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完结小说《林语惊 秦厉寒》全文阅完读整版《林语惊 秦厉寒》《林语惊 秦厉寒》全文阅读
林语上惊辈子s后，被绑系统定，胎
穿到小世说界经已二十五了年。
她任的务是攻男略主秦厉寒只，要他
爱上，了她系统可就帮以她实在现世界
复活。
这时候，厉秦寒推开会宴后门走了
进来。
男人英挺俊朗，可满惜脸嘲讽：“你
跟到人喝胃穿孔才拿的到项目，被又我
轻举而易q了，可真怜。”
林语惊怔的怔看着他，他头的顶上，
有行一只有她能看见字的。
【林语惊攻秦略厉寒计倒时：最后3
天】
【全文整完版阅读➕♈: A591744447】
完结小说《林语惊 秦厉寒》全文阅完读整版《林语惊 秦厉寒》《林语惊 秦厉寒》全文阅读
林语上惊辈子s后，被绑系统定，胎
穿到小世说界经已二十五了年。
她任的务是攻男略主秦厉寒只，要他
爱上，了她系统可就帮以她实在现世界
复活。
这时候，厉秦寒推开会宴后门走了
进来。
男人英挺俊朗，可满惜脸嘲讽：“你
跟到人喝胃穿孔才拿的到项目，被又我
轻举而易q了，可真怜。”
林语惊怔的怔看着他，他头的顶上，
有行一只有她能看见字的。
【林语惊攻秦略厉寒计倒时：最后3
天】
【全文整完版阅读➕♈: A591744447】
【荐书|著名的儿童文学作家、翻译家任溶溶作品】
07
《神奇的窗子》
适读年龄：3—6岁
内容简介：
《神奇的窗子》是一本关于祖孙之间深厚情感的图画书。故事中的女孩每次去探望爷爷奶奶时，会先在屋外窗旁做做鬼脸引起爷爷奶奶的注意。跟爷爷奶奶玩耍时，又会在爷爷奶奶家的厨房观看窗外发生的事情。女孩要回家向爷爷奶奶道别时，又会停在屋外窗前依依不舍地道别……小女孩说：“等到有一天我有了自己的房子，我也要有这么一扇‘你好·再见窗’。”这是一扇充满爱的窗子，也是一扇美好心灵的窗子。每个人一生中都有这样的窗子，它让我们看到人生的美好和真情。
08
《没头脑和不高兴》注音版
适读年龄：7岁+
内容简介：
这是一部成为几代读者集体童年记忆的作品，以纯正的中国气质、纯粹的童年精神，成为中国当代幽默风格的儿童文学作品中最成功的典范之一。故事中的“没头脑”和“不高兴”是两个孩子，一个做事总是丢三落四忘东忘西，一个永远是让他往东偏往西，还总是把“不高兴”当口头禅。作家用奇特的想象和夸张的手法，让两个孩子带着自己的缺点一下成了大人，去做“大事”，并为他们安排了一些出奇、惊险的际遇。——到头来，长大后的他们还是“没头脑”和“不高兴”。
09
《任溶溶经典译丛·安徒生童话全集》
适读年龄：7岁+
内容简介：
“世界儿童文学的太阳”安徒生毕生创作的童话全收录；著名儿童文学作家，《没头脑和不高兴》作者，翻译界泰斗任溶溶精心重译；首位入围国际安徒生奖短名单的中国画家熊亮数百幅唯美手绘，彩插＋双色带来别具一格的审美体验 。
10
《杜利特医生故事全集（纪念版）》
适读年龄：7岁+
内容简介：
“杜利特医生故事全集”诞生于上世纪初，至今畅销不衰。再版几十次，翻译成十几个国家的文字，一再被拍成电影的动物传奇故事。1923年获得美国纽伯瑞儿童文学金奖，被亚马逊书店评选为20世纪50本最佳童书。作品描写的主人公社利特医生仁慈、善良和真诚，对动物充满了理解和关爱；他因爱动物而改做了兽医，还学会了鸟言兽语，和动物一起生活、历险，成为全世界的小朋友都想结识的童话世界中动物保护的先行者！
