每日科技名词|噬菌体展示
来源:全国科学技术名词审定委员会
噬菌体展示
phage display
定义:将外源基因或随机序列的DNA分子群与噬菌体外壳蛋白基因相连接,使外源DNA所编码的蛋白质以融合蛋白形式表达在噬菌体外壳表面的方法。易于用免疫反应或配体特异性结合等方法筛得目的克隆。
学科:生物化学与分子生物学_方法与技术
相关名词:融合蛋白 特异性结合 基因克隆 外源基因
噬菌体展示技术是将外源基因与噬菌体外壳蛋白基因相连接,使外源基因所编码的蛋白质以融合蛋白形式表达在噬菌体外壳表面的方法。
噬菌体展示技术具有如下优点:
1.把噬菌体与其他分子的结合活性同噬菌体的可扩增性统一起来,从而使得噬菌体展示库成为一种高效的筛选体系。
2.通过生物系统特有的变异功能,产生变异的展示结构,在变异的结构中有可能会含有与靶分子亲和性提高的片段。
3.在获得高亲和性的多样化人源单克隆抗体中获得成功,已经成为继免疫动物得到的多克隆抗体和用杂交瘤技术得到的单克隆抗体之后的第三代抗体。
4.在筛选配基上,噬菌体库有其资源丰富、筛选迅速的优势。
5.在不清楚靶分子的结构,靶分子难以提纯或一旦提纯其构象可能改变的情况下,仍能通过筛选策略找到配基。
噬菌体展示技术由于受噬菌体-大肠杆菌表达系统某些限制因素的影响,具有自身的局限性。主要表现如下:从建立肽库开始,密码子的选择与寡核苷酸的合成就带有一定的偏向性,这就从遗传上限制了肽库的多样性;大肠杆菌转化效率的限制;生物系统选择的影响;所建的肽库容量只能达到109,要想构建大片段的肽库很困难;少数多肽由于疏水性过强,或由于影响外膜蛋白的折叠而不能展示在噬菌体表面。
从第一个噬菌体随机展示库被成功构建至今,这一技术得到了广泛的应用。噬菌体展示技术可用于筛选和分离蛋白质所需的配基、诊断和检测试剂的制备、新型疫苗的研制、新型药物的研制和设计、模拟细胞蛋白与蛋白的相互作用和抗原表位的分析等方面。[OK] https://t.cn/A6HyFOrw
来源:全国科学技术名词审定委员会
噬菌体展示
phage display
定义:将外源基因或随机序列的DNA分子群与噬菌体外壳蛋白基因相连接,使外源DNA所编码的蛋白质以融合蛋白形式表达在噬菌体外壳表面的方法。易于用免疫反应或配体特异性结合等方法筛得目的克隆。
学科:生物化学与分子生物学_方法与技术
相关名词:融合蛋白 特异性结合 基因克隆 外源基因
噬菌体展示技术是将外源基因与噬菌体外壳蛋白基因相连接,使外源基因所编码的蛋白质以融合蛋白形式表达在噬菌体外壳表面的方法。
噬菌体展示技术具有如下优点:
1.把噬菌体与其他分子的结合活性同噬菌体的可扩增性统一起来,从而使得噬菌体展示库成为一种高效的筛选体系。
2.通过生物系统特有的变异功能,产生变异的展示结构,在变异的结构中有可能会含有与靶分子亲和性提高的片段。
3.在获得高亲和性的多样化人源单克隆抗体中获得成功,已经成为继免疫动物得到的多克隆抗体和用杂交瘤技术得到的单克隆抗体之后的第三代抗体。
4.在筛选配基上,噬菌体库有其资源丰富、筛选迅速的优势。
5.在不清楚靶分子的结构,靶分子难以提纯或一旦提纯其构象可能改变的情况下,仍能通过筛选策略找到配基。
噬菌体展示技术由于受噬菌体-大肠杆菌表达系统某些限制因素的影响,具有自身的局限性。主要表现如下:从建立肽库开始,密码子的选择与寡核苷酸的合成就带有一定的偏向性,这就从遗传上限制了肽库的多样性;大肠杆菌转化效率的限制;生物系统选择的影响;所建的肽库容量只能达到109,要想构建大片段的肽库很困难;少数多肽由于疏水性过强,或由于影响外膜蛋白的折叠而不能展示在噬菌体表面。
