关于质粒提取的小技巧
内容：
现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以多管浓缩提取，提到的质粒量多，可以-20℃保存，以后用于酶切、转化等实验，可以提前跑个胶，只要不降解，就可以继续用，避免每次要用，都要培养一遍再提取一遍。
1.质粒DNA提取
提取质粒的时候，最后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，最好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。
将amp浓度提高到200μg/mL，下班前接种，次日一早收获菌体，此时OD虽然不高，质粒丰度却不一般。菌体量少些，操作体积(管数)也小(少)。
手提质粒，如果用氛氯仿和氯仿两步抽提，再注意一下手法，严格按照参考书上面的操作的话，提出的质粒不比任何质粒提取试剂盒差，我感觉好像还好一点，我就用过一次试剂盒，比较了之后不如我手提的好，以后再也没用过了。
2. Western Blot
做western blot的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说，节约了大量的时间。
做western blot转膜时，胶放在转膜缓冲液中一段时间，待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的差不多后装 好转膜装置，我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带，方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚，等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了，以防maker失去参照价值。
器具的清洁非常重要，开始做前，为了安全，尤其是装胶的厚薄玻璃板，可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗，确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2～3遍，然后用去离子水冲洗一遍。最后用95%酒精再擦一遍后晾干备用。
配胶最好现用现配，先配下层胶(分离胶)，后配上层胶(浓缩胶或积层胶)，而且在临灌胶前加APS并迅速混匀，即用移液枪抽吸与注入1～2次即可。
3. 缓冲液和培养基配置
(1)将缓冲液配方中的成分分别以10～100倍配成母液储存，需要的时候只需将相应的母液混合，补加水稀释即可;
(2)配培养基时通常会忘记各成分的量，如，配LB时的三个成分不记得到底哪个是5 g，哪个要10个，因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量，如，配LB时，在NaCl瓶外注明10g/L，yeast5g/L，tryton10g/L等，很方便，不需要每次配之前临时翻书。
4. PCR
在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定，每次配置PCR反应液很繁琐，可以将其配置类似kit的形式，按你需要的反应体系列表，然后放大100倍配置100×主反应液(100次反应)，其中含buffer，Mg2+，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在-20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样做的好处如下：
(1)可极大的节省宝贵的时间，可早点收工，看球;
(2)避免每次反应加样不均的可能;
(3)大大减少PCR假阳性的产生。
5. 酶切
如果是要做酶切，提质粒的最后一步最好是用水溶解DNA，因为，TE里面的离子会影响酶切的效率。双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。空质粒单切完全和双切完全在分子量上差异不大。在做酶切时，也可以象PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入buffer、酶、水，质粒栏空缺，然后混合后按除质粒DNA的体积分装，然后，再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切，这样做的好处如下，特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显：
