接下来，我们确定了在pH 7.5（图5B）和pH 8.5（数据未显示）的外翻膜囊泡中Cys置换突变对MTSET的可及性，并得到了互补的结果。结果总结于图5，B和C，表明W258C和所有Cys置换在其周质侧MTSET无法访问（V259C，L262C，L264C和F267C），MTSET可以访问位于其胞质侧和VIII-IX环附近的所有Cys替换突变（80-95％）（图5，B和C，数据未显示）。后两种氨基酸的晶体结构已显示足够接近，可与TMS XI残基相互作用，因此，即使没有实验支持，在转运机构中也被赋予了结构和/或功能作用（参考文献11和11）。图。1）。所有突变体均在CL-NhaA中构建，CL-NhaA与天然NhaA一样表达并具有活性（26）。

（每日一水）
接下来，我们确定了在pH 7.5（图5B）和pH 8.5（数据未显示）的外翻膜囊泡中Cys置换突变对MTSET的可及性，并得到了互补的结果。结果总结于图5，B和C，表明W258C和所有Cys置换在其周质侧MTSET无法访问（V259C，L262C，L264C和F267C），MTSET可以访问位于其胞质侧和VIII-IX环附近的所有Cys替换突变（80-95％）（图5，B和C，数据未显示）。因此，在生理pH值下，MTSET可接近W258C的TMS IX残基，因此建议在NhaA的活性构象中排列细胞质漏斗。

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