广州医科大学ibidi流体剪切力系统装机调试完成

ibidi流体剪切力系统
广州科适特科学仪器有限公司为广州医科大学安装调试德国ibidi流体剪切力系统(四联体),该系统可实现单向层流,脉冲流或振荡流,设备顺利安装调试后,现场为客户讲解培训产品知识,获得老师们的一致好评!
ibidi流体剪切力系统能够:

模拟生理状态中多种流动方式:单向层流,脉冲流,振荡流;

采用气压泵,悬浮细胞机械力非常小;

配套软件精确控制流速,压力和剪应力;

多种规格流动小室可选,满足多种需求;

小室底部为高分辨率材质塑料,提供出色的显微镜成像效果。

流体剪切力细胞实验背景:

液体是每个生物物种的重要组成部分。在生理状态下,许多细胞类型被流体环境包围。典型例子包括:血管内皮细胞,形成血管内层,淋巴管内皮细胞,形成淋巴管内层,肾和肺的上皮细胞。这种液体流动引起剪切应力,这是一种机械力,以多种方式影响细胞形态和行为。

在许多标准体外实验中,细胞在没有流动的情况下培养。在这些静态条件下,通常没有考虑剪切应力依赖性细胞变化。实际上,在流动下的体外细胞培养并模拟这种机械刺激并诱导更加接近生理状态的体内生物过程行为很有意义。特别对于研究在生物流体中存在的细胞时,模拟流动状态显得尤其重要,如内皮细胞或上皮细胞。
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ibidi 流体剪切力系统组件:

ibidi 流体剪切力系统包括三个主要的部分:产生空气压力的 ibidi 泵,电脑控制软件,和便携式的流体单元(两个培养液储液池、μ-Slide 固定装置和流动管道)。ibidi 流体剪切力系统通过泵控制流速、剪切力大小等参数,并通过流体单元两个阀门的开、关状态实现细胞培养液在两个储液池中自循环,进而只需要极少量的细胞培养液就可以进行长时程的细胞培养,少量的培养液也便于分析细胞产生的可溶性因子的变化。
通过单个流体单元即可以实现细胞培养液的单方向流动,四流体单元配合则可以实现细胞培养液的脉冲式流动或者振荡式流动。便携式的流体单元可以方便的与 pump 进行连接以及去连接,使得在超净台中对流体单元进行操作变得简单,例如向储液池中加入培养液以及连接培养细胞的载玻片等。准备就绪后,流体单元放入细胞培养箱,与 pump 进行气路以及电路的连接,便可以进行流体剪切力状态下的细胞培养了。流体单元也可以放在显微镜附近,方便进行活细胞观察成像。
广州科适特科学仪器有限公司是德国ibidi公司在中国区合作伙伴

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四川华西医院ibidi流体剪切力系统装机调试完成

广州科适特科学仪器有限公司为四川华西医院安装调试德国ibidi流体剪切力系统(四联体),该系统可实现单向层流,脉冲流或振荡流,设备顺利安装调试后,现场为客户讲解培训产品知识,获得老师们的一致好评!
ibidi流体剪切力系统能够:

模拟生理状态中多种流动方式:单向层流,脉冲流,振荡流;
采用气压泵,悬浮细胞机械力非常小;
配套软件精确控制流速,压力和剪应力;
多种规格流动小室可选,满足多种需求;
小室底部为高分辨率材质塑料,提供出色的显微镜成像效果。

流体剪切力细胞实验背景:
液体是每个生物物种的重要组成部分。在生理状态下,许多细胞类型被流体环境包围。典型例子包括:血管内皮细胞,形成血管内层,淋巴管内皮细胞,形成淋巴管内层,肾和肺的上皮细胞。这种液体流动引起剪切应力,这是一种机械力,以多种方式影响细胞形态和行为。

在许多标准体外实验中,细胞在没有流动的情况下培养。在这些静态条件下,通常没有考虑剪切应力依赖性细胞变化。实际上,在流动下的体外细胞培养并模拟这种机械刺激并诱导更加接近生理状态的体内生物过程行为很有意义。特别对于研究在生物流体中存在的细胞时,模拟流动状态显得尤其重要,如内皮细胞或上皮细胞。

ibidi 流体剪切力系统组件:(如图)
ibidi泵:
电脑控制气压泵
每个ibidi 泵最多可操作四个平行流体单元

系统控制软件:
轻松设置用于流动测定的自动流动控制
流速,剪切速率和剪切应力的自动内部计算

四联体单元:
将四个流体单元组合成一个系统
由单个 ibidi 泵操作
ibidi 流体剪切力系统包括三个主要的部分:产生空气压力的 ibidi 泵,电脑控制软件,和便携式的流体单元(两个培养液储液池、μ-Slide 固定装置和流动管道)。ibidi 流体剪切力系统通过泵控制流速、剪切力大小等参数,并通过流体单元两个阀门的开、关状态实现细胞培养液在两个储液池中自循环,进而只需要极少量的细胞培养液就可以进行长时程的细胞培养,少量的培养液也便于分析细胞产生的可溶性因子的变化。

