中华人民共和国国家标准
农业农村部公告第627号-2-2022
饲料中二羟丙茶碱的测定 液相色谱-串联质谱法
Determination of diprophylline in feeds-
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
（转载：https://t.cn/A6WpCx8y）
1范围
本文件规定了饲料中二羟丙茶碱的液相色谱-串联质谱测定方法。
本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中二羟丙茶碱的测定。
本文件的检出限为0.01 mg/kg，定量限为0.05 mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 20195动物饲料、试样的制备
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义
4原理
试样中的二羟丙茶碱用酸溶被提取，经固相萃取柱净化，用液相色谱-串联质谱仪测定，基质匹配标准溶液校准，外标法定量。
5试剂或材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
5.1 水：GB/T 6682，一级。
5.2甲醇：色谱纯。
5.3甲酸：色谱纯。
5.4乙酸铵：色谱纯。
5.5 25%甲醇溶液：取甲醇250 mL，加水稀释至1L，混匀。
5.6 0.2%甲酸溶液：取甲酸2mL加水稀释至上1L，混匀。
5.7乙酸铵溶液（200mmol/L）：称取乙酸铵3.1g加水溶解并稀释至200mL，混匀。
5.8乙酸铵-甲酸溶液：移取乙酸铵溶液（5.7）12.5 mL和甲酸1 mL，加水定容至500 mL，混匀。
5.9标准储备溶液（1mg/mL）：准确称取二羟丙茶碱标准品（CAS号：479-18-5，纯度不低于98%）50 mg（精确至0.01 mg）于50 mL容量瓶中，用25%甲醇溶液（5.5）溶解定容。于2℃~8℃保存，有效期为3个月。
5.10标准中间溶液（10μg/mL）：准确移取二羟丙茶碱标准储备溶液（5.9）1 mL于100 mL容量瓶中，用甲醇（5.2）稀释至刻度，混匀。于2℃~8℃保存，有效期为1个月。
5.11 固相萃取柱：混合型阳离子交换柱，60 mg/3 mL，或性能相当者。
5.12 微孔滤膜：0.22μm，水系。
6仪器设备
6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。
6.2分析天平：感量0.1 mg和0.01 mg。
6.3离心机：转速不低于 8 000 r/min。
6.4往复式振荡器。
6.5固相萃取装置。
6.6涡旋混合器。
6.7氮吹仪。
7样品
按GB/T 20195的规定制备试样，至少200g，粉碎后通过0.425mm孔筛，充分混匀，装入容器，密闭保存，备用。选取类型相同，均匀一致、且在待测物保留时间处，仪器响应值小于方法定量限30%的饲料样品，作为空白试样。
8试验步骤
8.1提取
平行做2份试验。称取试样2 g（精确至0.000 1 g），于50 mL离心管中，准确加入20 mL 0.2%甲酸溶液（5.6），播匀，振荡20 min，以8 000 r/min离心5 min， 移取上清液作为备用液。
8.2 净化
8.2. 1配合饲料、浓缩饲料和精料补充料：将固相萃取柱依次用3 mL甲醇（5.2）、3 mL水活化。准确移取5mI备用液（8.1）过柱，用3mL水淋洗，抽干，再用3mL甲醇（5.2）洗脱，收集洗脱液，于50℃氮吹至干，准确加入1 mL 0.2%甲酸溶液（5.6）溶解，涡旋混匀，过0.22μm微孔滤膜（5.12），备用。
8.2.2添加剂预混合饲料：取适量备用液（8.1）过0.22μm微孔滤膜（5.12）2次，备用。
