『AAV注射专题』-肝脏之静脉注射

肝脏对全身应用AAV有较高的亲和性，使用外周传递方式如静脉注射，配合AAV8等肝脏嗜性较强的血清型以及TBG等肝脏特异性启动子也可以较好的将目的基因递送到肝脏进行表达，操作方式简单且对动物侵入性伤害较小。

今天介绍一下尾静脉注射和新生小鼠静脉注射的操作手法：

1. 尾静脉注射
将小鼠放在标准限制器中，使注射器能够完全接触到整个尾巴长度。
将一根30G的针头固定在1cc结核菌素注射器上，尽可能远的插入尾部侧面静脉。选择一个远端部位，如果第一次注射失败，可以选择另一个更近端的注射部位。
注：a：小鼠尾巴上较容易接触到的静脉位于尾巴的侧面，且侧静脉非常浅，无需进针很深；小鼠尾部背面的静脉很难常规注射；尾部腹面的血管是动脉，不可注射。b：注射前用温水轻轻地加热尾巴，可以使血管得到一定程度的舒张，便于注射。
注射完成后取下针头，轻轻按压止血，然后立即将小鼠放回笼中。
注：使用此方法注射成年小鼠，病毒用量控制在300 -400μl较佳。

2. 新生小鼠静脉注射
需两个人配合完成，一人固定，一人注射；
注射前将小鼠置于干毛巾上，减少活动及损伤；
一人轻轻固定小鼠，使侧面朝上，暴露眼睛至颈部的颞浅静脉，置于放大镜下；
另一人沿着自头至颈的方向将30G的注射针头插入静脉旁的皮下，慢慢推进静脉（新生鼠皮肤呈现半透明，较易观察）；
慢慢注射病毒悬液；（如果注射成功，注射部位远端静脉会呈白色，如果未成功，皮下注射10μl即可看到明显的隆起）
注射完成后，取下针头，轻轻按压静脉，通常2-3分钟会停止出血；
将新生鼠在加热灯下照射后，放回母鼠身边；
如果注射不成功，让小鼠恢复5-10分钟，然后在另一侧尝试第二次注射；
注：使用此方法注射新生小鼠，病毒用量控制在100μl以内较佳。

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