中华人民共和国国家标准
农业部2483号公告-6-2016 饲料中金刚烷胺和金刚乙胺的测定 液相色谱-串联质谱法
Determination of amantadine and rimantadine in feeds-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
（转载自：https://t.cn/A6p3u2Al）
前言
本标准按照GB/T 1. 1-2009给出的规则起草。
本标准由农业部畜牧业司提出。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC 76）归口。
本标准起草单位：中国农业科学院衣业质量标准与检测技术研究所。
本标准主要起草人：邱静、李丹.贾琪、范理。
1范围
本标准规定了饲料中金刚烷胺和金刚乙胺含量测定的液相色谱-串联质谱法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中金刚烷胺和金刚乙胺的测定。
本标准方法的检出限为1.0 μg/ kg，定量限为2.0 μg/ kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1饲料采样
GB/T 20195动物饲料 试样的制备
3方法原理
试料中的金刚烷胺和金刚乙胺用酸化乙腈提取，固相萃取净化，液相色谱-串联质谱正离子模式测定，同位素内标法定量。
4试剂与材料
除另有说明，所有试剂均为分析纯和符合GB/T 6682 中规定的一级水。试验中所用制剂按GB/ T 603的规定制备。
4.1 甲醇：色谱纯。
4.2 乙腈：色谱纯。
4.3冰乙酸。
4.4 甲酸：色谱纯。
4.5 盐酸。
4.6 氨水。
4.7 1%乙酸乙腈溶液：取冰乙酸（4.3）10 mL，用乙腈（4.2）溶解并稀释至1 000 mL。
4.8 0.1%甲酸水溶液：取1 000mL水，加入1 mL甲酸（4. 4）。
4.9 2%盐酸水溶液：取2mL盐酸（4.5），用水溶解并稀释至100mL。
4.10 5%氨水甲醇溶液：取5mL氨水（4.6），用甲醇（4.1）溶解并稀释至100mL。
4.11 50%乙腈水溶液：取50 mL乙腈（4.2），用水溶解并稀释至100 mL。
4.12金刚烷胺标准品：含量≥98.0%。
4.13 D15-金刚烷胺标准品：含量≥99.0%。
4. 14金刚乙胺标准品：含量≥98.0%。
4.15 D4-金刚乙胺标准品：含量≥99.0%。
4.16金刚烷胺、D15-金刚烷胺、金刚乙胺、D4-金刚乙胺标准储备溶液：分别称取10.00mg金刚烷胺（4. 12）、D15-金刚烷胺（4.13）、金刚乙胺（4.14）和D4-金刚乙胺（4.15）标准品于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并稀释至刻度，分别配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。-20℃以下保存，有效期为3个月。
4.17金刚烷胺和金刚乙胺混合标准工作溶液：分别量取1.0mg/ml的金刚烷胺、金刚乙胺标准储备溶液（4.16）适量，于100mL容量瓶中用甲醇（4.1）稀释至刻度.配制成金刚烷胺、金刚乙胺浓度为10.0μg/ mL的混合标准工作溶液。2℃~8℃保存，有效期为14d。
4.18 D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺混合内标工作溶液：分别量取1.0 mg/ ml的D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺标准储备溶液（4.16）适量，于100 mL容量瓶中用甲醇（4.1）稀释至刻度，配制成D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺浓度为1.0 μg/ mL的混合内标工作溶液。2℃~8℃保存，有效期为14d。
5仪器和设备
5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。
5.2天平：感量0.01g。
5.3分析天平：感量0.01mg
5.4 振荡器。
5.5涡旋混合器。
5.6固相萃取仪。
5.7高速离心机：转速210000 r/ mil
5.8氮吹仪。
5.9固相萃取柱：混合型阳离子交换固相萃取柱（60 mg，3 mL），或性能相当者。
5. 10微孔滤膜：0. 2μm有机系。
6采样和试样制备
采样按照GR/T 14699.1的规定抽取有代表性的样品，四分法缩减取样。按GB/T 20195的规定制备试样，将饲料样品磨碎。通过0.45mm空筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保有备用。
7分析步骤
7.1 提取
准确称取2g（精确至0.01g）试样至50mL离心管中，加入20μL 1.0μg/mL的混合内标工作溶液（4.18），然后加入10 mL 1%乙酸乙腈溶液（4.7），涡旋1min，于振荡器中室温振荡30 min，10 000 r/min离心10 min，上清液转移至50 mL离心管中，残渣用10 mL 1%乙酸乙腈溶液（4.7）涡旋2 min，10 000r/min离心10 min，上清液合并至50 mL离心管中，待净化[若样品中目标物浓度过高，可从提取液中分取1 mL~2mL，用1%乙酸乙腈溶液（4.7）定容至10mL，混匀后待净化]。