8.3基质匹配标准系列溶液的制备
取空白试样，按8.1和8.2处理得到空白基质溶液，取适量标准中间溶液（5.10），用甲醇配制成浓度分别为2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0 ngmL、100.0 ng/mL、200.0 ng/mL、 500.0 ng/mL的标准系列溶液，各取1mL于50℃氦吹至干，准确加入1mL空白基质溶液，涡旋混匀，待测。
8.4 测定
8.4.1液相色谱参考条件
色谱柱：C18柱，柱长50mm，内径2.1mm，粒径1.8μm，或性能相当者。
流动相A：甲醇（5.2）；流动相B：乙酸铵-甲酸溶液（5.8）。梯度洗脱条件见表1。
image.png
流速：0.3 mL/min。
柱温：30℃。
进样量：2μL。
8.4.2质谱参考条件
电离方式：电喷雾电离，正离子模式（ESI+ ）。
检测方式：多反应监测（MRM）。
毛细管电压：3.5 kV。
干燥气温度：300℃。
干燥气流速：5L/min。
雾化器压力：45 psi。
多反应监测（MRM）离子对、碎裂电压和碰撞能量参考值见表2。
image.png
8.4.3基质匹配标准系列溶液和试样溶液测定
在仪器的最佳条件下，分别取基质匹配标准系列溶液和试样溶液上机测定。基质匹配标准溶液多反应监测色谱图见附录A。
8.4.4 定性
在相同试验条件下，试样溶液与基质匹配标准系列溶液中待测物的保留时间相对偏差在±2.5%以内，且试样谱图中二羟丙茶碱定性离子的相对离子丰度与浓度接近的标准系列溶液中对应的定性离子相对离子丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定为试样中存在对应的待测物。
image.png
8.4.5定量
分别取适量试样溶液和基质匹配标准系列溶液，以浓度为横坐标、色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，标准山线的相关系数应不低于0.99。试样溶液与基质匹配标准溶液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，如超出线性范围，应重新试验或将试样溶液和基质匹配标准溶液用0.2%甲酸溶液稀释后重新测定。单点校准定量时，试样溶液中待测物的浓度与基质匹配标准溶液浓度相差不超过30%。
9试验数据处理
试样中二羟丙茶碱的含量以质量分数计。标准曲线校准按公式（1）计算；单点校准按公式（2）计算。
image.png
式中：
ω——试样中二羟丙茶碱含量的数值，单位为毫克/千克（mg/kg）；
ρ——由标准曲线得到的试样溶液中二羟丙茶碱质量浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V——最终定容体积的数值，单位为毫升（mL）；
n——稀释倍数；
m——试样质量的数值， 单位为克（g）；
A——试样溶液中二羟丙茶碱的色谱峰面积；
CS——基质匹配标准溶液中二羟丙茶碱质量浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
AS——基质匹配标准溶液中二羟丙茶碱的色谱峰面积。
测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。
10 精密度
在重复性条件下，2次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的20%。
农业农村部公告第627号-2-2022
饲料中二羟丙茶碱的测定 液相色谱-串联质谱法
Determination of diprophylline in feeds-