(1)各反应成分均一;
(2)可大大减少限制型内切酶的使用;
(3)节省时间。
6.大肠杆菌转化实验
有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大(1~2毫米以上，BL21就长得快)，下一步转化子做质粒鉴定。这个情况下可以直接挑取一块菌苔(勿带出培养基)，50微升酚/氯仿悬浮菌体，放置两分钟，加40微升TE抽提，上层TE吸出后再氯仿抽提一次，吸取上层TE即是质粒提取液。提取的质粒可以直接用于电泳和酶切。这样操作，可以省去转接液体试管的培养步骤，至少节省6~8小时的时间。但是，要在各步骤都控制得很好的情况下才能保证提取和酶切的效果，不同的实验室或者操作者未必能够很方便地重复。
转化时一定要做一个宿主菌的对照，即，重组质粒涂板后再用宿主菌涂响应抗性的平板，以确定第二天长出来的克隆是否正确，我当时做了三次转化之后才发现不成功竟然是由于BL21可以在Amp(+)的平板上面生长。
7.蛋白质的表达、分离、纯化
当蛋白大量的表达时，包含体的形成几乎是不可避免的，而且很难通过改变一些诱导条件来改变，最有效的办法就是换表达系统，所以如果时间还充分的话，可以尝试一下，如果时间较短了，还是安心的座包含体蛋白的处理算了，而且变性之后的蛋白通过一些方法复性率也可以达到60%以上。
8. PCR扩增产物的克隆
引物设计主要是要注意以下几个事项：
(1)发夹结构;
(2)反向配对;
(3)GC含量(40～60%);
(4)退火温度(45～65度);
(5)引物长度(18～27bp);
(6)3'端最好是C、G(提高结合度);
(7)引物在序列中的错配位点;
※大致就这几个方面，重要性依次降低，由其是3'端绝对不能形成发夹结构。
那么你说你这段能不能设计引物呢?其实设计引物都只是好中选优的问题。
9.细胞冻存和复苏实验
(1)可以提前把需要的体积的培养液放到培养瓶里，拧松瓶盖，放到孵箱里半小时到1小时，这样温度和pH值都已经最适合细胞生长了。
(2)为防止冻存管在升温时爆裂等，可以在放入水浴前就实现在超净台里把盖子拧松一下然后再拧上。从液氮罐里拿出来不是说一定要分秒必争地放入水浴。细胞从液氮的零下1百多度升到比如负八十这个过程对细胞没有损害。有足够的时间handle这些。只不过一旦细胞化了，就应该争分夺秒地把它放入培养液了，主要是为了：稀释DMSO。常温下高浓度DMSO对细胞的损害比较大。
(3)水浴温度40℃应该也没问题，但正规的protocol上从来都只说37℃。反正应该相差不大，但不能太高了。另外，不必等细胞全化了再从水浴里取出来。只要冰块浮起来了就差不多了。我一般最多水浴不超过1.5分钟。然后经过喷酒精消毒什么的差不多又半分钟过去了。每次都还有没化的。先把已经融解的部分吸到培养瓶里，再从培养瓶里吸些培养液到冻存管里，余下的冰块瞬间就化了，再一起吸到培养瓶里。
10.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
(1)RT-PCR有两种做法
条件具备的话可用kit进行一步法进行;若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想，条带特异性强且无拖尾现象，我推测是体系更加单一比较利于PCR的进行，当然也可能是我买的kit不太好。(promega)。
(2)RT-PCR应具备的条件
高质量的RNA(保留后可做5‘，3’RACE);引物的(最好产物短点);若涉及粗略定量的话还应考虑RNA的浓度或是cDNA的浓度(如果由内标分子更好，但我发现其实很不容易将RNA的浓度以及内标分子的表达量调整的完全一样);体系的均一性等。
(3)RACE
我做过RACE(3’RACE是宝生物的Kit;5’RACE是Gibico)，但现在再进行另一个同源基因的3‘RACE时却怎么也P不出来，这两个基因是由同一对引物扩增出来的，其中一个已经获得了全序列(RACE的方法)，而另一个基因的3‘UTR却怎么也扩不出来，我推测是不是该基因的3‘UTR太长的缘故。
公众号：毕合生物
毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
内容：
现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以多管浓缩提取，提到的质粒量多，可以-20℃保存，以后用于酶切、转化等实验，可以提前跑个胶，只要不降解，就可以继续用，避免每次要用，都要培养一遍再提取一遍。
1.质粒DNA提取