7.2 净化
混合阳离子固相萃取柱先用3mL甲醇（4.1）活化，3mL水平衡，然后将上清液上柱，流速控制在2滴/s~3滴/s，依次用3 mL 2%盐酸水溶液（4.9） 3 mL甲醇（4.1）淋洗，抽干3 min，用5 mI 5%氨水甲醇（4.10）洗脱，收集洗脱液于15 mL离心管中，50℃条件下氮气吹干，1.00 mL 50%乙腈水溶液（4. 11）复溶，涡旋30s后过0.22 μm滤膜到样品瓶中，上机测定。
7.3标准曲线绘制
准确量取适量金刚烷胺和金刚乙胺混合标准工作溶液（4.17）、D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺混合内标工作溶液（4.18），用50%乙腈水溶液（4.11）稀释配制成金刚烷胺和金刚乙胺浓度为2.00 μg/L、4.00 μg/ L、20.0 μg/L、100.0 μg/L、200.0 μg/L、1 000.0 μg/ L，D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺浓度均为20.0μg/L的系列标准工作溶液，供液相色谱-串联质谱测定。分别以金刚烷胺和D15-金刚烷胺、金刚乙胺和D4-金刚乙胺的定量离子质量色谱峰面积之比为纵坐标，对应的标准溶液浓度比为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数。
7.4 测定
7.4. 1液相色谱参考条件
色谱柱：C18，柱长150 mm，内径2.1 mm，粒径3.5 μm；或性能相当者。
流动相：A为0.1%甲酸水溶液（4.8），B为甲醇（4.1）。
流速：0.30 mL/min。
进样量：10 μL。
流动相梯度洗脱程序见表1。
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7.4.2质谱参考条件
离子源：电喷雾离子源。
扫描方式：正离子扫描
检测方式：多反应离子监测（MRM）。
脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适气体。
喷雾电压、碰撞能等参数应优化至最优灵敏度。
监测离子参数情况见表2。
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7.4.3 定性测定
在相同试验条件下，待测物在样品中的保留时间与标准工作溶液中的保留时间偏差在±2.5%之内，并且色谱图中各组分定性离子对的相对丰度，与浓度接近标准工作液中相应定性离子对的相对丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判断为样品中存在对应的待测物。
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7.4.4 定量测定
取试样溶液和标准溶液上机测定，以色谱峰保留时间和离子对定性，分别以金刚烷胺和D15-金刚烷胺金刚乙胺和D4-金刚乙胺的色谱峰面积比做单点或标准曲线校准，用内标法定量。试样溶液中目标物与内标的峰面积比均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱-质谱条件下，金刚烷胺和金刚乙胺标准溶液特征离子的质量色谱图参见附录A。按以上步骤对同一试样进行平行测定。
8结果计算
试样中金刚烷胺或金刚乙胺的含量X，以质量分数表示，单位为微克每千克（μg/ kg） ，按式（1）或式（2）计算。
单点校准：
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或标准曲线校准：
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式中：
Ci——由标准曲线得出的试样溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺浓度，单位为微克每升
（μg/L）；
Cis——试样溶液中相应的D15-金刚烷胺或D4-金刚乙胺浓度，单位为微克每升（μg/L）；
Cs——标准溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺浓度，单位为微克每升（μg/L）；
C’is——标准溶液中相应的D15 -金刚烷胺或D4-金刚乙胺浓度，单位为微克每升（μg/L）；
Ai——试样溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺峰面积；
Ais——试样溶液中相应的D15-金刚烷胺或D4-金刚乙胺峰面积；
As——标准溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺峰面积；
A'is——标准溶液中相应的D15-金刚烷胺或D4 -金刚乙胺峰面积；
V——残余物定容体积，单位为毫升（mL）；