通过单个流体单元即可以实现细胞培养液的单方向流动,四流体单元配合则可以实现细胞培养液的脉冲式流动或者振荡式流动。便携式的流体单元可以方便的与 pump 进行连接以及去连接,使得在超净台中对流体单元进行操作变得简单,例如向储液池中加入培养液以及连接培养细胞的载玻片等。准备就绪后,流体单元放入细胞培养箱,与 pump 进行气路以及电路的连接,便可以进行流体剪切力状态下的细胞培养了。流体单元也可以放在显微镜附近,方便进行活细胞观察成像。

显微延时序列实验中的图像偏移校正

1. 介绍
在延时实验期间确保活细胞成像装置的机械稳定性非常重要。电动载物台的位置恢复中的振动效应或容差会导致图像序列的(轻微)偏移。每个外部运动都可以覆盖观察到的细胞运动。当使用更高的放大倍数或使用缓慢迁移的细胞时,这尤其重要,因为每个细胞覆盖的距离相对较小。本应用说明介绍了一种计算外部引起的像素偏移的方法,然后将其从细胞轨迹坐标中减去。结果数据总结了实际的细胞迁移参数。
2. 应用实例
图 1 作为一个示例显示了需要校正图像序列中的像素偏移。在进行实验时,载物台顶部孵化器的位移产生了约 90 pixel的永久像素偏移。绘制细胞轨迹(图 2)和分析迁移参数(表 1)给出了定向细胞迁移的错误印象。然而,在数据分析中包括像素偏移明显存在的定向细胞迁移仅由像素偏移产生。
给定的方法不仅适用于补偿一个大的像素偏移,还可以用于整个测量过程中可能发生的小偏移
表 1 未校正数据与校正数据偏移参数对比,获得的未校正轨迹值表明定向细胞迁移,即使这仅归于现有的像素偏移。
3.定律

在图像序列期间校正像素偏移需要几个工作步骤:

1. 跟踪每个时间间隔测量的 30 到 40 个细胞。例如,我们推荐 ImageJ 插件手动跟踪。该插件能够量化时间堆栈帧之间对象的移动。

2. 每个趋化室都需要一个参考轨道。必须在整个图像序列进行跟踪刚型点,例如通道边界的定义位置。当使用胶原纤维作为刚性点时,请确保不会因细胞运动产生的张力而发生纤维运动。参考轨迹的第一幅图像用作比较值(Xref,1 和 Yref1)。必须计算所有后续图像(Xshift,i 和Yshift,i)和比较值之间的像素偏移(Xref,i 和 Yref,i)。
3. 更正你的细胞轨迹。获得的每幅图像的轨迹坐标(Xi和 Yi)必须通过计算出的像素位移进行校正。这是通过从原始数据细胞轨迹坐标中减去像素位移来执行的。因此,需要复制细胞格轨迹数据并将参考轨迹数据粘贴到同一个 Excel 文件中(图 3)。
4. 将更正后的值复制到新的 Excel 文件中。此文件应另存为 excel(.xls 或 .xlsx)和文本文档 (.txt)。exel 文件允许进行后续更改,而文本文件可以导入趋化和迁移工具(ibidi 提供的免费软件),用于绘制数据和分析趋化效应。
图 3 ,图像序列中小像素偏移校正的示例计算。计算每个参考图片的像素偏移并从原始数据中减去以获得校正后的轨迹坐标。

5. 检查获得的值正确性。使用趋化和迁移工具打开原始以及更正后的跟踪文件,以检查您是否仅更正了数据,而没有错误地创建人工细胞运动(图 4)。图 4 中显示的人工细胞运动归因于跟踪细胞时对像素偏移的延迟反应。与参考轨迹相比,这种延迟反应无法通过这种方法进行补偿。
图 4 ,测试数据更正很重要。左图显示未经校正的原始数据,中间图显示像素位移校正数据,右图显示人工创建的细胞运动。

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