提取质粒的时候，最后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，最好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。
将amp浓度提高到200μg/mL，下班前接种，次日一早收获菌体，此时OD虽然不高，质粒丰度却不一般。菌体量少些，操作体积(管数)也小(少)。
手提质粒，如果用氛氯仿和氯仿两步抽提，再注意一下手法，严格按照参考书上面的操作的话，提出的质粒不比任何质粒提取试剂盒差，我感觉好像还好一点，我就用过一次试剂盒，比较了之后不如我手提的好，以后再也没用过了。
2. Western Blot
做western blot的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说，节约了大量的时间。
做western blot转膜时，胶放在转膜缓冲液中一段时间，待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的差不多后装 好转膜装置，我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带，方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚，等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了，以防maker失去参照价值。
器具的清洁非常重要，开始做前，为了安全，尤其是装胶的厚薄玻璃板，可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗，确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2～3遍，然后用去离子水冲洗一遍。最后用95%酒精再擦一遍后晾干备用。
配胶最好现用现配，先配下层胶(分离胶)，后配上层胶(浓缩胶或积层胶)，而且在临灌胶前加APS并迅速混匀，即用移液枪抽吸与注入1～2次即可。
3. 缓冲液和培养基配置
(1)将缓冲液配方中的成分分别以10～100倍配成母液储存，需要的时候只需将相应的母液混合，补加水稀释即可;
(2)配培养基时通常会忘记各成分的量，如，配LB时的三个成分不记得到底哪个是5 g，哪个要10个，因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量，如，配LB时，在NaCl瓶外注明10g/L，yeast5g/L，tryton10g/L等，很方便，不需要每次配之前临时翻书。
4. PCR
在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定，每次配置PCR反应液很繁琐，可以将其配置类似kit的形式，按你需要的反应体系列表，然后放大100倍配置100×主反应液(100次反应)，其中含buffer，Mg2+，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在-20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样做的好处如下：
(1)可极大的节省宝贵的时间，可早点收工，看球;
(2)避免每次反应加样不均的可能;
(3)大大减少PCR假阳性的产生。
5. 酶切
如果是要做酶切，提质粒的最后一步最好是用水溶解DNA，因为，TE里面的离子会影响酶切的效率。双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。空质粒单切完全和双切完全在分子量上差异不大。在做酶切时，也可以象PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入buffer、酶、水，质粒栏空缺，然后混合后按除质粒DNA的体积分装，然后，再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切，这样做的好处如下，特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显：
(1)各反应成分均一;
(2)可大大减少限制型内切酶的使用;
(3)节省时间。
6.大肠杆菌转化实验