11
《诺福镇的奇幻夏天》
适读年龄：10—15岁
内容简介：
《诺福镇的奇幻夏天》由美国文学作家杰克·甘托斯所创作，著名翻译家任溶溶、任荣康联合翻译。本书荣获了包括2012年纽伯瑞儿童文学奖金奖的多项国际大奖。
小男孩杰克对历史十分热衷，终于盼到放暑假的日子了，但这个暑假并非他期盼的那么好，妈妈要他每天早晨六点起床去帮助手患风湿的邻居沃尔克小姐去打字。沃尔克小姐曾是小镇的总护士长，现在做着小镇的验尸官，叫杰克来帮忙就是听她口述逝者的讣告，然后在打字机上打出来，再送到小镇报纸的编辑手里。随着这一篇又一篇讣告的敲打，杰克发现自己进入了一场惊险、刺激、悬念迭起的奇幻旅程……
12
《神秘的公寓》
适读年龄：10—15岁
内容简介：
《神秘的公寓》是由瑞典作家玛丽亚·格里珀所著，著名翻译家、儿童文学作家任溶溶翻译的一个神奇的故事。本书文笔细腻，悬念迭起，扣人心弦，充满神秘色彩，小读者跟着主人公足可以过一把福尔摩斯的瘾。
诺拉是安德斯家的养女。他们家搬到一幢旧的公寓后，诺拉时常听到房门外有不熟悉的脚步声，与此同时，房里一只再也修不好的钟表忽然又滴答滴答倒着走起来。她身边还陆续出现了许多神秘的事情，神秘的电话，神秘的玩偶……为了解开这一连串的谜，她根据公寓里那些旧物品的线索，终于弄清了几代人千丝万缕的关系和秘密。
13
《任溶溶译文集》
适读年龄：7岁+
内容简介：
《任溶溶译文集》是国内首次推出的我国著名儿童文学翻译家任溶溶老先生译文经典结集，填补了国内该领域的出版空白。该文集所选篇目皆为任溶溶多年的翻译代表作，充分展现了任溶溶别具一格的翻译作品风貌及其内在连续性，是其多年翻译作品之精华汇总，《任溶溶译文集》总字数约九百万字，包含任老1946年发表的第一篇儿童文学译作《粘土做的炸肉片》，以及英、美、俄、意、丹麦、捷克等多国近四十位著名作家创作的八十余部作品，如：丹麦著名童话作家汉斯·克里斯蒂安·安徒生之《安徒生童话全集》、英国著名儿童文学作家伊迪斯·内斯比特之《铁路边的孩子们》《想做好孩子》、肯尼斯·哥林厄姆之《柳林风声》等，有较强的时代性与纪念性，是对任溶溶老先生数十年来经典译作进行细致梳理后的一次集中展现。
14
《E·B·怀特经典三部曲》
适读年龄：6—9岁
内容简介：
任溶溶经典译本，《夏洛的网》作者纽伯瑞大奖得主E•B•怀特代表作。《E·B·怀特经典三部曲》（注音版）套装包括《夏洛的网》《精灵鼠小弟》和《吹小号的天鹅》，被誉为“20世纪读者很多、非常受爱戴的童话”的经典作品，尤为适合处于小学低年级、初步识字阶段的儿童。《夏洛的网》在中国已经创下了千万册的销量，多年来被诸多教育部门推荐阅读。
15
《我们的汉字》
适读年龄：7—10岁
内容简介：
《我们的汉字》是著名儿童文学作家、翻译家任溶溶写给孩子的一本汉字普及读物。作者从文字的起源讲到汉字的演变，一直讲到拉丁字母注音，系统地讲述了汉字发展的历史，让小读者对汉字有一个具体而清晰的认识。
本书采用图文并茂的形式，将汉字知识融进一幅幅充满童趣、创意的图画里，同时选取大量的历史图片，用历史资料说话，鲜活地呈现了“我们的汉字”。
荣获2019年度桂冠童书奖，入围2018中国好书,获2018年度中国童书榜童书奖、100佳童书奖，《中国教育报》年度致敬童书20强，入选《中国出版传媒商报》年度影响力图书。
07
《神奇的窗子》