m——供试试样的质量，单位为克（g）；
ρ——提取液稀释倍数；
1 000——换算系数。
测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留3位有效数字。
9重复性
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。
农业部2483号公告-6-2016 饲料中金刚烷胺和金刚乙胺的测定 液相色谱-串联质谱法
Determination of amantadine and rimantadine in feeds-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
（转载自：https://t.cn/A6p3u2Al）
前言
本标准按照GB/T 1. 1-2009给出的规则起草。
本标准由农业部畜牧业司提出。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC 76）归口。
本标准起草单位：中国农业科学院衣业质量标准与检测技术研究所。
本标准主要起草人：邱静、李丹.贾琪、范理。
1范围
本标准规定了饲料中金刚烷胺和金刚乙胺含量测定的液相色谱-串联质谱法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中金刚烷胺和金刚乙胺的测定。
本标准方法的检出限为1.0 μg/ kg，定量限为2.0 μg/ kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1饲料采样
GB/T 20195动物饲料 试样的制备
3方法原理
试料中的金刚烷胺和金刚乙胺用酸化乙腈提取，固相萃取净化，液相色谱-串联质谱正离子模式测定，同位素内标法定量。
4试剂与材料
除另有说明，所有试剂均为分析纯和符合GB/T 6682 中规定的一级水。试验中所用制剂按GB/ T 603的规定制备。
4.1 甲醇：色谱纯。
4.2 乙腈：色谱纯。
4.3冰乙酸。
4.4 甲酸：色谱纯。
4.5 盐酸。
4.6 氨水。
4.7 1%乙酸乙腈溶液：取冰乙酸（4.3）10 mL，用乙腈（4.2）溶解并稀释至1 000 mL。
4.8 0.1%甲酸水溶液：取1 000mL水，加入1 mL甲酸（4. 4）。
4.9 2%盐酸水溶液：取2mL盐酸（4.5），用水溶解并稀释至100mL。
4.10 5%氨水甲醇溶液：取5mL氨水（4.6），用甲醇（4.1）溶解并稀释至100mL。
4.11 50%乙腈水溶液：取50 mL乙腈（4.2），用水溶解并稀释至100 mL。
4.12金刚烷胺标准品：含量≥98.0%。
4.13 D15-金刚烷胺标准品：含量≥99.0%。
4. 14金刚乙胺标准品：含量≥98.0%。
4.15 D4-金刚乙胺标准品：含量≥99.0%。
4.16金刚烷胺、D15-金刚烷胺、金刚乙胺、D4-金刚乙胺标准储备溶液：分别称取10.00mg金刚烷胺（4. 12）、D15-金刚烷胺（4.13）、金刚乙胺（4.14）和D4-金刚乙胺（4.15）标准品于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并稀释至刻度，分别配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。-20℃以下保存，有效期为3个月。
4.17金刚烷胺和金刚乙胺混合标准工作溶液：分别量取1.0mg/ml的金刚烷胺、金刚乙胺标准储备溶液（4.16）适量，于100mL容量瓶中用甲醇（4.1）稀释至刻度.配制成金刚烷胺、金刚乙胺浓度为10.0μg/ mL的混合标准工作溶液。2℃~8℃保存，有效期为14d。
4.18 D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺混合内标工作溶液：分别量取1.0 mg/ ml的D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺标准储备溶液（4.16）适量，于100 mL容量瓶中用甲醇（4.1）稀释至刻度，配制成D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺浓度为1.0 μg/ mL的混合内标工作溶液。2℃~8℃保存，有效期为14d。
5仪器和设备
5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。
5.2天平：感量0.01g。
5.3分析天平：感量0.01mg
5.4 振荡器。
5.5涡旋混合器。
5.6固相萃取仪。
5.7高速离心机：转速210000 r/ mil
5.8氮吹仪。
5.9固相萃取柱：混合型阳离子交换固相萃取柱（60 mg，3 mL），或性能相当者。
5. 10微孔滤膜：0. 2μm有机系。
6采样和试样制备
采样按照GR/T 14699.1的规定抽取有代表性的样品，四分法缩减取样。按GB/T 20195的规定制备试样，将饲料样品磨碎。通过0.45mm空筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保有备用。
7分析步骤
7.1 提取