有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大(1~2毫米以上，BL21就长得快)，下一步转化子做质粒鉴定。这个情况下可以直接挑取一块菌苔(勿带出培养基)，50微升酚/氯仿悬浮菌体，放置两分钟，加40微升TE抽提，上层TE吸出后再氯仿抽提一次，吸取上层TE即是质粒提取液。提取的质粒可以直接用于电泳和酶切。这样操作，可以省去转接液体试管的培养步骤，至少节省6~8小时的时间。但是，要在各步骤都控制得很好的情况下才能保证提取和酶切的效果，不同的实验室或者操作者未必能够很方便地重复。
转化时一定要做一个宿主菌的对照，即，重组质粒涂板后再用宿主菌涂响应抗性的平板，以确定第二天长出来的克隆是否正确，我当时做了三次转化之后才发现不成功竟然是由于BL21可以在Amp(+)的平板上面生长。
7.蛋白质的表达、分离、纯化
当蛋白大量的表达时，包含体的形成几乎是不可避免的，而且很难通过改变一些诱导条件来改变，最有效的办法就是换表达系统，所以如果时间还充分的话，可以尝试一下，如果时间较短了，还是安心的座包含体蛋白的处理算了，而且变性之后的蛋白通过一些方法复性率也可以达到60%以上。
8. PCR扩增产物的克隆
引物设计主要是要注意以下几个事项：
(1)发夹结构;
(2)反向配对;
(3)GC含量(40～60%);
(4)退火温度(45～65度);
(5)引物长度(18～27bp);
(6)3'端最好是C、G(提高结合度);
(7)引物在序列中的错配位点;
※大致就这几个方面，重要性依次降低，由其是3'端绝对不能形成发夹结构。
那么你说你这段能不能设计引物呢?其实设计引物都只是好中选优的问题。
9.细胞冻存和复苏实验
(1)可以提前把需要的体积的培养液放到培养瓶里，拧松瓶盖，放到孵箱里半小时到1小时，这样温度和pH值都已经最适合细胞生长了。
(2)为防止冻存管在升温时爆裂等，可以在放入水浴前就实现在超净台里把盖子拧松一下然后再拧上。从液氮罐里拿出来不是说一定要分秒必争地放入水浴。细胞从液氮的零下1百多度升到比如负八十这个过程对细胞没有损害。有足够的时间handle这些。只不过一旦细胞化了，就应该争分夺秒地把它放入培养液了，主要是为了：稀释DMSO。常温下高浓度DMSO对细胞的损害比较大。
(3)水浴温度40℃应该也没问题，但正规的protocol上从来都只说37℃。反正应该相差不大，但不能太高了。另外，不必等细胞全化了再从水浴里取出来。只要冰块浮起来了就差不多了。我一般最多水浴不超过1.5分钟。然后经过喷酒精消毒什么的差不多又半分钟过去了。每次都还有没化的。先把已经融解的部分吸到培养瓶里，再从培养瓶里吸些培养液到冻存管里，余下的冰块瞬间就化了，再一起吸到培养瓶里。
10.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
(1)RT-PCR有两种做法
条件具备的话可用kit进行一步法进行;若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想，条带特异性强且无拖尾现象，我推测是体系更加单一比较利于PCR的进行，当然也可能是我买的kit不太好。(promega)。
(2)RT-PCR应具备的条件
高质量的RNA(保留后可做5‘，3’RACE);引物的(最好产物短点);若涉及粗略定量的话还应考虑RNA的浓度或是cDNA的浓度(如果由内标分子更好，但我发现其实很不容易将RNA的浓度以及内标分子的表达量调整的完全一样);体系的均一性等。
(3)RACE
我做过RACE(3’RACE是宝生物的Kit;5’RACE是Gibico)，但现在再进行另一个同源基因的3‘RACE时却怎么也P不出来，这两个基因是由同一对引物扩增出来的，其中一个已经获得了全序列(RACE的方法)，而另一个基因的3‘UTR却怎么也扩不出来，我推测是不是该基因的3‘UTR太长的缘故。
公众号：毕合生物
毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
复刻浪琴怎么样？复刻浪琴哪款比较好？精仿浪琴哪个厂好？对于复刻劳力士水鬼而言，做工最好的复刻表也就是来自N厂，神乎其技的做工也是得到了广大表友的一致好评，同时此次N厂水鬼也是V10版与V11版共存，当然更多的还是机芯的不同！在去年的时候N厂劳力士黑水鬼终于迎来了V11版升级了，作为n厂五大神器之一的复刻表，终于能够正面抗衡vr黑水鬼和ar厂黑水鬼。那么在这个V11版，n厂水鬼具体升级了哪些地方，复刻的怎么样，对比正品能否以假乱真？今天也简单的进行一次分享！n厂劳力士水鬼有多真?能以假乱真吗？N厂水鬼而言，在复刻表界的竞争真的是日益激烈，作为行业的老大，N厂一直以来都引领水鬼的发展，小厂想模仿N厂，大厂想挤掉N厂。去年推出的VR厂水鬼以更加出色的外圈颜色和刻字赢得了很多玩家的青睐，的确对N厂造成了一定的冲击。