#慕梓的电子日记簿[超话]#
D44 12. 12周日
给p3小鼠洗笼子，换垫料
给所有小鼠加水
提取DNA第二天。提取基因型说明书见p1p2.
主要是离心机的使用......
PCR
把程序p4设置好后就可以去制胶准备跑琼脂糖凝胶电泳了
20μL的反应体系，配方见p3
琼脂糖凝胶电泳
①制胶
1.5%的琼脂糖-1×TAE溶液，
微波炉高热-2min，加热1min后拿出来摇一下，然后每20s（沸腾起来）摇一下
加核酸染料，100mL的溶液加10μL核酸染料。⚠️枪头伸进液面以下加，节省资源[单身狗]
摇匀，直到核酸染料完全染匀
插梳子
从梳子的另一侧把溶液缓缓倒进去，如果有气泡，赶走它
等它凝固，30min以上，等PCR跑完就可以了
②电泳
电泳槽里加1×TAE，把胶放进去，胶板背面那些脏东西丢掉，电泳液要没过胶的表面。⚠️注意胶的方向，DNA都是从负极往正极跑，所以有孔的那一面放在近负极端。
加样 先加marker！可以有效检查胶有没有什么问题，以免浪费样品
合上盖子，注意为防止短路，把电源接触的地方擦干。
正负极一定不要接反
开机子，120V以上，140左右，正计时，一般半个小时左右就可以了，只要条带能跑出来，跑到胶的一半就行
③看结果
同时开第一和第二个紫外灯
一般把上样的那边放在近门口的一边

今天的结果见p5p6
最下面那四个是我的小鼠的，最后一个的第一对引物没跑出来，即缺失

#慕梓的电子日记簿[超话]#
D38. (✧∇✧)11. 24
1⃣️细胞实验 解冻 传代
拿钥匙，去-80℃冰库拿细胞，然后直接放室温，进细胞室做，还是SW1353细胞
给另一罐细胞，C28 用的是DMEM-F12培养基传代

2⃣️制胶
今天是纯纯地由我来啦~开熏[鼓掌]
▸先取出架子，从2楼拿玻璃板，10%SDS
把玻璃板套在架子上，对齐，然后卡上去
▸配胶 4块，12%的，用5mL的×2。共10mL的量
❌好好算吧孩子，可别825mL的还要165×5的加了，直接825加进去不香吗[笑cry][污][笑cry]我要被自己蠢死了[污]丢死人了[污][污][污]
▸灌胶 用1mL的枪头吸，打进去，先打4mL，再把其他的补补
▸等30min
▸制上层胶 一样一样的
然后我就撤了

3⃣️关于管小鼠...
师兄给了我一个本儿，以后就用它来记录各鼠的实验记录了，或者说，这就是的命运簿叭[笑哈哈][偷乐]

斛珠上头啊[awsl][awsl][awsl][awsl]

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D32
1⃣️换脱钙液
在2楼细胞室拿两个5mL枪头，
把四个板子从37℃摇床上拿下来，
把旧液体吸走，然后加2mL新的17%EDTA脱钙液
❌
1.把一个骨头忘切了，还完完整整地放在里面！[二哈][二哈][二哈]救大命了大失误[失望][失望]师兄补救的时候说骨头都已经软了不好切了
2.用5mL枪的时候稳一点，慢吸慢打。不然像我今天一样，给冲出去了
3.注意枪的数，本来调好的2mL打着打着变成2.8mL了，再打着打着变成3mL了[污]救命我太愚钝了

摇床的参数的设定