#今日突发# 【工党悉尼总部遭廉政公署突查 双方均保持沉默】今天上午,新州工党悉尼总部遭到廉政公署(Independent Commission Against Corruption,ICAC)突击搜查。目前双方尚未发表评论。一位工党消息人士称,ICAC在他们办公室访问了计算机。一名ALP官员表示,由于法律原因,他们无法发表评论。https://t.cn/EUFtiYb

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通用型ALP传感器用于构建荧光免疫传感平台检测癌症标志物 https://t.cn/R3xifQh

肿瘤标志物是反映肿瘤发生、发展的化学物质,其分析检测可以辅助肿瘤的早期发现与诊断,使患者获得及时有效的治疗。基于生物体系成分复杂、疾病初期标志物浓度很低等原因,癌症标志物的特异、灵敏检测面临着巨大的挑战。

酶联免疫吸附测定(ELISA)将抗原抗体特异性识别与生物酶催化显色反应相结合,在癌症标志物的检测方面表现出巨大的潜力。传统的比色ELISA灵敏度较低,而荧光免疫分析在保留传统免疫分析法高特异性优势的同时,又能弥补其灵敏度低的缺陷,为检测肿瘤标志物提供有效的手段。目前,基于碱性磷酸酶(ALP)的荧光免疫分析法仍主要聚焦于新型荧光底物的设计或利用荧光纳米材料进行信号转化,其合成、修饰和信号产生步骤复杂费时。

济南大学材料科学与工程学院的逯一中教授研究组分别利用商业化的pNPP和钙黄绿素(calcein)为ALP底物和荧光指示剂,设计了一种简单灵敏的通用型ALP传感方法,并将其用于荧光免疫分析传感平台的构建,实现了对肝癌标志物-甲胎蛋白(AFP)的检测。其工作原理如图1所示,Ce3 与calcein结合可以淬灭荧光,在ALP存在的条件下,pNPP水解生成对硝基苯酚和磷酸根,磷酸根与Ce3 的结合能力远强于calcein,能够从calcein-Ce3 中夺取Ce3 并释放calcein,体系荧光得以恢复。体系荧光信号的恢复程度与ALP(即酶标二抗)含量相关,进而实现了ELISA传感平台的构建和相关抗原的检测。该实验以肝癌的标志物AFP为例,验证了荧光ELISA的可行性。

图1. 基于磷酸根对calcein−Ce3 的荧光恢复构建荧光ELISA传感平台

该方法为利用ALP催化的脱磷酸反应设计荧光ELISA提供了新的思路。由于磷酸根是ALP底物脱磷酸反应的共同产物,该传感体系具有普适性,已证实通用于pNPP、AMP、ADP、ATP、GMP、GDP、GTP、UMP、UDP、UTP、dTMP、PPi等酶底物-ALP体系。此外,除抗原抗体外,该方法不需要特殊及昂贵的试剂,信号产生方式简单直接。得益于酶反应和抗原-抗体识别的特异性及荧光测定法的高灵敏性,该荧光ELISA成功应用于血清中AFP的测定,预示着其在临床诊断方面具有良好的应用潜力。

相关研究成果近期发表在Analytical Chemistry 上,文章的第一作者为济南大学材料科学与工程学院的讲师陈传霞,济南大学的逯一中教授与中国科学院长春应用化学研究所的孙健研究员为共同通讯作者。该研究工作得到国家自然科学基金委的支持。


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