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
（转载：https://t.cn/A6WpCx8y）
1范围
本文件规定了饲料中二羟丙茶碱的液相色谱-串联质谱测定方法。
本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中二羟丙茶碱的测定。
本文件的检出限为0.01 mg/kg，定量限为0.05 mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 20195动物饲料、试样的制备
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义
4原理
试样中的二羟丙茶碱用酸溶被提取，经固相萃取柱净化，用液相色谱-串联质谱仪测定，基质匹配标准溶液校准，外标法定量。
5试剂或材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂。
5.1 水：GB/T 6682，一级。
5.2甲醇：色谱纯。
5.3甲酸：色谱纯。
5.4乙酸铵：色谱纯。
5.5 25%甲醇溶液：取甲醇250 mL，加水稀释至1L，混匀。
5.6 0.2%甲酸溶液：取甲酸2mL加水稀释至上1L，混匀。
5.7乙酸铵溶液（200mmol/L）：称取乙酸铵3.1g加水溶解并稀释至200mL，混匀。
5.8乙酸铵-甲酸溶液：移取乙酸铵溶液（5.7）12.5 mL和甲酸1 mL，加水定容至500 mL，混匀。
5.9标准储备溶液（1mg/mL）：准确称取二羟丙茶碱标准品（CAS号：479-18-5，纯度不低于98%）50 mg（精确至0.01 mg）于50 mL容量瓶中，用25%甲醇溶液（5.5）溶解定容。于2℃~8℃保存，有效期为3个月。
5.10标准中间溶液（10μg/mL）：准确移取二羟丙茶碱标准储备溶液（5.9）1 mL于100 mL容量瓶中，用甲醇（5.2）稀释至刻度，混匀。于2℃~8℃保存，有效期为1个月。
5.11 固相萃取柱：混合型阳离子交换柱，60 mg/3 mL，或性能相当者。
5.12 微孔滤膜：0.22μm，水系。
6仪器设备
6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。
6.2分析天平：感量0.1 mg和0.01 mg。
6.3离心机：转速不低于 8 000 r/min。
6.4往复式振荡器。
6.5固相萃取装置。
6.6涡旋混合器。
6.7氮吹仪。
7样品
按GB/T 20195的规定制备试样，至少200g，粉碎后通过0.425mm孔筛，充分混匀，装入容器，密闭保存，备用。选取类型相同，均匀一致、且在待测物保留时间处，仪器响应值小于方法定量限30%的饲料样品，作为空白试样。
8试验步骤
8.1提取
平行做2份试验。称取试样2 g（精确至0.000 1 g），于50 mL离心管中，准确加入20 mL 0.2%甲酸溶液（5.6），播匀，振荡20 min，以8 000 r/min离心5 min， 移取上清液作为备用液。
8.2 净化
8.2. 1配合饲料、浓缩饲料和精料补充料：将固相萃取柱依次用3 mL甲醇（5.2）、3 mL水活化。准确移取5mI备用液（8.1）过柱，用3mL水淋洗，抽干，再用3mL甲醇（5.2）洗脱，收集洗脱液，于50℃氮吹至干，准确加入1 mL 0.2%甲酸溶液（5.6）溶解，涡旋混匀，过0.22μm微孔滤膜（5.12），备用。
8.2.2添加剂预混合饲料：取适量备用液（8.1）过0.22μm微孔滤膜（5.12）2次，备用。
8.3基质匹配标准系列溶液的制备