从第一个噬菌体随机展示库被成功构建至今,这一技术得到了广泛的应用。噬菌体展示技术可用于筛选和分离蛋白质所需的配基、诊断和检测试剂的制备、新型疫苗的研制、新型药物的研制和设计、模拟细胞蛋白与蛋白的相互作用和抗原表位的分析等方面。[OK] https://t.cn/A6HyFOrw
#五条悟[超话]#
中村 & 子安 第二部分
--甚尔在之后成功的杀死了天内,并出现在夏油的面前说“辛苦了,解散解散”。我认为这句台词象征了甚尔这个角色。
子安:作为一个专业人士,按照计划一样的完成了目标后工作就结束了,所以“好,辛苦了”就是这个意思。其实大家都是差不多一样的吧,工作结束后,也会说着“结束了!”然后想要喝杯啤酒那样。我就是以从工作中解放了,回归日常生活的感觉来演绎的。观众可能会因为道德而拥有不同的看法,但是对他来说,这种事情在工作中发生过很多次了,所以他可能总是以同样的方式来干活吧。当然,我认为这样做是不好的。用那种轻率的言辞来结束,“作为一个人”应该怎么样的想法我也会这样想,但是甚尔不是这样认为的。对他来说,人了就像是我们录音结束后想去喝一杯的感觉。如果能展现出这种感觉就好了。
--接下来的第28话描绘了甚尔与夏油之间的战斗。
子安:也许甚尔不太了解夏油吧。我不认为甚尔对夏油有多大的兴趣。他觉得夏油杰也就那个水平吧。所以,无论夏油杰使出多么厉害的手段,对甚尔来说就像是蚊子或者苍蝇向人类飞来的感觉一样。从战斗方式来看也是这样的,完全没把对方放在眼里。最后也是因为夏油杰是咒灵操术的使用者才放过他。夏油杰的生死对他来说无所谓。
中村:因为怕杀了他咒灵会暴走吧。但是我在看电视播出的时候在想,如果甚尔那么强的话,哪怕夏油的咒灵失控了也能杀死它们(咒灵)吧。所以,他是真的对夏油毫无兴趣。他(夏油)死了的话就死了吧,不过他好像还活着,所以这样捡回了一条命。就是这样的感觉吧。
子安:只是,那句“有这样的好父母真幸运”「日文原句「親に恵まれたな」」(甚尔对夏油杰说的)是句很重要的台词因为这句话能让人联想到惠。我觉得这是很棒的构思。从某种意义来说,夏油就是为此存在的。就像是甚尔为了五条的觉醒而存在一样,夏油是为了甚尔而存在的。而且,这个故事也对夏油产生了极大的影响。这个故事的结构是通过精心来设计的,这真是个了不起的故事。
--在那之后复活的五条悟出现在了甚尔
的眼前,和平日里的他不一样,看起来完全处于嗨的状态。
中村:即使说与平时不同,但那只是按照情节来描写的。五条在临死前,觉得现在自己能够做到以前做不到的事情。他试了一下然后成功了。我在构思时希望能够确保故事情节的流畅和合理。虽然甚尔就在眼前,但是他或许没有感觉到对方的存在吧,这也和之后的台词“对不起,天内,我现在并没有为了你而生气”是有关联的。现在他是“想享受发生在自己身上的变化“的心情。
子安:从甚尔角度来看,他会觉得“骗人的吧?”,他会拥有这种心情吧。实际上他也说了“真的假的?”这种话。那句话就足以说明了吧。在配音时,我自己也实际上出现了“真的假的?” 这种想法。因为这已经是出乎意料之外的事情了。甚尔虽然是一名肉体系,但是他也是一名经过精打细算才制定战略,头脑清晰的人,所以当他看见面前的五条时就马上察觉到五条很危险了吧。而且,这是他自己种下的种子导致的。换做以前的话,他也许会考虑这样做那样做也许能赢,但是现在的五条已经到了连这种也想像不了的次元。当被展示出压倒性的东西时,那种挫败感真的很讨厌。而且是中村君演绎的,感觉更加火大了。真的,只光演了强大的角色。
中村:子安先生不也是在扮演着强大的角色吗?