适读年龄：3—6岁
内容简介：
《神奇的窗子》是一本关于祖孙之间深厚情感的图画书。故事中的女孩每次去探望爷爷奶奶时，会先在屋外窗旁做做鬼脸引起爷爷奶奶的注意。跟爷爷奶奶玩耍时，又会在爷爷奶奶家的厨房观看窗外发生的事情。女孩要回家向爷爷奶奶道别时，又会停在屋外窗前依依不舍地道别……小女孩说：“等到有一天我有了自己的房子，我也要有这么一扇‘你好·再见窗’。”这是一扇充满爱的窗子，也是一扇美好心灵的窗子。每个人一生中都有这样的窗子，它让我们看到人生的美好和真情。
08
《没头脑和不高兴》注音版
适读年龄：7岁+
内容简介：
这是一部成为几代读者集体童年记忆的作品，以纯正的中国气质、纯粹的童年精神，成为中国当代幽默风格的儿童文学作品中最成功的典范之一。故事中的“没头脑”和“不高兴”是两个孩子，一个做事总是丢三落四忘东忘西，一个永远是让他往东偏往西，还总是把“不高兴”当口头禅。作家用奇特的想象和夸张的手法，让两个孩子带着自己的缺点一下成了大人，去做“大事”，并为他们安排了一些出奇、惊险的际遇。——到头来，长大后的他们还是“没头脑”和“不高兴”。
09
《任溶溶经典译丛·安徒生童话全集》
适读年龄：7岁+
内容简介：
“世界儿童文学的太阳”安徒生毕生创作的童话全收录；著名儿童文学作家，《没头脑和不高兴》作者，翻译界泰斗任溶溶精心重译；首位入围国际安徒生奖短名单的中国画家熊亮数百幅唯美手绘，彩插＋双色带来别具一格的审美体验 。
10
《杜利特医生故事全集（纪念版）》
适读年龄：7岁+
内容简介：
“杜利特医生故事全集”诞生于上世纪初，至今畅销不衰。再版几十次，翻译成十几个国家的文字，一再被拍成电影的动物传奇故事。1923年获得美国纽伯瑞儿童文学金奖，被亚马逊书店评选为20世纪50本最佳童书。作品描写的主人公社利特医生仁慈、善良和真诚，对动物充满了理解和关爱；他因爱动物而改做了兽医，还学会了鸟言兽语，和动物一起生活、历险，成为全世界的小朋友都想结识的童话世界中动物保护的先行者！
11
《诺福镇的奇幻夏天》
适读年龄：10—15岁
内容简介：
《诺福镇的奇幻夏天》由美国文学作家杰克·甘托斯所创作，著名翻译家任溶溶、任荣康联合翻译。本书荣获了包括2012年纽伯瑞儿童文学奖金奖的多项国际大奖。
小男孩杰克对历史十分热衷，终于盼到放暑假的日子了，但这个暑假并非他期盼的那么好，妈妈要他每天早晨六点起床去帮助手患风湿的邻居沃尔克小姐去打字。沃尔克小姐曾是小镇的总护士长，现在做着小镇的验尸官，叫杰克来帮忙就是听她口述逝者的讣告，然后在打字机上打出来，再送到小镇报纸的编辑手里。随着这一篇又一篇讣告的敲打，杰克发现自己进入了一场惊险、刺激、悬念迭起的奇幻旅程……
12
《神秘的公寓》
适读年龄：10—15岁
内容简介：
《神秘的公寓》是由瑞典作家玛丽亚·格里珀所著，著名翻译家、儿童文学作家任溶溶翻译的一个神奇的故事。本书文笔细腻，悬念迭起，扣人心弦，充满神秘色彩，小读者跟着主人公足可以过一把福尔摩斯的瘾。
诺拉是安德斯家的养女。他们家搬到一幢旧的公寓后，诺拉时常听到房门外有不熟悉的脚步声，与此同时，房里一只再也修不好的钟表忽然又滴答滴答倒着走起来。她身边还陆续出现了许多神秘的事情，神秘的电话，神秘的玩偶……为了解开这一连串的谜，她根据公寓里那些旧物品的线索，终于弄清了几代人千丝万缕的关系和秘密。
13
《任溶溶译文集》
适读年龄：7岁+
内容简介：