N厂水鬼的推出也是N厂最有效的还击，究竟做工如何?请各位耐心往下看。无可否认，N厂确实是市场最好的水鬼。无论是手表的外观细节还是用料，一直都是有着很大的优势。N厂可谓是行业娇楚，从08年出第一代水鬼以后,每年都会尝试改良制造工艺，选用高品质材料将复刻表的精细程度发挥到极致，基本每年都会推出一个水鬼版本。N厂今次升级的重点是钢质，从316L钢升级到了904L钢，机芯也从反向调时的2836机芯升级成正向调时的自主3135机芯。同时此次V11的出现，也是进行了自主机芯3135，这也是让细节以及功能方面最大限度还原了正版的美感！同时也是目前复刻市场上最佳复刻表！细节方面也是达到了以假乱真的效果！N厂劳力士水鬼到底升级了哪里？V11顶级版本 劳力士Rolex潜航者V11版水鬼强势来袭!!!特别是绿水鬼116610LV的圈口诚意满满，整个陶瓷圈脱胎换骨，按照全新的配方和温度烧制，肉眼下成色和原装毫无差异，彻底碾压市面所有版本。另外实现了【蓝宝夜光石】和【一键弹扣】两大独家技术。克隆原装Cal.3135一体机芯，蓝色游丝，进口KIF避震器(非假三角避震器)!V11版水鬼升级重点：【乱真绿圈】全面解析原装Cerachrom绿色陶质外圈的成分，用二氧化硅包裹纳米合金着色、剂陶瓷着色的技术，通过不同温度的尝试最终确定了在1100到1250摄氏度之间烧制。N厂多年制劳的经验加之多位工程师的呕心沥血，最终给大家呈现出了殿堂级的绿色圈口，肉眼下专业人士也很难分辨真伪，彻底碾压了市场目前所有版本。【蓝宝夜光石】独家技术，在夜光石外层加装了蓝宝石镜面，在仅3mm的直径内加装镜面实属艰难，通过高精准的先进设备，还是顺利的完成了，实现了和原装一样的防刮夜明珠。再一次力挽狂澜的证明了N厂的强大。【外圈刻度不发黑】圈口上的刻度采用物理气相沉积技术，将铂金粉高温涂覆在字体上，使字体颜色耐久，遇水遇油后都不掉色不发黑。【可一键弹扣】表扣的外保险扣和原装一样，只要用手指抠住表扣内侧，另一个手指按压扣身，外保险扣就可以自动弹开。在整个市场也是独家技术。【内扣圈口】陶瓷片和圈口底座为内扣方式结合，而非小厂或者低版本的双面胶粘合。【字面质感升级】字面刻度圆钉的夜光石饱而不溢，拉沙比之前更加细腻!【配件通用原装】采用德国进口数控扫描原装的所有配件，一比一实现所有配件跟原装配件互换，其中包含表壳、圈口、底盖、内罩、生耳、表带、表扣。【进口904L钢】表壳和表带均采用进口高成分904L精钢，非少数厂家用316贴上标签冒充，真正做到硬度强密度高、耐腐蚀抗剐蹭。 NOOB Factory匠心力作 欢迎各路表友品鉴!N厂水鬼细节做工到底如何?近期很多朋友一直期盼已久的N厂新版劳力士黑水鬼终于升级了，陶瓷圈铂金刻度不够明亮，戴时间长会发黑，一直以来都困扰了很多爱好者的心，信和表业也收到了很多复刻玩家的咨询，究竟N厂会不会攻克这个难关，给一直以来的支持者一个惊喜？现在老店长可以肯定的回答大家，这个问题复刻大厂N厂已经有了更新换代的产品，就是最新版本的黑水鬼 ，有人问会不会这个就是N厂V11版本？说句实话我们也不知道，这毕竟工厂方面没有对方宣布，我们也不好乱下结论，但今次推出的版本确实令人惊叹，耳目一新。给水鬼拥护者一个大大的惊喜！现在我们来追溯一下为什么N厂今次改变这么大？大家还记得我们之前一直推广的AR厂黑水鬼吗？“AR厂ROLEX SUBMARINER劳力士潜航者副本的十年精华， 并行代购版潜航者，完美修正十年间所有副本潜航者的不足和缺陷，使用和正品同级的陶瓷圈供应商，搭配正品代购包装物料，重新定义最高品质的潜航者副本，真正的A级副本劳力士潜航者”这个就是AR厂对外宣传的广告词，究竟是怎样的，我们上期也为大家对比过，可翻阅前文。N厂V11黑水鬼这个版本，目前推出了904精钢和316精钢两种材质的，而且904钢只是偶尔到货，基本上是个噱头，两者出货价相差500元。目前能够买到的也是316精钢材质的。N厂为了区分316钢与904钢，特意在904版表链包装膜上印有904以来区分。众所周知，自从N厂推出了第一代的复刻水鬼以后，N厂每年都不断地尝试改良制造工艺以及选用高品质进口原材料，最终将复刻表的精细程度发挥到极致。这次升级V11版本主要采用了904钢材质，因为具有很好的活化-钝化转变能力，耐腐蚀性能极好，所以被劳力士某某用于精钢款式里，使腕表光泽亮丽，格外耐久。讲解之前，专门某某对于904L精钢的描述。904L精钢属低碳高镍、钼奥氏体不锈耐酸钢。而且具有很好的活化-钝化转变能力，耐腐蚀性能极好，在非氧化性酸如硫酸、醋酸、甲酸、磷酸中具有很好的耐蚀性，在中性含氯离子介质中具有很好的抗点蚀性，同时具有良好的抗缝隙腐蚀及抗应力腐蚀性能。