子安:我虽然也在扮演着强大的角色,但我更偏向于那种努力挣扎而变得强大的类型,而不是真正的最强者。所以当看到五条悟时,我会觉得很羡慕,也会想要尝试,但我还是做不到。夏油有一种通过挣扎然后想变得更强大的欲望,这和我之前饰演的角色很相似,但是五条却不一样。我是不是有点阴暗了?虽然不是说想表现得像娘娘腔一样。但我拥有的东西和五条的不太相容,所以我觉得还是由中村来扮演更好。能感受到一种达观。
中村:是指负面的因素吗?
子安:是的,我总会倾向于某个方向。说得好听一点的话就是有一种反叛心态吧。但是中村君能表现出一种“没关系,我就是我,我一开始就觉得我很强”的样子,这和五条非常契合。
中村: 也许甚爾的这一部分正是他如此吸引人的原因,他的强大源于对在禅院家被视为失败者而怀有的怨恨。
子安: 是的,我觉得那确实是适得其所。我也和甚尔一样,当我看到中村君的表演时对五条这种压倒性的存在感到焦躁不安。所以,明明不需要去战斗但是还是去了,然后战败了。明明从一开始就知道胜负已决。
中村:在那方面甚尔也是专业的吧。虽然输给了五条,但是通常来说,觉得打不过的话都会选择逃跑。我觉得五条做不到这一点,即使他知道会输,但是说不定会有什么变化,所以他一定会战斗下去。我认为原本的甚尔就是一个能够做出明确决策的人。
子安:如果甚尔能按照平常一样判断行事,说不定也能来到涉谷吧。
中村 & 子安 第二部分
--甚尔在之后成功的杀死了天内,并出现在夏油的面前说“辛苦了,解散解散”。我认为这句台词象征了甚尔这个角色。
子安:作为一个专业人士,按照计划一样的完成了目标后工作就结束了,所以“好,辛苦了”就是这个意思。其实大家都是差不多一样的吧,工作结束后,也会说着“结束了!”然后想要喝杯啤酒那样。我就是以从工作中解放了,回归日常生活的感觉来演绎的。观众可能会因为道德而拥有不同的看法,但是对他来说,这种事情在工作中发生过很多次了,所以他可能总是以同样的方式来干活吧。当然,我认为这样做是不好的。用那种轻率的言辞来结束,“作为一个人”应该怎么样的想法我也会这样想,但是甚尔不是这样认为的。对他来说,人了就像是我们录音结束后想去喝一杯的感觉。如果能展现出这种感觉就好了。
--接下来的第28话描绘了甚尔与夏油之间的战斗。
子安:也许甚尔不太了解夏油吧。我不认为甚尔对夏油有多大的兴趣。他觉得夏油杰也就那个水平吧。所以,无论夏油杰使出多么厉害的手段,对甚尔来说就像是蚊子或者苍蝇向人类飞来的感觉一样。从战斗方式来看也是这样的,完全没把对方放在眼里。最后也是因为夏油杰是咒灵操术的使用者才放过他。夏油杰的生死对他来说无所谓。
中村:因为怕杀了他咒灵会暴走吧。但是我在看电视播出的时候在想,如果甚尔那么强的话,哪怕夏油的咒灵失控了也能杀死它们(咒灵)吧。所以,他是真的对夏油毫无兴趣。他(夏油)死了的话就死了吧,不过他好像还活着,所以这样捡回了一条命。就是这样的感觉吧。
子安:只是,那句“有这样的好父母真幸运”「日文原句「親に恵まれたな」」(甚尔对夏油杰说的)是句很重要的台词因为这句话能让人联想到惠。我觉得这是很棒的构思。从某种意义来说,夏油就是为此存在的。就像是甚尔为了五条的觉醒而存在一样,夏油是为了甚尔而存在的。而且,这个故事也对夏油产生了极大的影响。这个故事的结构是通过精心来设计的,这真是个了不起的故事。
--在那之后复活的五条悟出现在了甚尔
的眼前,和平日里的他不一样,看起来完全处于嗨的状态。
中村:即使说与平时不同,但那只是按照情节来描写的。五条在临死前,觉得现在自己能够做到以前做不到的事情。他试了一下然后成功了。我在构思时希望能够确保故事情节的流畅和合理。虽然甚尔就在眼前,但是他或许没有感觉到对方的存在吧,这也和之后的台词“对不起,天内,我现在并没有为了你而生气”是有关联的。现在他是“想享受发生在自己身上的变化“的心情。
子安:从甚尔角度来看,他会觉得“骗人的吧?”,他会拥有这种心情吧。实际上他也说了“真的假的?”这种话。那句话就足以说明了吧。在配音时,我自己也实际上出现了“真的假的?” 这种想法。因为这已经是出乎意料之外的事情了。甚尔虽然是一名肉体系,但是他也是一名经过精打细算才制定战略,头脑清晰的人,所以当他看见面前的五条时就马上察觉到五条很危险了吧。而且,这是他自己种下的种子导致的。换做以前的话,他也许会考虑这样做那样做也许能赢,但是现在的五条已经到了连这种也想像不了的次元。当被展示出压倒性的东西时,那种挫败感真的很讨厌。而且是中村君演绎的,感觉更加火大了。真的,只光演了强大的角色。
中村:子安先生不也是在扮演着强大的角色吗?