《任溶溶译文集》是国内首次推出的我国著名儿童文学翻译家任溶溶老先生译文经典结集，填补了国内该领域的出版空白。该文集所选篇目皆为任溶溶多年的翻译代表作，充分展现了任溶溶别具一格的翻译作品风貌及其内在连续性，是其多年翻译作品之精华汇总，《任溶溶译文集》总字数约九百万字，包含任老1946年发表的第一篇儿童文学译作《粘土做的炸肉片》，以及英、美、俄、意、丹麦、捷克等多国近四十位著名作家创作的八十余部作品，如：丹麦著名童话作家汉斯·克里斯蒂安·安徒生之《安徒生童话全集》、英国著名儿童文学作家伊迪斯·内斯比特之《铁路边的孩子们》《想做好孩子》、肯尼斯·哥林厄姆之《柳林风声》等，有较强的时代性与纪念性，是对任溶溶老先生数十年来经典译作进行细致梳理后的一次集中展现。
14
《E·B·怀特经典三部曲》
适读年龄：6—9岁
内容简介：
任溶溶经典译本，《夏洛的网》作者纽伯瑞大奖得主E•B•怀特代表作。《E·B·怀特经典三部曲》（注音版）套装包括《夏洛的网》《精灵鼠小弟》和《吹小号的天鹅》，被誉为“20世纪读者很多、非常受爱戴的童话”的经典作品，尤为适合处于小学低年级、初步识字阶段的儿童。《夏洛的网》在中国已经创下了千万册的销量，多年来被诸多教育部门推荐阅读。
15
《我们的汉字》
适读年龄：7—10岁
内容简介：
《我们的汉字》是著名儿童文学作家、翻译家任溶溶写给孩子的一本汉字普及读物。作者从文字的起源讲到汉字的演变，一直讲到拉丁字母注音，系统地讲述了汉字发展的历史，让小读者对汉字有一个具体而清晰的认识。
本书采用图文并茂的形式，将汉字知识融进一幅幅充满童趣、创意的图画里，同时选取大量的历史图片，用历史资料说话，鲜活地呈现了“我们的汉字”。
荣获2019年度桂冠童书奖，入围2018中国好书,获2018年度中国童书榜童书奖、100佳童书奖，《中国教育报》年度致敬童书20强，入选《中国出版传媒商报》年度影响力图书。
【揭开埃博拉病毒“复制机器”的面纱】今年9月，非洲乌干达再次出现新的埃博拉疫情。这意味着埃博拉病毒这把“达摩克利斯之剑”依然悬在头顶，时刻威胁着人们的健康。
科学界一直想研制一款成本低、有利于推广的广谱性抗埃博拉病毒小分子药物，但却缺乏理论指导。埃博拉病毒聚合酶负责病毒基因组复制过程，且具有较高保守性，是研发广谱性药物的重要靶标。但埃博拉病毒聚合酶的分子量大、不稳定、易降解，其三维结构的解析一直是世界性难题。
现在，中国科学院微生物所高福院士团队和施一团队合作，首次解析了埃博拉病毒聚合酶复合物的三维结构，为从分子水平理解埃博拉病毒复制机制奠定了关键理论基础。他们还解析了老药苏拉明能有效抑制埃博拉病毒聚合酶活性的分子机制，为抗埃博拉病毒的药物开发提供了新的靶点和方向。相关研究9月28日发表于《自然》杂志。
现形：结构稳定的“复制机器”
埃博拉病毒病是由埃博拉病毒引起的烈性急性传染病，主要在人或灵长目动物之间传播。自1976年首次在非洲扎伊尔和苏丹被发现后，埃博拉病毒已在非洲肆虐了近50年，暴发过30多次，造成数万人死亡，病死率最高可达90%。
其中，2014-2016年暴发于西非国家的埃博拉疫情，是有史以来最严重的一次，共导致约2.9万人感染，超过1.1万人死亡。2018至2020年暴发于刚果民主共和国的埃博拉疫情也导致3481人感染，2299人死亡。2021年在西非国家几内亚再次发现埃博拉病毒活跃迹象，提示病毒可能存在潜伏感染。