取空白试样，按8.1和8.2处理得到空白基质溶液，取适量标准中间溶液（5.10），用甲醇配制成浓度分别为2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0 ngmL、100.0 ng/mL、200.0 ng/mL、 500.0 ng/mL的标准系列溶液，各取1mL于50℃氦吹至干，准确加入1mL空白基质溶液，涡旋混匀，待测。
8.4 测定
8.4.1液相色谱参考条件
色谱柱：C18柱，柱长50mm，内径2.1mm，粒径1.8μm，或性能相当者。
流动相A：甲醇（5.2）；流动相B：乙酸铵-甲酸溶液（5.8）。梯度洗脱条件见表1。
image.png
流速：0.3 mL/min。
柱温：30℃。
进样量：2μL。
8.4.2质谱参考条件
电离方式：电喷雾电离，正离子模式（ESI+ ）。
检测方式：多反应监测（MRM）。
毛细管电压：3.5 kV。
干燥气温度：300℃。
干燥气流速：5L/min。
雾化器压力：45 psi。
多反应监测（MRM）离子对、碎裂电压和碰撞能量参考值见表2。
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8.4.3基质匹配标准系列溶液和试样溶液测定
在仪器的最佳条件下，分别取基质匹配标准系列溶液和试样溶液上机测定。基质匹配标准溶液多反应监测色谱图见附录A。
8.4.4 定性
在相同试验条件下，试样溶液与基质匹配标准系列溶液中待测物的保留时间相对偏差在±2.5%以内，且试样谱图中二羟丙茶碱定性离子的相对离子丰度与浓度接近的标准系列溶液中对应的定性离子相对离子丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定为试样中存在对应的待测物。
image.png
8.4.5定量
分别取适量试样溶液和基质匹配标准系列溶液，以浓度为横坐标、色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，标准山线的相关系数应不低于0.99。试样溶液与基质匹配标准溶液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内，如超出线性范围，应重新试验或将试样溶液和基质匹配标准溶液用0.2%甲酸溶液稀释后重新测定。单点校准定量时，试样溶液中待测物的浓度与基质匹配标准溶液浓度相差不超过30%。
9试验数据处理
试样中二羟丙茶碱的含量以质量分数计。标准曲线校准按公式（1）计算；单点校准按公式（2）计算。
image.png
式中：
ω——试样中二羟丙茶碱含量的数值，单位为毫克/千克（mg/kg）；
ρ——由标准曲线得到的试样溶液中二羟丙茶碱质量浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V——最终定容体积的数值，单位为毫升（mL）；
n——稀释倍数；
m——试样质量的数值， 单位为克（g）；
A——试样溶液中二羟丙茶碱的色谱峰面积；
CS——基质匹配标准溶液中二羟丙茶碱质量浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
AS——基质匹配标准溶液中二羟丙茶碱的色谱峰面积。
测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。
10 精密度
在重复性条件下，2次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的20%。
#科学与中国# 兰花在植物分类学上属兰科植物，是单子叶植物中最大的族群之一。它们广泛分布于各种陆地生态系统中，在全球已被鉴定出近3万种，是最受关注的重点保护类群，均被列入《濒危物种国际贸易公约》之中。
作为世界种类最丰富的家族之一的兰花，是多年生地生、附生或较少为腐生的草本植物。地生和腐生的兰花种类常有块茎或肥厚的根状茎；附生种类的兰花常有由茎的一部分膨大而成的肉质假鳞茎。它们可成功地在地面上、树上、石头上栖息，展现奇异多样的生长姿态。
