酸镁成分的净化管时,可能会有发热和产气现象产生,建议振摇一段时间后间断 的打开离心管放气后继续振摇和其他操作。含水量大的样品加入含有无水硫酸镁成分的净化管时,操作 时请先加入提取溶剂后再加入样品,防止样品与无水硫酸镁产生结块现象。请注意产品的密封保存。 产品拆开包装以后如果一次使用不完,可以用密封袋密闭保存,或将产品放在干燥皿或干燥通风处储存.
BM-Q 产品是 Anastassiades 于 2003 年提出的一种样品前处理方法,目前已经广泛应用于食品、环境水样和土壤污染物的检測。我公司该类产品适用于中国农业部 NY/T、美国 A0AC 和欧盟 EN 相关方法。
#专业生产样本前处理耗材#
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