这些数据说明，对埃博拉病毒仍需加强科学研究。
目前，已有两款上市的扎伊尔型埃博拉病毒抗体药物，其作用靶点是埃博拉病毒表面刺突糖蛋白（GP）。
“已上市的抗体药物具有特异性，不能用于治疗其他类型埃博拉病毒以及马尔堡病毒等丝状病毒。此外，病毒表面的GP蛋白在宿主免疫压力下也容易发生免疫逃逸，有可能造成抗体药物效果变差甚至无效。”论文通讯作者施一对《中国科学报》说。
此外，他表示，由于抗体药物制造成本比较高，需要低温储存，不利于在非洲地区普及推广使用。开发有效安全的广谱性抗病毒小分子药物是应对不同类型埃博拉病毒和其他丝状病毒感染的重要研究方向。
科学家已经发现，埃博拉病毒基因组的转录与复制过程由病毒聚合酶蛋白L和其他辅助蛋白形成的复合物来共同完成。由于聚合酶复合物在不同的丝状病毒中具有高度保守性，是非常理想的广谱性抗病毒药物开发靶点。
此前的研究还发现瑞德西韦和法比拉韦，这两个针对埃博拉病毒聚合酶的核苷类小分子药物具有良好的体外抗病毒活性。然而，其临床效果却并不理想。目前，临床上尚未有批准可用于治疗埃博拉病毒感染的小分子药物。
那么，现有的靶向聚合酶药物如何进行结构优化？能否针对聚合酶保守位点开发新的药物来治疗埃博拉病毒病？
回答这些问题，迫切要求研究人员弄清楚埃博拉病毒的复制机制。
埃博拉病毒属于丝状病毒科，基因组为不分节段的负链RNA，长约19 kb，包含7个开放阅读框。过去近10年，科学家对这种病毒的复杂结构已经有了一些了解，比如它的RNA基因组被核蛋白（NP）包裹，形成核糖核蛋白复合体（RNP），进一步与聚合酶蛋白（L）、病毒辅助蛋白（VP35）、转录激活蛋白（VP30）和核衣壳相关蛋白（VP24）结合，形成螺旋状核衣壳结构，并被基质蛋白（VP40）环绕，进一步与病毒表面GP蛋白形成完整病毒颗粒。
解析埃博拉病毒聚合酶的三维结构却是全球病毒学家面临的一个挑战。经过多年的尝试摸索，施一与高福合作研究团队成功表达纯化获得了埃博拉病毒聚合酶复合物蛋白（L-VP35复合物），并利用冷冻电镜技术解析其高分辨率三维结构。他们发现，埃博拉病毒的聚合酶L蛋白会与VP35蛋白四聚体形成稳定的复合物，进行病毒基因组复制和转录。
那么，L-VP35聚合酶复合物如何介导这一功能呢？研究团队在原子层面对这个问题进行了深入探索。
入微：揭开“共舞”机制
通过深入观察，研究团队对聚合酶复合物的动态构象变化有了微观水平的了解。
作为病毒“复制机器”的核心，聚合酶在生成子代RNA的过程中涉及到多种构象变化，从而促进产物顺利合成，其中最重要的构象变化是从起始态到延伸态的转变。
此前的研究表明，聚合酶从起始状态进入到延伸状态时，酶活中心的两个关键结构元件——启动环（priming loop）和支撑螺旋（supporting helix）必须发生巨大的构象调整，才能保证产物链有足够的空间进行延伸。否则，就会与产物链发生空间位阻。
研究者通过改变冷冻电镜的制样条件，捕捉到了埃博拉病毒聚合酶处于延伸状态时的精细结构。他们发现，在处于延伸构象时，启动环完全缩回到加帽结构域，而支撑螺旋也会远离聚合酶的活性中心，从而为模板/产物双链RNA提供足够的空间进行延伸。
那么，病毒VP35蛋白如何与L聚合酶“共舞”呢？