兰科是古老的大家族，伟大的达尔文曾说“兰花是我这辈子遇见的最好玩的东西” 。他们使尽浑身解数，把自己长成一幅天然的艺术品，呈现出独特形态：如花朵长得像动物、花瓣特化为唇瓣、雌雄蕊合生为蕊柱、花粉粒粘合成花粉团、种子量多细小无胚乳等等。
今天我们就一起来看看几种有趣的“兰朋友”。
带着兜兜的兜兰
被称为“仙履兰”、“拖鞋兰”的兜兰是兰科兜兰属（Paphiopedilum）植物的统称，因其独特的观赏价值备受人们喜爱。它们花朵硕大、花型奇特，因唇瓣形状而得名。唇瓣形的花瓣像一个大口袋，呈兜状，酷似旧时欧洲淑女的拖鞋。兜兰的两枚可育雄蕊着生于蕊柱两侧，背萼特别发达，呈扁圆形或倒心形，具有艳丽的花纹，在各瓣中最为突出。
兜兰里的“金童玉女”
兜兰家族中的杏黄兜兰（Paphiopedilum armeniacum）和硬叶兜兰（Paphiopedilum micranthum）被称为兰科届的“金童玉女”，都是我国特有植物。杏黄兜兰整个花朵为金黄色，绚丽夺目，被称为“金童”；硬叶兜兰的花瓣通常呈现粉红色，明媚照人，被誉为世界上最美的花朵之一，有“玉女”之称。
杏黄兜兰的叶子有美丽的斑纹，唇瓣犹如布兜口袋，花大色雅，含苞时呈青绿色，初开为绿黄色，全开时为杏黄色，后期金黄色，在阳光下闪耀出一片金辉。杏黄兜兰以其非常罕见的杏黄花色，填补了兜兰黄色花系的空白，辨识度特别高，堪称兜兰中的上品，具有很高的观赏价值。
20世纪80年代，由于滥挖滥采和走私出境猖獗，加上生态环境破坏、产地范围小、原生种群小等原因，杏黄兜兰到了灭绝的边缘。现在它是国家一级保护的珍稀濒危野生植物，具有“兰花大熊猫”之称。
硬叶兜兰又叫小花兜兰，是我国著名植物分类学家唐进教授和汪发缵教授于1951年发表的一个新种，由于当时依据的模式标本是一株未开花的植株，因而取名“小花兜兰”。
硬叶兜兰植株小巧，叶片上镶嵌有深浅不一的绿色网格斑，但花朵并不小。三月到五月开花时，花着生在直立花茎上，囊状的唇瓣呈粉红色，若面泛桃花、不胜娇羞的少女，深红色的花瓣基部有浅绿色条纹，整体轻盈飘逸，超凡脱俗，因而有“玉女”之称。
硬叶兜兰常生长在石灰岩山坡上的草丛中、石壁上的缝隙里和山石上的积土中，因野生数量少和环境破坏等多方面原因，现被列为国家二级保护植物。
叶片像大象耳朵的象耳蝴蝶兰
象耳蝴蝶兰（Phalaenopsis gigantea）是兰科蝴蝶兰属的附生草本兰花，因其叶片灰绿色，厚且巨大，呈下垂状，非常像大象的耳朵，而被称为“象耳兰”。它在原产地被发现后，就遭到了人类的滥采而越来越少，野生植株在原生环境中已难以寻觅，被列入濒危野生动植物种国际贸易公约附录中，禁止野生苗买卖。
它原产于婆罗洲、爪哇、苏门达腊、沙巴等低海拔森林树干上，在原生地可长达1米、宽达50厘米，是名符其实的“巨无霸型”蝴蝶兰，故被称为“蝴蝶兰之王”，是目前全球已知体型最大的原生种蝴蝶兰。
象耳兰极其娇贵，完全不像“象耳”这个名字一样“皮糙肉厚”。相较于普通蝴蝶兰品种，象耳蝴蝶兰对温度、光照强度、湿度等环境因素更加敏感，抗病菌能力较弱，照料稍有怠慢，就可能一命呜呼。
象耳兰生长非常缓慢，据科学家研究发现，其从种子到成熟的瓶苗需要1年半至2年的时间，再到长成开花又至少需要10年的时间。象耳兰的花期在夏秋季，单朵花的花期约为15天。开花时花朵小巧玲珑，花瓣和花萼像鸭蛋一样滚圆，有许多深褐色或红棕色的斑点，底色为乳白色或浅黄色。
“这是兰花？”——烟火柏拉索兰
烟火柏拉索兰（Brassavola cucullata）是兰科柏拉索兰属的附生兰花，原产于西印度群岛以及墨西哥委内瑞拉，附生于海拔1800米以下的热带雨林中的树干或岩石上。
