【Sci Transl Med:揭示帕金森疾病中的关键致病性蛋白 或有望帮助开发新型个体化疗法】病理性的α突触核蛋白在诸如帕金森疾病(PD)等α突触核蛋白病的发病机制中扮演着重要的作用。近日,一篇发表在国际杂志Science Translational Medicine上题为“Enhanced mTORC1 signaling and protein synthesis in pathologic α-synuclein cellular and animal models of Parkinson's disease”的研究报告中,来自约翰霍普金斯大学等机构的科学家们通过研究发现,一种长期与帕金森疾病相关的所谓的病理性蛋白质或能诱发细胞增加蛋白质的合成,最终杀死这种在神经变性疾病中死亡的脑细胞亚型。相关研究发现或能为治疗人类帕金森疾病提供潜在的新型靶点,帕金森疾病在美国影响着1%的60岁以上的人群的健康,目前尚无有效的治愈手段。https://t.cn/A6lkhy9r

干货分享 | 细胞培养过程中不可忽视的问题

在细胞培养过程中,内毒素是一个不容忽视的问题。内毒素主要来源于革兰氏阴性细菌的细胞壁,如大肠杆菌、绿脓杆菌等。在细胞培养过程中,如果使用了含有内毒素的试剂或介质,可能会对细胞生长和分化产生负面影响,甚至导致实验失败。内毒素的特点是在其产生的量相对较少时,对宿主细胞没有直接的毒性作用,而是通过诱导炎症反应间接产生各种生物学效应。虽然内毒素的毒性作用相对较弱,但在细胞培养中,其影响却不容忽视。

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分,其化学本质是一种脂多糖(LPS)。与外毒素不同,内毒素不能穿过细胞膜,只能在细胞外发挥作用。革兰氏阴性细菌的内毒素被宿主细胞识别后,会触发炎症反应,这可能会干扰细胞的正常生长和分化。例如,内毒素可以诱导产生肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1(IL-1),这些炎症因子会对细胞产生毒害作用,抑制其生长或诱导其凋亡。

在细胞培养过程中,细胞的生理功能受到多种因素的影响,包括营养物质、激素、生长因子等。当内毒素存在时,这些因素的作用可能会受到影响。例如,内毒素可以干扰胰岛素的信号转导途径,从而影响细胞的能量代谢和蛋白质合成。

1. 细胞形态变化:在含有内毒素的培养基中培养细胞时,细胞形态会发生明显变化,如细胞体积缩小、细胞折光性降低等。这些变化通常表明细胞正在遭受损害或死亡。

2. 细胞增殖抑制:内毒素可抑制细胞的增殖,导致细胞生长停滞或凋亡。这是因为在内毒素的作用下,细胞周期的各期都会受到影响,包括G0/G1期延长、S期缩短等。

3. 细胞功能改变:内毒素还可以引起细胞功能的改变。例如,内毒素可以刺激一些细胞分泌炎症因子,导致局部炎症反应;同时也可以诱导一些细胞的凋亡或自噬等。

内毒素产生的原因

1. 革兰氏阴性细菌的存在:在细胞培养环境中,革兰氏阴性细菌是一种常见的污染源。这些细菌在培养过程中可能死亡,导致内毒素的释放。

2. 培养基污染:细胞培养所用的培养基可能受到细菌污染,特别是那些含有血清或蛋白成分的培养基。这些污染的成分可能促进革兰氏阴性细菌的生长和内毒素的产生。

3. 操作过程中的污染:细胞培养过程中的操作环节,如样本的取放、细胞的传代等,如果没有严格的清洁和消毒措施,也可能导致内毒素的污染。

避免内毒素不良影响的措施

1. 选择高质量的试剂和介质:尽量选择来自信誉良好的供应商的试剂和介质,并严格按照生产商的推荐使用。避免使用含有内毒素的试剂或介质。

2. 细胞株的选择:选择对内毒素敏感度低的细胞株进行培养。例如,某些肿瘤细胞株对内毒素的敏感性较低,可以优先考虑使用这些细胞株进行实验。

3. 培养条件的优化:优化细胞培养条件,如温度、pH值、渗透压等,以降低内毒素对细胞的不良影响。同时,注意保持培养环境的无菌状态,防止细菌污染。

4. 内毒素去除:对于已经含有内毒素的培养基或试剂,可以使用内毒素吸附剂或去除剂进行处理,以降低内毒素的浓度。例如,一些特定的抗体或蛋白可以结合内毒素并帮助其去除。

5. 检测和质量控制:定期对培养基、试剂和细胞样品进行内毒素检测,以确保其浓度在安全范围内。同时,建立严格的质量控制体系,确保实验结果的准确性和可重复性。

过氧化氢的应用

过氧化氢是一种强氧化剂,具有广谱抗菌作用,可以有效杀灭细菌和病毒。在细胞培养中,过氧化氢被广泛应用于消毒和预防内毒素的产生。

1. 预处理培养基:在培养基使用之前,加入一定浓度的过氧化氢进行预处理,可以有效地杀灭细菌,减少培养基中的内毒素污染。

2. 细胞消毒:对于已经受到内毒素污染的细胞,可以使用过氧化氢进行消毒。一定浓度的过氧化氢可以杀灭细菌,减少内毒素的产生,使细胞培养环境得到改善。

3. 空气消毒:细胞培养室的空气也需要注意消毒。通过使用过氧化氢熏蒸或喷雾消毒,可以杀灭空气中的细菌,减少内毒素的产生。

然而,使用过氧化氢也存在一些问题。首先,过氧化氢的强氧化性能可能会对细胞产生直接的毒性作用。其次,过氧化氢的处理可能会影响细胞的生理状态和功能。因此,在使用过氧化氢处理细胞时,需要仔细考虑其浓度、作用时间和处理方式等因素。#医生##医学生##sci论文##细胞实验###动物实验外包#