研究发现，在病毒复制过程中，VP35会像“桥梁”一样，起到连接L蛋白和病毒RNP的功能。“当L聚合酶进行病毒基因组复制时，是以螺旋形的RNP为模板，而不是以裸露的RNA为模板，这时VP35主要行使的是分子伴侣功能，介导L聚合酶以RNP为单元进行复制。”施一说。
他向《中国科学报》解释，VP35四聚体除了中间的寡聚化结构域，两头分别有四个N端（氨基端）结构域和四个C端（羧基端）结构域，其中一个C端结合到L蛋白上，进一步稳定L聚合酶与VP35四聚体的结合，同时另外七个端会像“八爪鱼的触角”一样，帮助L聚合酶在RNP结构上发生滑动，以及结合单体状态下的病毒RNP蛋白，阻止其与宿主RNA发生非特异性相互作用，保证单体NP蛋白能够用于子代RNP的生成。
“如果没有VP35，L聚合酶蛋白就没法进行基因组复制和转录过程。”施一表示，如果能够阻断L蛋白和VP35的结合，病毒将无法复制。
洞见：指导药物设计与优化
开发能有效抑制埃博拉病毒的小分子药物一直是国际热点，也是难点。
施一表示，了解L-VP35复合物相互作用界面的分子细节，为进一步开发靶向聚合酶的药物提供了新的靶点以及重要指导信息。
据介绍，埃博拉病毒聚合酶活性结构域和加帽结构域与呼吸道合胞病毒（RSV）和狂犬病毒（RABV）等其他（基因组）不分节段的负链RNA病毒聚合酶结构相似，说明这类病毒聚合酶在进化过程中具有保守性。
值得注意的是，研究者指出，埃博拉病毒聚合酶的N端结构域区域具有一个丝状病毒特有的插入结构域，并在埃博拉病毒聚合酶发挥活性时是必不可少的，可成为潜在的抗病毒药物研发靶点。
此次研究中，研究团队还对百年老药苏拉明体外抗埃博拉病毒活性的分子机制进行了探索。
苏拉明是20世纪初由德国化学家保罗·埃利希首次分离出来的一种无嗅、无味的白色粉末，可溶于生理盐水中，后来被发现可用于治疗多种寄生虫病，从20世纪20年代初被广泛用于治疗非洲昏睡病和盘尾丝虫病等寄生虫病。近年来，科学家发现苏拉明具有抗新冠以及癌症活性。前期初步研究提示苏拉明也具有抗埃博拉病毒活性，但其作用机制不甚清楚。
研究人员通过体外酶活和细胞复制子实验，发现苏拉明能有效地抑制埃博拉病毒聚合酶活性，并进一步利用冷冻电镜技术解析了埃博拉病毒聚合酶与苏拉明的复合物结构，揭示苏拉明是通过结合在聚合酶的NTP进入通道，阻碍底物进入酶活中心而发挥抑制作用。苏拉明药物与L蛋白相互作用的分子细节，为进一步改造和优化苏拉明药物提供了关键参考信息。
“苏拉明是一种潜在的抗病毒药物，这项研究的一个亮点是解析L蛋白与苏拉明的复合物，这可以指导进一步的抗病毒药物设计。”该论文一位审稿人说。另一位同行评审人则表示，埃博拉病毒L蛋白结构信息的缺乏一直是该领域公认的空白，这项研究提供了重要的信息，有助于促进基于结构的抗病毒药物设计。https://t.cn/A6o7Cgr9
科学界一直想研制一款成本低、有利于推广的广谱性抗埃博拉病毒小分子药物，但却缺乏理论指导。埃博拉病毒聚合酶负责病毒基因组复制过程，且具有较高保守性，是研发广谱性药物的重要靶标。但埃博拉病毒聚合酶的分子量大、不稳定、易降解，其三维结构的解析一直是世界性难题。
现在，中国科学院微生物所高福院士团队和施一团队合作，首次解析了埃博拉病毒聚合酶复合物的三维结构，为从分子水平理解埃博拉病毒复制机制奠定了关键理论基础。他们还解析了老药苏拉明能有效抑制埃博拉病毒聚合酶活性的分子机制，为抗埃博拉病毒的药物开发提供了新的靶点和方向。相关研究9月28日发表于《自然》杂志。
现形：结构稳定的“复制机器”