看到过烟火柏拉索兰的人们总会发出“这是兰花？”的惊讶感叹。它非常瘦长，但能开出绚丽的大花，整体呈下垂状，特别适合长在山上或倒挂着。它的植株通常高约40厘米，叶子为圆柱形，像铅笔一样笔直下垂，且非常薄。花朵绽放时，花色一般为白色，其独特之处在于流苏般的唇瓣和长而锥形的尖端，也呈下垂状。由于变异或基因的影响，也有黄色或微红色的花朵。
烟火柏拉索兰喜温暖和阳光充足的环境，夏季开花，夜间会散发出浓烈的麝香肥皂味道。这股强烈的味道可不是为了吸引人们，而是为了招引飞虫为它授粉。据说，这股气味可以弥漫到附近500米的空间。为了适应环境、繁衍生息，烟火柏拉索兰用尽技能，俨然一幅天然艺术品。
兰花以奇特的造型、精巧的结构、极高的物种多样性，成为世界重要花卉，让全世界的植物爱好者、科研工作者、艺术家都为之着迷。一种植物就是一座基因库。期望在大家的共同努力下，这些有趣的“兰朋友”能够在生物多样性保护中熠熠生辉。
图1 长距彗星兰 图2 虎斑兜兰 图3 杏黄兜兰 图4 硬叶兜兰 图5 象耳蝴蝶兰的叶 图6 开花时的象耳蝴蝶兰 图7 烟火柏拉库索兰的花 图8 烟火柏拉库索兰的植株
作为世界种类最丰富的家族之一的兰花，是多年生地生、附生或较少为腐生的草本植物。地生和腐生的兰花种类常有块茎或肥厚的根状茎；附生种类的兰花常有由茎的一部分膨大而成的肉质假鳞茎。它们可成功地在地面上、树上、石头上栖息，展现奇异多样的生长姿态。
兰科是古老的大家族，伟大的达尔文曾说“兰花是我这辈子遇见的最好玩的东西” 。他们使尽浑身解数，把自己长成一幅天然的艺术品，呈现出独特形态：如花朵长得像动物、花瓣特化为唇瓣、雌雄蕊合生为蕊柱、花粉粒粘合成花粉团、种子量多细小无胚乳等等。
今天我们就一起来看看几种有趣的“兰朋友”。
带着兜兜的兜兰
被称为“仙履兰”、“拖鞋兰”的兜兰是兰科兜兰属（Paphiopedilum）植物的统称，因其独特的观赏价值备受人们喜爱。它们花朵硕大、花型奇特，因唇瓣形状而得名。唇瓣形的花瓣像一个大口袋，呈兜状，酷似旧时欧洲淑女的拖鞋。兜兰的两枚可育雄蕊着生于蕊柱两侧，背萼特别发达，呈扁圆形或倒心形，具有艳丽的花纹，在各瓣中最为突出。
兜兰里的“金童玉女”
兜兰家族中的杏黄兜兰（Paphiopedilum armeniacum）和硬叶兜兰（Paphiopedilum micranthum）被称为兰科届的“金童玉女”，都是我国特有植物。杏黄兜兰整个花朵为金黄色，绚丽夺目，被称为“金童”；硬叶兜兰的花瓣通常呈现粉红色，明媚照人，被誉为世界上最美的花朵之一，有“玉女”之称。
杏黄兜兰的叶子有美丽的斑纹，唇瓣犹如布兜口袋，花大色雅，含苞时呈青绿色，初开为绿黄色，全开时为杏黄色，后期金黄色，在阳光下闪耀出一片金辉。杏黄兜兰以其非常罕见的杏黄花色，填补了兜兰黄色花系的空白，辨识度特别高，堪称兜兰中的上品，具有很高的观赏价值。
20世纪80年代，由于滥挖滥采和走私出境猖獗，加上生态环境破坏、产地范围小、原生种群小等原因，杏黄兜兰到了灭绝的边缘。现在它是国家一级保护的珍稀濒危野生植物，具有“兰花大熊猫”之称。
硬叶兜兰又叫小花兜兰，是我国著名植物分类学家唐进教授和汪发缵教授于1951年发表的一个新种，由于当时依据的模式标本是一株未开花的植株，因而取名“小花兜兰”。
硬叶兜兰植株小巧，叶片上镶嵌有深浅不一的绿色网格斑，但花朵并不小。三月到五月开花时，花着生在直立花茎上，囊状的唇瓣呈粉红色，若面泛桃花、不胜娇羞的少女，深红色的花瓣基部有浅绿色条纹，整体轻盈飘逸，超凡脱俗，因而有“玉女”之称。
硬叶兜兰常生长在石灰岩山坡上的草丛中、石壁上的缝隙里和山石上的积土中，因野生数量少和环境破坏等多方面原因，现被列为国家二级保护植物。
叶片像大象耳朵的象耳蝴蝶兰
象耳蝴蝶兰（Phalaenopsis gigantea）是兰科蝴蝶兰属的附生草本兰花，因其叶片灰绿色，厚且巨大，呈下垂状，非常像大象的耳朵，而被称为“象耳兰”。它在原产地被发现后，就遭到了人类的滥采而越来越少，野生植株在原生环境中已难以寻觅，被列入濒危野生动植物种国际贸易公约附录中，禁止野生苗买卖。