子安:我虽然也在扮演着强大的角色,但我更偏向于那种努力挣扎而变得强大的类型,而不是真正的最强者。所以当看到五条悟时,我会觉得很羡慕,也会想要尝试,但我还是做不到。夏油有一种通过挣扎然后想变得更强大的欲望,这和我之前饰演的角色很相似,但是五条却不一样。我是不是有点阴暗了?虽然不是说想表现得像娘娘腔一样。但我拥有的东西和五条的不太相容,所以我觉得还是由中村来扮演更好。能感受到一种达观。
中村:是指负面的因素吗?
子安:是的,我总会倾向于某个方向。说得好听一点的话就是有一种反叛心态吧。但是中村君能表现出一种“没关系,我就是我,我一开始就觉得我很强”的样子,这和五条非常契合。
中村: 也许甚爾的这一部分正是他如此吸引人的原因,他的强大源于对在禅院家被视为失败者而怀有的怨恨。
子安: 是的,我觉得那确实是适得其所。我也和甚尔一样,当我看到中村君的表演时对五条这种压倒性的存在感到焦躁不安。所以,明明不需要去战斗但是还是去了,然后战败了。明明从一开始就知道胜负已决。
中村:在那方面甚尔也是专业的吧。虽然输给了五条,但是通常来说,觉得打不过的话都会选择逃跑。我觉得五条做不到这一点,即使他知道会输,但是说不定会有什么变化,所以他一定会战斗下去。我认为原本的甚尔就是一个能够做出明确决策的人。
子安:如果甚尔能按照平常一样判断行事,说不定也能来到涉谷吧。
cm白石线碎碎念,第一次玩到这么be的我先写为敬【有剧透】
白石我对他感兴趣是因为尾音很勾人而且很捉摸不透,感觉看不懂他,我想看看他不同的一面。在看到一些伏笔之后我猜他现在的性格应该是和之前的经历有关,我开始好奇他的过去也想看看在我们一起行动之后会不会有什么改变。
白石本来是因为要观察才接近的女主,刚开始他对女主的态度只是觉得有趣,可是女主总是会做出一些意外的举动。她是第一个想要去理解自己的人,从这个时候开始白石叫小市香的名字了,也是从这个时候开始白石的变化更明显了。我很喜欢他变化的这个过程,像柳爱时说的,白石其实很单纯。因为缺乏人性,他在情感上的表现会像个孩子,行动更偏向本能。他会在她亲近柳爱时的时候闹别扭,会在听到她可能要和别人过圣诞节的时候觉得生气和痛苦,也是因为这样他不太会在女主面前遮掩自己的害羞和失落。他试着理解这些情感,试着体贴女主。给她做玉子烧,想送她圣诞礼物,在女主没精神的时候拜托樱川小姐和向井小姐陪她喝酒,这些表现都让我觉得非常可爱。在这期间他也动摇过。理智上他要完成任务,但是情感是无法控制的,小市香无疑让他的世界染上了色彩,让这个没有心的人偶逐渐理解人,成为人。一次次摇摆不定的最后他做出了选择,这一次他要亲手保护自己得到的归处。
HE结局
关于he结局我心情很复杂,当白石说出那句“我是……你的主治医生”,此时再加上cg和bgm一起出现的威力真的太大了……,上一秒还在庆幸自己重要的人终于醒了下一秒发现她失去了记忆,这段心理活动的描写真的很刀呜呜。我当时忘了后面还有一段,以为这里是结局都要碎了,合计fd甜蜜也行吧。剧情最后记忆恢复表了白。这时我还不理解朋友说的白石没有he,觉得还行啊结局还好,但是我突然发现我们有信息差,我还没有看后日谈!于是我跑去看了后日谈,好,这次彻底碎了。因为他要赎罪,他不能离开这里,只能在梦中幻想自己的爱人。如果他此时还是一个不懂情感的人偶可能就不会这么痛苦,但是他现在已经有了人类的心,有了喜欢的,想见的人,但是他只能待在四四方方的牢房里。这就是he吗哈哈哈哈我哭。