埃博拉病毒病是由埃博拉病毒引起的烈性急性传染病，主要在人或灵长目动物之间传播。自1976年首次在非洲扎伊尔和苏丹被发现后，埃博拉病毒已在非洲肆虐了近50年，暴发过30多次，造成数万人死亡，病死率最高可达90%。
其中，2014-2016年暴发于西非国家的埃博拉疫情，是有史以来最严重的一次，共导致约2.9万人感染，超过1.1万人死亡。2018至2020年暴发于刚果民主共和国的埃博拉疫情也导致3481人感染，2299人死亡。2021年在西非国家几内亚再次发现埃博拉病毒活跃迹象，提示病毒可能存在潜伏感染。
这些数据说明，对埃博拉病毒仍需加强科学研究。
目前，已有两款上市的扎伊尔型埃博拉病毒抗体药物，其作用靶点是埃博拉病毒表面刺突糖蛋白（GP）。
“已上市的抗体药物具有特异性，不能用于治疗其他类型埃博拉病毒以及马尔堡病毒等丝状病毒。此外，病毒表面的GP蛋白在宿主免疫压力下也容易发生免疫逃逸，有可能造成抗体药物效果变差甚至无效。”论文通讯作者施一对《中国科学报》说。
此外，他表示，由于抗体药物制造成本比较高，需要低温储存，不利于在非洲地区普及推广使用。开发有效安全的广谱性抗病毒小分子药物是应对不同类型埃博拉病毒和其他丝状病毒感染的重要研究方向。
科学家已经发现，埃博拉病毒基因组的转录与复制过程由病毒聚合酶蛋白L和其他辅助蛋白形成的复合物来共同完成。由于聚合酶复合物在不同的丝状病毒中具有高度保守性，是非常理想的广谱性抗病毒药物开发靶点。
此前的研究还发现瑞德西韦和法比拉韦，这两个针对埃博拉病毒聚合酶的核苷类小分子药物具有良好的体外抗病毒活性。然而，其临床效果却并不理想。目前，临床上尚未有批准可用于治疗埃博拉病毒感染的小分子药物。
那么，现有的靶向聚合酶药物如何进行结构优化？能否针对聚合酶保守位点开发新的药物来治疗埃博拉病毒病？
回答这些问题，迫切要求研究人员弄清楚埃博拉病毒的复制机制。
埃博拉病毒属于丝状病毒科，基因组为不分节段的负链RNA，长约19 kb，包含7个开放阅读框。过去近10年，科学家对这种病毒的复杂结构已经有了一些了解，比如它的RNA基因组被核蛋白（NP）包裹，形成核糖核蛋白复合体（RNP），进一步与聚合酶蛋白（L）、病毒辅助蛋白（VP35）、转录激活蛋白（VP30）和核衣壳相关蛋白（VP24）结合，形成螺旋状核衣壳结构，并被基质蛋白（VP40）环绕，进一步与病毒表面GP蛋白形成完整病毒颗粒。
解析埃博拉病毒聚合酶的三维结构却是全球病毒学家面临的一个挑战。经过多年的尝试摸索，施一与高福合作研究团队成功表达纯化获得了埃博拉病毒聚合酶复合物蛋白（L-VP35复合物），并利用冷冻电镜技术解析其高分辨率三维结构。他们发现，埃博拉病毒的聚合酶L蛋白会与VP35蛋白四聚体形成稳定的复合物，进行病毒基因组复制和转录。
那么，L-VP35聚合酶复合物如何介导这一功能呢？研究团队在原子层面对这个问题进行了深入探索。
入微：揭开“共舞”机制
通过深入观察，研究团队对聚合酶复合物的动态构象变化有了微观水平的了解。
作为病毒“复制机器”的核心，聚合酶在生成子代RNA的过程中涉及到多种构象变化，从而促进产物顺利合成，其中最重要的构象变化是从起始态到延伸态的转变。
此前的研究表明，聚合酶从起始状态进入到延伸状态时，酶活中心的两个关键结构元件——启动环（priming loop）和支撑螺旋（supporting helix）必须发生巨大的构象调整，才能保证产物链有足够的空间进行延伸。否则，就会与产物链发生空间位阻。