它原产于婆罗洲、爪哇、苏门达腊、沙巴等低海拔森林树干上，在原生地可长达1米、宽达50厘米，是名符其实的“巨无霸型”蝴蝶兰，故被称为“蝴蝶兰之王”，是目前全球已知体型最大的原生种蝴蝶兰。
象耳兰极其娇贵，完全不像“象耳”这个名字一样“皮糙肉厚”。相较于普通蝴蝶兰品种，象耳蝴蝶兰对温度、光照强度、湿度等环境因素更加敏感，抗病菌能力较弱，照料稍有怠慢，就可能一命呜呼。
象耳兰生长非常缓慢，据科学家研究发现，其从种子到成熟的瓶苗需要1年半至2年的时间，再到长成开花又至少需要10年的时间。象耳兰的花期在夏秋季，单朵花的花期约为15天。开花时花朵小巧玲珑，花瓣和花萼像鸭蛋一样滚圆，有许多深褐色或红棕色的斑点，底色为乳白色或浅黄色。
“这是兰花？”——烟火柏拉索兰
烟火柏拉索兰（Brassavola cucullata）是兰科柏拉索兰属的附生兰花，原产于西印度群岛以及墨西哥委内瑞拉，附生于海拔1800米以下的热带雨林中的树干或岩石上。
看到过烟火柏拉索兰的人们总会发出“这是兰花？”的惊讶感叹。它非常瘦长，但能开出绚丽的大花，整体呈下垂状，特别适合长在山上或倒挂着。它的植株通常高约40厘米，叶子为圆柱形，像铅笔一样笔直下垂，且非常薄。花朵绽放时，花色一般为白色，其独特之处在于流苏般的唇瓣和长而锥形的尖端，也呈下垂状。由于变异或基因的影响，也有黄色或微红色的花朵。
烟火柏拉索兰喜温暖和阳光充足的环境，夏季开花，夜间会散发出浓烈的麝香肥皂味道。这股强烈的味道可不是为了吸引人们，而是为了招引飞虫为它授粉。据说，这股气味可以弥漫到附近500米的空间。为了适应环境、繁衍生息，烟火柏拉索兰用尽技能，俨然一幅天然艺术品。
兰花以奇特的造型、精巧的结构、极高的物种多样性，成为世界重要花卉，让全世界的植物爱好者、科研工作者、艺术家都为之着迷。一种植物就是一座基因库。期望在大家的共同努力下，这些有趣的“兰朋友”能够在生物多样性保护中熠熠生辉。
图1 长距彗星兰 图2 虎斑兜兰 图3 杏黄兜兰 图4 硬叶兜兰 图5 象耳蝴蝶兰的叶 图6 开花时的象耳蝴蝶兰 图7 烟火柏拉库索兰的花 图8 烟火柏拉库索兰的植株
昨晚又没睡着，今天早6点就勉强起床了，因要赶今早7：30分的火车去宁波。虽住在火车站附近，还是怕赶不上火车，6点40就出发了，不到7点就到候车大厅了[允悲]火车但是晚点了 10多分钟[允悲]
9点05分火车正点到达宁波站，就赶往在附近搜到的一家酒店，非常不满意，老板就开始降价并想强迫我们住下，我们不敢盘缠，迅速离开，最后在附近又找到了一家连锁酒店，虽贵点但设施服务都很让人满意，直接定了2天，开局还是挺顺的！[笑cry]
先到了天一阁博物馆，因今天周一上午闭馆不开放，下午1：30才开放，只好先在附近找午饭吃。绕来绕去经打听绕到了景区图上标的古色古香建筑里的饮食区，结果看不到人也找不到吃的，只好出来转到大街上找，也看不到几家饭馆，突然想到网上说的城隍庙步行街上的地方小吃多，是吃饭的好去处，就赶紧乘地铁到了城隍庙，刚进入口，就看到旁边一家挺大的饭馆外面的广告上的菜品套餐挺实惠也挺合我们口味，就坐下点了。菜的份量味道还不错！比我们昨天在绍兴吃的便宜还好吃[赞]
饭后顺便参观了城隍庙，规模非常壮观精美！
赶到天一阁时正好开馆，30元门票。藏书楼、园林错落有致，古木参天，书香气四溢，环境幽雅，建筑古朴，园林精美是国家一级博物馆。
9点05分火车正点到达宁波站，就赶往在附近搜到的一家酒店，非常不满意，老板就开始降价并想强迫我们住下，我们不敢盘缠，迅速离开，最后在附近又找到了一家连锁酒店，虽贵点但设施服务都很让人满意，直接定了2天，开局还是挺顺的！[笑cry]
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