BE结局
当时的第一感受就是这张cg真的太美了。看完这个结局之后朋友给我发了后续,虽然很虐但是我很喜欢这个结局,看完真的有种说不出话的感觉。曾经的白石做不到把市香杀掉,可是当接到了杀死星野香月的指令,看到她即使要杀死自己的亲弟弟也没有反应的时候他明白了,现在的她已经不是她了。白石最后亲手了结了她的生命。这个结局绝望、痛苦,纠缠着爱和欲,我真的很难描述它给我带来的震撼,感觉完全可以算我喜欢的be结局第一名了,我爱它!
白石我对他感兴趣是因为尾音很勾人而且很捉摸不透,感觉看不懂他,我想看看他不同的一面。在看到一些伏笔之后我猜他现在的性格应该是和之前的经历有关,我开始好奇他的过去也想看看在我们一起行动之后会不会有什么改变。
白石本来是因为要观察才接近的女主,刚开始他对女主的态度只是觉得有趣,可是女主总是会做出一些意外的举动。她是第一个想要去理解自己的人,从这个时候开始白石叫小市香的名字了,也是从这个时候开始白石的变化更明显了。我很喜欢他变化的这个过程,像柳爱时说的,白石其实很单纯。因为缺乏人性,他在情感上的表现会像个孩子,行动更偏向本能。他会在她亲近柳爱时的时候闹别扭,会在听到她可能要和别人过圣诞节的时候觉得生气和痛苦,也是因为这样他不太会在女主面前遮掩自己的害羞和失落。他试着理解这些情感,试着体贴女主。给她做玉子烧,想送她圣诞礼物,在女主没精神的时候拜托樱川小姐和向井小姐陪她喝酒,这些表现都让我觉得非常可爱。在这期间他也动摇过。理智上他要完成任务,但是情感是无法控制的,小市香无疑让他的世界染上了色彩,让这个没有心的人偶逐渐理解人,成为人。一次次摇摆不定的最后他做出了选择,这一次他要亲手保护自己得到的归处。
HE结局
关于he结局我心情很复杂,当白石说出那句“我是……你的主治医生”,此时再加上cg和bgm一起出现的威力真的太大了……,上一秒还在庆幸自己重要的人终于醒了下一秒发现她失去了记忆,这段心理活动的描写真的很刀呜呜。我当时忘了后面还有一段,以为这里是结局都要碎了,合计fd甜蜜也行吧。剧情最后记忆恢复表了白。这时我还不理解朋友说的白石没有he,觉得还行啊结局还好,但是我突然发现我们有信息差,我还没有看后日谈!于是我跑去看了后日谈,好,这次彻底碎了。因为他要赎罪,他不能离开这里,只能在梦中幻想自己的爱人。如果他此时还是一个不懂情感的人偶可能就不会这么痛苦,但是他现在已经有了人类的心,有了喜欢的,想见的人,但是他只能待在四四方方的牢房里。这就是he吗哈哈哈哈我哭。
BE结局
当时的第一感受就是这张cg真的太美了。看完这个结局之后朋友给我发了后续,虽然很虐但是我很喜欢这个结局,看完真的有种说不出话的感觉。曾经的白石做不到把市香杀掉,可是当接到了杀死星野香月的指令,看到她即使要杀死自己的亲弟弟也没有反应的时候他明白了,现在的她已经不是她了。白石最后亲手了结了她的生命。这个结局绝望、痛苦,纠缠着爱和欲,我真的很难描述它给我带来的震撼,感觉完全可以算我喜欢的be结局第一名了,我爱它!
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