干货分享 | 细胞培养过程中不可忽视的问题

在细胞培养过程中,内毒素是一个不容忽视的问题。内毒素主要来源于革兰氏阴性细菌的细胞壁,如大肠杆菌、绿脓杆菌等。在细胞培养过程中,如果使用了含有内毒素的试剂或介质,可能会对细胞生长和分化产生负面影响,甚至导致实验失败。内毒素的特点是在其产生的量相对较少时,对宿主细胞没有直接的毒性作用,而是通过诱导炎症反应间接产生各种生物学效应。虽然内毒素的毒性作用相对较弱,但在细胞培养中,其影响却不容忽视。

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分,其化学本质是一种脂多糖(LPS)。与外毒素不同,内毒素不能穿过细胞膜,只能在细胞外发挥作用。革兰氏阴性细菌的内毒素被宿主细胞识别后,会触发炎症反应,这可能会干扰细胞的正常生长和分化。例如,内毒素可以诱导产生肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1(IL-1),这些炎症因子会对细胞产生毒害作用,抑制其生长或诱导其凋亡。

在细胞培养过程中,细胞的生理功能受到多种因素的影响,包括营养物质、激素、生长因子等。当内毒素存在时,这些因素的作用可能会受到影响。例如,内毒素可以干扰胰岛素的信号转导途径,从而影响细胞的能量代谢和蛋白质合成。

1. 细胞形态变化:在含有内毒素的培养基中培养细胞时,细胞形态会发生明显变化,如细胞体积缩小、细胞折光性降低等。这些变化通常表明细胞正在遭受损害或死亡。

2. 细胞增殖抑制:内毒素可抑制细胞的增殖,导致细胞生长停滞或凋亡。这是因为在内毒素的作用下,细胞周期的各期都会受到影响,包括G0/G1期延长、S期缩短等。

3. 细胞功能改变:内毒素还可以引起细胞功能的改变。例如,内毒素可以刺激一些细胞分泌炎症因子,导致局部炎症反应;同时也可以诱导一些细胞的凋亡或自噬等。

内毒素产生的原因

1. 革兰氏阴性细菌的存在:在细胞培养环境中,革兰氏阴性细菌是一种常见的污染源。这些细菌在培养过程中可能死亡,导致内毒素的释放。

2. 培养基污染:细胞培养所用的培养基可能受到细菌污染,特别是那些含有血清或蛋白成分的培养基。这些污染的成分可能促进革兰氏阴性细菌的生长和内毒素的产生。

3. 操作过程中的污染:细胞培养过程中的操作环节,如样本的取放、细胞的传代等,如果没有严格的清洁和消毒措施,也可能导致内毒素的污染。

避免内毒素不良影响的措施

1. 选择高质量的试剂和介质:尽量选择来自信誉良好的供应商的试剂和介质,并严格按照生产商的推荐使用。避免使用含有内毒素的试剂或介质。

2. 细胞株的选择:选择对内毒素敏感度低的细胞株进行培养。例如,某些肿瘤细胞株对内毒素的敏感性较低,可以优先考虑使用这些细胞株进行实验。

3. 培养条件的优化:优化细胞培养条件,如温度、pH值、渗透压等,以降低内毒素对细胞的不良影响。同时,注意保持培养环境的无菌状态,防止细菌污染。

4. 内毒素去除:对于已经含有内毒素的培养基或试剂,可以使用内毒素吸附剂或去除剂进行处理,以降低内毒素的浓度。例如,一些特定的抗体或蛋白可以结合内毒素并帮助其去除。

5. 检测和质量控制:定期对培养基、试剂和细胞样品进行内毒素检测,以确保其浓度在安全范围内。同时,建立严格的质量控制体系,确保实验结果的准确性和可重复性。

过氧化氢的应用

过氧化氢是一种强氧化剂,具有广谱抗菌作用,可以有效杀灭细菌和病毒。在细胞培养中,过氧化氢被广泛应用于消毒和预防内毒素的产生。

1. 预处理培养基:在培养基使用之前,加入一定浓度的过氧化氢进行预处理,可以有效地杀灭细菌,减少培养基中的内毒素污染。

2. 细胞消毒:对于已经受到内毒素污染的细胞,可以使用过氧化氢进行消毒。一定浓度的过氧化氢可以杀灭细菌,减少内毒素的产生,使细胞培养环境得到改善。

3. 空气消毒:细胞培养室的空气也需要注意消毒。通过使用过氧化氢熏蒸或喷雾消毒,可以杀灭空气中的细菌,减少内毒素的产生。

然而,使用过氧化氢也存在一些问题。首先,过氧化氢的强氧化性能可能会对细胞产生直接的毒性作用。其次,过氧化氢的处理可能会影响细胞的生理状态和功能。因此,在使用过氧化氢处理细胞时,需要仔细考虑其浓度、作用时间和处理方式等因素。#医生##医学生##sci论文##细胞实验###动物实验外包#


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