【LPA对绵羊体外受精及胚胎干细胞建系的作用】
溶血磷脂酸 (Lysophosphatidic acid, LPA) 是一种小分子甘油磷脂,在多种动物细胞中具有生长因子和激素样活性。LPA通过结合G蛋白偶联受体,激活下游信号通路,产生促卵母细胞成熟,提高胚胎发育率,促进细胞增殖等生物学效应。绵羊是我国重要的家畜之一,其体外受精效率较其他物种偏低,且目前仍未建立真正的绵羊胚胎干细胞。
本研究通过在绵羊体外受精过程及囊胚接种细胞培养过程中添加LPA,以探究LPA对绵羊体外受精以及囊胚接种细胞培养的影响。首先,我们对绵羊的体外受精体系进行了筛选,选取了两种成熟液与两种SOF液进行组合,通过比较不同体系间的成熟率、卵裂率和囊胚率,最终找到最优的体外受精的体系,即IVM Ⅱ and SOF Ⅱ。然后,在绵羊体外受精过程中添加不同浓度的LPA,探讨LPA浓度对绵羊体外受精的影响。
结果显示,当LPA浓度为0.1 μmol L-1 - 10 μmol L-1之间时,随着LPA浓度的增加,绵羊卵母细胞体外成熟率、囊胚率逐渐上升(P < 0.05),卵裂率无显著变化(P>0.05),囊胚形态正常;当LPA浓度达到15 μmol L-1时,成熟率、卵裂率、囊胚率均出现显著下降 (P < 0.05),且囊胚形态发生异常,胚胎内细胞团聚集不正常,囊胚内部出现分区,不能发育成为优质的囊胚。另外,随着LPA浓度在0.1 μmol L-1- 10 μmol L-1范围内逐渐增大,LPAR2、LPAR4、TE相关基因CDX-2和多能性相关基因OCT-4在绵羊早期体外受精胚胎中的mRNA表达量也逐步增加。而15 μmol L-1 LPA处理组中,早期胚胎LPAR2、LPAR4、CDX-2和OCT-4的表达量均显著低于LPA - 10 μmol L-1处理组(P<0.05)。最后,我们将绵羊体外受精囊胚接种在不同培养体系,尝试建立胚胎干细胞。
结果表明,LPA使接种后的囊胚细胞向TSC样细胞生长。随着LPA浓度从0 μmol L-1增加到10 μmol L-1, OCT-4和CDX-2的蛋白免疫荧光强度和mRNA丰度增强(P<0.05),而15 μmol L-1 LPA则显著降低OCT-4和CDX-2在囊胚接种细胞中的表达(P<0.05)。同时,10 μmol L-1的LPA处理后,LPAR2和LPAR4蛋白表达显著增加。
综合上述实验结果,LPA可促进绵羊体外受精早期胚胎发育,并促进囊胚接种细胞向TSC方向生长,为大动物体外受精及胚胎干细胞建系提供参考。
文章链接:https://t.cn/A6XzuX6e
引用本文 >>>ZHANG Xue-min, HUANG Xiang-hua, WANG Jing, XING Ying, LIU Fang, XIANG Jin-zhu, WANG Han-ning, YUE Yong-li, LI Xue-ling. 2022. Effects of LPA on the development of sheep in vitro fertilized embryos and attempt to establish sheep embryonic stem cells. Journal of Integrative Agriculture, in press.
#动物科学##绵羊#园艺#
溶血磷脂酸 (Lysophosphatidic acid, LPA) 是一种小分子甘油磷脂,在多种动物细胞中具有生长因子和激素样活性。LPA通过结合G蛋白偶联受体,激活下游信号通路,产生促卵母细胞成熟,提高胚胎发育率,促进细胞增殖等生物学效应。绵羊是我国重要的家畜之一,其体外受精效率较其他物种偏低,且目前仍未建立真正的绵羊胚胎干细胞。
本研究通过在绵羊体外受精过程及囊胚接种细胞培养过程中添加LPA,以探究LPA对绵羊体外受精以及囊胚接种细胞培养的影响。首先,我们对绵羊的体外受精体系进行了筛选,选取了两种成熟液与两种SOF液进行组合,通过比较不同体系间的成熟率、卵裂率和囊胚率,最终找到最优的体外受精的体系,即IVM Ⅱ and SOF Ⅱ。然后,在绵羊体外受精过程中添加不同浓度的LPA,探讨LPA浓度对绵羊体外受精的影响。
结果显示,当LPA浓度为0.1 μmol L-1 - 10 μmol L-1之间时,随着LPA浓度的增加,绵羊卵母细胞体外成熟率、囊胚率逐渐上升(P < 0.05),卵裂率无显著变化(P>0.05),囊胚形态正常;当LPA浓度达到15 μmol L-1时,成熟率、卵裂率、囊胚率均出现显著下降 (P < 0.05),且囊胚形态发生异常,胚胎内细胞团聚集不正常,囊胚内部出现分区,不能发育成为优质的囊胚。另外,随着LPA浓度在0.1 μmol L-1- 10 μmol L-1范围内逐渐增大,LPAR2、LPAR4、TE相关基因CDX-2和多能性相关基因OCT-4在绵羊早期体外受精胚胎中的mRNA表达量也逐步增加。而15 μmol L-1 LPA处理组中,早期胚胎LPAR2、LPAR4、CDX-2和OCT-4的表达量均显著低于LPA - 10 μmol L-1处理组(P<0.05)。最后,我们将绵羊体外受精囊胚接种在不同培养体系,尝试建立胚胎干细胞。
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引用本文 >>>ZHANG Xue-min, HUANG Xiang-hua, WANG Jing, XING Ying, LIU Fang, XIANG Jin-zhu, WANG Han-ning, YUE Yong-li, LI Xue-ling. 2022. Effects of LPA on the development of sheep in vitro fertilized embryos and attempt to establish sheep embryonic stem cells. Journal of Integrative Agriculture, in press.
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比枭夺食还让人害怕的一个配置叫做“刃重现”。
意思就是阳刃即日主的帝旺位,出现一个以上,刃有多凶?一般人就算八字没有,遇到个刃年,也是易轻则破财,重有刀xue之灾,这个重,不是非要在配置里多次出现才算,当配置没有,大运流年出现的时候就符合,如果配置有一个,见到刃再出来的大运也符合,如果配置就有两个及以上,好家伙,见到逢刑冲的年份,或者再出现刃的年份都需要留心。
刃怕刑冲,一般刃多现的人都极其容易有外伤,也有方法去化解,比如都送不兑里,或者深山老林里,送进去,关起来[doge]
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这个医生其实问的也是特别多的
投稿吐槽珈禾费安军助理的时间观念[怒],我9:40,等到10:18也没有面上,9点的妹子等了一个小时,也没面上!ps[思考]:如果按照同样的手法复制,一批军嫂+几个月周期的妹砸练手,阶段性展示神仙案例+功课+群助推,会不会再出来一个费费或者军军,珈禾估计要xue赚[笑cry]
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