腺病毒载体：将外源基因导入细胞的有力工具#腺病毒##病毒包装##载体构建#

腺病毒(Adenovirus，Ad)是一种无包膜的DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。腺病毒拥有近50个血清型，大多数腺病毒载体都是基于血清型2和血清型5，通过转基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1基因的细胞中复制，因此是一种适用于治疗的高效控制系统。重组腺病毒是进行基因转移和表达的工具，功能强大并易于操作。腺病毒独特的生物学特征使它成为“载体的首选”，被科研工作者广泛使用。

腺病毒载体能感染分裂和非分裂细胞。它适用于体内和体外基因传递，转染效率高，对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统 腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。当有以下实验要求时，可以考虑使用腺病毒：

①需缩短实验周期

慢病毒感染效率约 70% 左右，不能直接进行后续实验，需筛选稳定细胞株，而筛选时间至少为两周。而腺病毒感染效率高，在很多细胞株中的效率可以达到 99%，可直接进行后续实验，节约经济成本和时间成本。

② 需进行动物实验

用于动物实验的病毒需具有较高的滴度，才能达到使用更小体积注射的目的。目前，慢病毒能达到的较高有效滴度通常在 10E8TU/mL 左右，如选用慢病毒，约需 1mL 病毒注射体积。大体积的液体量对于动物是有害的，尤其是注射脑部。腺病毒的滴度可达 10E11PFU/mL，应用于动物实验时，每只小鼠只需要 1μL，而每只大鼠 10μL 即可。不仅如此，腺病毒可进行扩增纯化，从而避免重新包装 ，以节约经济成本和时间成本。

可根据以下3种病毒的区别，选择适合您的病毒载体。

过去24小时，太阳活动水平低。日面上存在11个黑子活动区，无M级及以上级别耀斑产生。太阳风速度由500km/s下降至420km/s左右。地磁有3小时达到活跃水平，其余时间地磁平静至微扰。始于世界时15日的小质子事件，于世界时16日01:15结束，地球同步轨道大于10MeV质子通量峰值为14pfu。预计未来三天，太阳活动水平低至中等，有产生M级耀斑的可能。受14日CME的影响，地磁在17日可能达到磁暴水平。受重现性冕洞高速流的影响，18-19日地磁可能达到活跃或磁暴水平。

过去24小时，太阳活动水平高。日面上存在8个黑子活动区，活动区AR3514产生了2个M级耀斑。太阳风速度上升至500km/s左右。地磁平静至微扰。地球同步轨道大于10MeV质子通量超过质子事件阈值（10pfu），达到小质子事件水平，当前通量为12pfu。
预计未来三天，太阳活动水平中等，有产生M级及以上级别耀斑的可能。受14-15日爆发的CME影响，地磁在16-17日可能达到中等磁暴水平。受重现性冕洞高速流影响，18日地磁可能达到活跃水平。16日地球同步轨道大于10MeV质子通量将维持在小质子事件水平。