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EJI在今年4月发表了一篇Technical comment，文章名字叫“Gene dose matters: Considerations for the use of inducible CD4-Cre-ERT2 mouse lines”，用小鼠模型深入做过实验的，很少有人不知道ERT2这个品系，这是一个很好的工具，我简单说一下：
如果想要研究一个基因在体内具有什么功能，最常用的手段就是利用小鼠模型，在小鼠中将其敲除，然后与未敲除的小鼠对比，看在某种条件下这两种小鼠的表型有何不同。举个例子，比如我们想研究基因X在糖尿病发展过程中的作用，那么我们就利用技术手段将该基因在小鼠中敲除，然后构建糖尿病模型（比较常用的就是喂养高脂高糖模型饲料，从而诱导胰岛素抵抗），检测评估糖尿病的各项指标，如脂肪含量、类型之类的。如果基因X敲除的小鼠完全没有表现出糖尿病的特征，和健康的小鼠一样，而对照组表现出了明显的糖尿病特征，那么基因X就有可能调控糖尿病，这时候需要重复实验、设计更严谨的剂量实验、用其他模型进行交叉验证等等等一系列细致的研究，如果最终发现敲除该基因确实能够完全逆转糖尿病，且你又找到了机制，那么我认为你可以发文章得诺奖。
当然这个不是重点，重点是基因敲除小鼠可能会有很多问题，现在技术当然比八九十年代成熟多了，再加上Crispr技术的兴起，很多公司可以在3到6个月拿到小鼠，怎么做的就不详细讲了，以前主要是利用同源重组，现在就是Cas9直接剪切，中科院生化与细胞所李劲松老师他们做得很牛逼。
Cre-Loxp系统是条件性敲除，与正常的全身性敲除不同，全身性敲除一般在胚胎干细胞时期就已经全敲，而Cre-Loxp则可以调控在某种细胞或者某一时期之后敲除，利用重组酶Cre特异性识别Flox片段位点，从而进行条件性敲除，我举个例子，比如基因X对小鼠早期发育很重要，将基因X在胚胎干细胞时期敲除后，小鼠无法存活。我们知道一个基因肯定不止有一种功能，我想研究基因X在糖尿病中的功能，但是我一敲除就胚胎致死，后面根本没法研究。
这个时候Cre-Loxp小鼠就派上用场，比如用X flox/flox RIP-Cre小鼠，意思就是只有在表达RIP的细胞中才会敲除X，胚胎时期不表达RIP，所以不敲除X，小鼠得以存活，而在小鼠发育后期开始表达RIP时，X才被敲除，有效的跳过了胚胎致死。更重要的是，之所以选择RIP，是因为RIP基因只在胰岛β细胞里表达，该小鼠只有胰岛β细胞里特异性敲除了基因X，能够更有效的用来研究特定细胞里的功能，有效的避免了继发的现象。继发就是指由于其他原因造成的结果（我就不举例子了，知识点太多[允悲]）。
那ERT2又是啥？ERT2是在普通的Cre基础上更加特异，比如这个小鼠X flox/flox RIP-Cre-ERT2正常是不敲除的，啥时候打药（tamoxifen）啥时候敲，这个小鼠可以用来做急性敲除的模型，但后面检测的话还要和Rosa26配。。好了，这个背景就简单先说到这吧……
我其实是想说一下这篇文章（p1），他们检测了两种 CD4-Cre-ERT2品系，一种是transgene的，一种是Knock in的，发现敲除效率果然不一样（p2），然后又在KLH免疫或LCMV感染下继续检测了CD4+ T的激活和Tfh细胞的分化，发现激活居然差了这么多，但激活细胞里的Tfh细胞分化变化不大（p3）。这项研究表明选择ERT2小鼠品系时要慎重，如transgene的小鼠就不太适合用来研究激活的CD4+ T细胞。这一对比也让人们对品系对结果的影响有了直观的认识，也让人们更加认识到了其对实验结果影响的重要性。https://t.cn/A64ZgBKy
如果想要研究一个基因在体内具有什么功能，最常用的手段就是利用小鼠模型，在小鼠中将其敲除，然后与未敲除的小鼠对比，看在某种条件下这两种小鼠的表型有何不同。举个例子，比如我们想研究基因X在糖尿病发展过程中的作用，那么我们就利用技术手段将该基因在小鼠中敲除，然后构建糖尿病模型（比较常用的就是喂养高脂高糖模型饲料，从而诱导胰岛素抵抗），检测评估糖尿病的各项指标，如脂肪含量、类型之类的。如果基因X敲除的小鼠完全没有表现出糖尿病的特征，和健康的小鼠一样，而对照组表现出了明显的糖尿病特征，那么基因X就有可能调控糖尿病，这时候需要重复实验、设计更严谨的剂量实验、用其他模型进行交叉验证等等等一系列细致的研究，如果最终发现敲除该基因确实能够完全逆转糖尿病，且你又找到了机制，那么我认为你可以发文章得诺奖。
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Cre-Loxp系统是条件性敲除，与正常的全身性敲除不同，全身性敲除一般在胚胎干细胞时期就已经全敲，而Cre-Loxp则可以调控在某种细胞或者某一时期之后敲除，利用重组酶Cre特异性识别Flox片段位点，从而进行条件性敲除，我举个例子，比如基因X对小鼠早期发育很重要，将基因X在胚胎干细胞时期敲除后，小鼠无法存活。我们知道一个基因肯定不止有一种功能，我想研究基因X在糖尿病中的功能，但是我一敲除就胚胎致死，后面根本没法研究。
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