非常适用于70℃以下各种浓度硫酸，在常压下耐任何浓度、任何温度的醋酸及甲酸与醋酸的混酸中的耐腐蚀性也很好。成分上，904L不锈钢在铬、鎳、钼的成分含量上要比316L不锈钢多了1.6倍，同时904L不锈钢多了铜的成分。这样的结果是904L不锈钢更耐磨，更耐腐蚀。总的来说，小范就总结一下，抗腐蚀能力强，而且耐磨！无论是904L还是316L，外观看上去并无太大色差，V11的圈口采用的也是原装日本定制的黑圈口，所以整个外圈颜色基本一致的，但是大家可以看一下，圈口刻度的颜色是不一样的。V7圈口刻度是银色的，而V11升级为白色，这个就是完全符合正品了，这个也是VR厂吹捧的一大亮点，N厂改进是算是及时。总结：今天再次对N厂水鬼在细节上做了简单的分享，同时也对N厂水鬼到底有多真这个热点问题做了阐述，整体腕表也是最大限度还原了正版，也是非常值得入手的一款N厂神器！感谢大家的品鉴！N厂劳力士水鬼高清实拍细节图卡地亚大厂高仿值得买吗？值得。卡地亚高仿手表值得购买,质量和真实的手表没有任何区别,外部特征和内在质量,可以达到正品同样水准，价格比正品更具优势。大厂货还是值得购买的，可以放心的购买啊，不需要担心的。
翻了翻相册发现回国后的一个月内 我竟然已经吃到了这么多当初心心念念的和以为短时间内吃不到的美食，我真是个幸福小女孩～
P1：回家第一天去炫了烧烤！这一口我想了一年半！
P2：回来前和妈妈说想吃排骨豆角焖面
P3: 酱香拿铁 久仰大名啊 有人说很难喝 但我非常爱
P4: 真正豆腐坊的煎饼！
P5、6、7、8:都是看喜欢的博主介绍来的，山姆的椰子水 确实非常纯正！芝士饼干当时看视频的时候就被疯狂种草了，其实我还是吃不惯外层的苏打饼干，不过芝士味确实很香。 好利来的半熟芝士，我其实一直没吃过，但真的好好吃啊 小小一块也不会腻！ 然后是山姆的瑞士卷，这个虽然我期待了很久但真的是份量太大了 根本吃不完
P9: 周日早上热腾腾的烧卖是我起床的动力
P10: 蒙餐店的奶酪饼
P11: 和Aran吃肉蟹煲
P12: 呜呜！以为我回来的太晚吃不到螃蟹了，没想到能赶上最后的尾巴
P13:茅台冰激凌，属于被老牛反向种草的美味
P14、15、16: 一点点的热抹茶 三分糖加椰奶冻 她说好喝到昏古七，哈哈哈哈因为当时一直在看博主的视频，陪伴了我的低迷时光，很多原话我都记得。这一杯确实好喝，这三张图的美食来源于我在北京当特种兵的一天。当时走在北京街头手里捧着热奶茶，然后冲去下一个要买的吃的店，心里想着我真是个幸福的女孩。 然后是黄油面包那家店 我怒买了五种面包，然后从北京背回内蒙，好在确实值得。最后是准备去车站的路上我饥肠辘辘，看到了shake shack，我又彳亍了，据说很好吃的汉堡我倒是要尝尝你有多好吃，说实话这个口感有点干巴….
P17、18:最后一次去包头和Aran吃了烤鱼太好吃了真的。晚上我们又疯狂进食了肉类，这个羊肉肠真的好香好香，不过我不吃血肠但看着也很有食欲，流油肠谁不爱呢
P1：回家第一天去炫了烧烤！这一口我想了一年半！
P2：回来前和妈妈说想吃排骨豆角焖面
P3: 酱香拿铁 久仰大名啊 有人说很难喝 但我非常爱
P4: 真正豆腐坊的煎饼！
P5、6、7、8:都是看喜欢的博主介绍来的，山姆的椰子水 确实非常纯正！芝士饼干当时看视频的时候就被疯狂种草了，其实我还是吃不惯外层的苏打饼干，不过芝士味确实很香。 好利来的半熟芝士，我其实一直没吃过，但真的好好吃啊 小小一块也不会腻！ 然后是山姆的瑞士卷，这个虽然我期待了很久但真的是份量太大了 根本吃不完
P9: 周日早上热腾腾的烧卖是我起床的动力
P10: 蒙餐店的奶酪饼
P11: 和Aran吃肉蟹煲
P12: 呜呜！以为我回来的太晚吃不到螃蟹了，没想到能赶上最后的尾巴
P13:茅台冰激凌，属于被老牛反向种草的美味
P14、15、16: 一点点的热抹茶 三分糖加椰奶冻 她说好喝到昏古七，哈哈哈哈因为当时一直在看博主的视频，陪伴了我的低迷时光，很多原话我都记得。这一杯确实好喝，这三张图的美食来源于我在北京当特种兵的一天。当时走在北京街头手里捧着热奶茶，然后冲去下一个要买的吃的店，心里想着我真是个幸福的女孩。 然后是黄油面包那家店 我怒买了五种面包，然后从北京背回内蒙，好在确实值得。最后是准备去车站的路上我饥肠辘辘，看到了shake shack，我又彳亍了，据说很好吃的汉堡我倒是要尝尝你有多好吃，说实话这个口感有点干巴….
P17、18:最后一次去包头和Aran吃了烤鱼太好吃了真的。晚上我们又疯狂进食了肉类，这个羊肉肠真的好香好香，不过我不吃血肠但看着也很有食欲，流油肠谁不爱呢
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