研究者通过改变冷冻电镜的制样条件，捕捉到了埃博拉病毒聚合酶处于延伸状态时的精细结构。他们发现，在处于延伸构象时，启动环完全缩回到加帽结构域，而支撑螺旋也会远离聚合酶的活性中心，从而为模板/产物双链RNA提供足够的空间进行延伸。
那么，病毒VP35蛋白如何与L聚合酶“共舞”呢？
研究发现，在病毒复制过程中，VP35会像“桥梁”一样，起到连接L蛋白和病毒RNP的功能。“当L聚合酶进行病毒基因组复制时，是以螺旋形的RNP为模板，而不是以裸露的RNA为模板，这时VP35主要行使的是分子伴侣功能，介导L聚合酶以RNP为单元进行复制。”施一说。
他向《中国科学报》解释，VP35四聚体除了中间的寡聚化结构域，两头分别有四个N端（氨基端）结构域和四个C端（羧基端）结构域，其中一个C端结合到L蛋白上，进一步稳定L聚合酶与VP35四聚体的结合，同时另外七个端会像“八爪鱼的触角”一样，帮助L聚合酶在RNP结构上发生滑动，以及结合单体状态下的病毒RNP蛋白，阻止其与宿主RNA发生非特异性相互作用，保证单体NP蛋白能够用于子代RNP的生成。
“如果没有VP35，L聚合酶蛋白就没法进行基因组复制和转录过程。”施一表示，如果能够阻断L蛋白和VP35的结合，病毒将无法复制。
洞见：指导药物设计与优化
开发能有效抑制埃博拉病毒的小分子药物一直是国际热点，也是难点。
施一表示，了解L-VP35复合物相互作用界面的分子细节，为进一步开发靶向聚合酶的药物提供了新的靶点以及重要指导信息。
据介绍，埃博拉病毒聚合酶活性结构域和加帽结构域与呼吸道合胞病毒（RSV）和狂犬病毒（RABV）等其他（基因组）不分节段的负链RNA病毒聚合酶结构相似，说明这类病毒聚合酶在进化过程中具有保守性。
值得注意的是，研究者指出，埃博拉病毒聚合酶的N端结构域区域具有一个丝状病毒特有的插入结构域，并在埃博拉病毒聚合酶发挥活性时是必不可少的，可成为潜在的抗病毒药物研发靶点。
此次研究中，研究团队还对百年老药苏拉明体外抗埃博拉病毒活性的分子机制进行了探索。
苏拉明是20世纪初由德国化学家保罗·埃利希首次分离出来的一种无嗅、无味的白色粉末，可溶于生理盐水中，后来被发现可用于治疗多种寄生虫病，从20世纪20年代初被广泛用于治疗非洲昏睡病和盘尾丝虫病等寄生虫病。近年来，科学家发现苏拉明具有抗新冠以及癌症活性。前期初步研究提示苏拉明也具有抗埃博拉病毒活性，但其作用机制不甚清楚。
研究人员通过体外酶活和细胞复制子实验，发现苏拉明能有效地抑制埃博拉病毒聚合酶活性，并进一步利用冷冻电镜技术解析了埃博拉病毒聚合酶与苏拉明的复合物结构，揭示苏拉明是通过结合在聚合酶的NTP进入通道，阻碍底物进入酶活中心而发挥抑制作用。苏拉明药物与L蛋白相互作用的分子细节，为进一步改造和优化苏拉明药物提供了关键参考信息。
“苏拉明是一种潜在的抗病毒药物，这项研究的一个亮点是解析L蛋白与苏拉明的复合物，这可以指导进一步的抗病毒药物设计。”该论文一位审稿人说。另一位同行评审人则表示，埃博拉病毒L蛋白结构信息的缺乏一直是该领域公认的空白，这项研究提供了重要的信息，有助于促进基于结构的抗病毒药物设计。https://t.cn/A6o7Cgr9
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