#科研进展# 【Science|新技术定量测定CRISPRi的表达和突变表型】如果有新技术可以在不同群体中检测更为特异性和相关的表型,并将这些表型和单个的gRNA联系起来,那么将大大拓宽CRISPR的使用范围。一个重要基因的表达水平或一个重要蛋白的稳定性,可定义为分子表型,或可成为研究细胞生理学的一个敏感的测量工具。
2020年12月11日,来自加州大学伯克利分校的Nicholas T. Ingolia在Science杂志发表文章,将CRISPR干扰技术、报告基因标签化(barcoded)和测序结合研发出一种新技术CiBER-seq,可实现在细胞群体中应用整个gRNA的文库,同时在集中深度测序里将单个gRNA的表型区分开来。研究人员首先在酵母中应用CiBER-seq技术,鉴定出MET6、CWP1、PHO5、HIS4启动子(如P(HIS4))所驱动的报告基因的调控环路,这四种基因产物参与了一系列细胞内功能调节。四种启动子的调控环路都表现出与其已知调控和功能相符的表型特征,而且彼此之间独立且基本不重叠。研究开发了CiBER-seq工具,实现了在细胞群体中应用gRNA文库,利用集中测序就可以鉴定出单个gRNA的分子表型,不需要使用单细胞测序,简化了流程。同时,研究人员在酵母中应用此技术对综合应激反应途径进行研究,揭示出空载tRNA和tRNA缺乏对ISR途径的激活,证明CiBER-seq可提供一种强大的可广泛应用的研究遗传网络的工具。https://t.cn/A6q4ndMx
2020年12月11日,来自加州大学伯克利分校的Nicholas T. Ingolia在Science杂志发表文章,将CRISPR干扰技术、报告基因标签化(barcoded)和测序结合研发出一种新技术CiBER-seq,可实现在细胞群体中应用整个gRNA的文库,同时在集中深度测序里将单个gRNA的表型区分开来。研究人员首先在酵母中应用CiBER-seq技术,鉴定出MET6、CWP1、PHO5、HIS4启动子(如P(HIS4))所驱动的报告基因的调控环路,这四种基因产物参与了一系列细胞内功能调节。四种启动子的调控环路都表现出与其已知调控和功能相符的表型特征,而且彼此之间独立且基本不重叠。研究开发了CiBER-seq工具,实现了在细胞群体中应用gRNA文库,利用集中测序就可以鉴定出单个gRNA的分子表型,不需要使用单细胞测序,简化了流程。同时,研究人员在酵母中应用此技术对综合应激反应途径进行研究,揭示出空载tRNA和tRNA缺乏对ISR途径的激活,证明CiBER-seq可提供一种强大的可广泛应用的研究遗传网络的工具。https://t.cn/A6q4ndMx
题目好难噢!!!!!
涵盖初中、高中、大学的生物学知识
一套题20个选择题,5个大题。满满当当一沓试题!
其中最后两个大题是实验设计与教学设计。
原来教学设计还可以加入笔试(直接印了教材在试题中,让写教学目标、教学重难点、教学方法、教学过程)。
对hp教育局respect,一个考场而是几个人,三个候场监考。只是考了笔试,就花了八天的时间,还要等笔试成绩和面试时间,整个流程走下来怎么也得小半个月!再说一次!不愧是有钱的hp!在我旁边考试的是华科学硕小姐姐,考完以后了解到,学硕的旁友对于知识面很广的一套试卷也是挺难的。
希望tRNA为我转转运,让我水逆退散!
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其中最后两个大题是实验设计与教学设计。
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对hp教育局respect,一个考场而是几个人,三个候场监考。只是考了笔试,就花了八天的时间,还要等笔试成绩和面试时间,整个流程走下来怎么也得小半个月!再说一次!不愧是有钱的hp!在我旁边考试的是华科学硕小姐姐,考完以后了解到,学硕的旁友对于知识面很广的一套试卷也是挺难的。
希望tRNA为我转转运,让我水逆退散!
氨基酰-tRNA 合成酶催化氨基酰-tRNA 合成的主要反应步骤包括:
①氨基酰tRNA 合成酶催化ATP 分解为焦!磷!酸!与AMP
② AMP、酶、氨基酸三者结合为中间复合体(氨基酰-AMP-E),其中氨基酸的羧基与磷酸腺苷的磷酸以酐键相联,成为活化的氨基酸。
③活化氨基酸与tRNA分子的3’-CCA 末端上的腺苷酸的核糖2’或3’位的游离羟基以酯!键!结合,形成相应的氨基酰tRNA
谷氨酸—r氨基丁酸
忘差不多但还是选对了
大概这就是印象性排除
这样会很心虚
其实还是没记住
①氨基酰tRNA 合成酶催化ATP 分解为焦!磷!酸!与AMP
② AMP、酶、氨基酸三者结合为中间复合体(氨基酰-AMP-E),其中氨基酸的羧基与磷酸腺苷的磷酸以酐键相联,成为活化的氨基酸。
③活化氨基酸与tRNA分子的3’-CCA 末端上的腺苷酸的核糖2’或3’位的游离羟基以酯!键!结合,形成相应的氨基酰tRNA
谷氨酸—r氨基丁酸
忘差不多但还是选对了
大概这就是印象性排除
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