准确称取2g（精确至0.01g）试样至50mL离心管中，加入20μL 1.0μg/mL的混合内标工作溶液（4.18），然后加入10 mL 1%乙酸乙腈溶液（4.7），涡旋1min，于振荡器中室温振荡30 min，10 000 r/min离心10 min，上清液转移至50 mL离心管中，残渣用10 mL 1%乙酸乙腈溶液（4.7）涡旋2 min，10 000r/min离心10 min，上清液合并至50 mL离心管中，待净化[若样品中目标物浓度过高，可从提取液中分取1 mL~2mL，用1%乙酸乙腈溶液（4.7）定容至10mL，混匀后待净化]。
7.2 净化
混合阳离子固相萃取柱先用3mL甲醇（4.1）活化，3mL水平衡，然后将上清液上柱，流速控制在2滴/s~3滴/s，依次用3 mL 2%盐酸水溶液（4.9） 3 mL甲醇（4.1）淋洗，抽干3 min，用5 mI 5%氨水甲醇（4.10）洗脱，收集洗脱液于15 mL离心管中，50℃条件下氮气吹干，1.00 mL 50%乙腈水溶液（4. 11）复溶，涡旋30s后过0.22 μm滤膜到样品瓶中，上机测定。
7.3标准曲线绘制
准确量取适量金刚烷胺和金刚乙胺混合标准工作溶液（4.17）、D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺混合内标工作溶液（4.18），用50%乙腈水溶液（4.11）稀释配制成金刚烷胺和金刚乙胺浓度为2.00 μg/L、4.00 μg/ L、20.0 μg/L、100.0 μg/L、200.0 μg/L、1 000.0 μg/ L，D15-金刚烷胺和D4-金刚乙胺浓度均为20.0μg/L的系列标准工作溶液，供液相色谱-串联质谱测定。分别以金刚烷胺和D15-金刚烷胺、金刚乙胺和D4-金刚乙胺的定量离子质量色谱峰面积之比为纵坐标，对应的标准溶液浓度比为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数。
7.4 测定
7.4. 1液相色谱参考条件
色谱柱：C18，柱长150 mm，内径2.1 mm，粒径3.5 μm；或性能相当者。
流动相：A为0.1%甲酸水溶液（4.8），B为甲醇（4.1）。
流速：0.30 mL/min。
进样量：10 μL。
流动相梯度洗脱程序见表1。
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7.4.2质谱参考条件
离子源：电喷雾离子源。
扫描方式：正离子扫描
检测方式：多反应离子监测（MRM）。
脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适气体。
喷雾电压、碰撞能等参数应优化至最优灵敏度。
监测离子参数情况见表2。
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7.4.3 定性测定
在相同试验条件下，待测物在样品中的保留时间与标准工作溶液中的保留时间偏差在±2.5%之内，并且色谱图中各组分定性离子对的相对丰度，与浓度接近标准工作液中相应定性离子对的相对丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判断为样品中存在对应的待测物。
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7.4.4 定量测定
取试样溶液和标准溶液上机测定，以色谱峰保留时间和离子对定性，分别以金刚烷胺和D15-金刚烷胺金刚乙胺和D4-金刚乙胺的色谱峰面积比做单点或标准曲线校准，用内标法定量。试样溶液中目标物与内标的峰面积比均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱-质谱条件下，金刚烷胺和金刚乙胺标准溶液特征离子的质量色谱图参见附录A。按以上步骤对同一试样进行平行测定。
8结果计算
试样中金刚烷胺或金刚乙胺的含量X，以质量分数表示，单位为微克每千克（μg/ kg） ，按式（1）或式（2）计算。
单点校准：
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或标准曲线校准：
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式中：
Ci——由标准曲线得出的试样溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺浓度，单位为微克每升
（μg/L）；
Cis——试样溶液中相应的D15-金刚烷胺或D4-金刚乙胺浓度，单位为微克每升（μg/L）；
Cs——标准溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺浓度，单位为微克每升（μg/L）；
C’is——标准溶液中相应的D15 -金刚烷胺或D4-金刚乙胺浓度，单位为微克每升（μg/L）；
Ai——试样溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺峰面积；
Ais——试样溶液中相应的D15-金刚烷胺或D4-金刚乙胺峰面积；
As——标准溶液中相应的金刚烷胺或金刚乙胺峰面积；
A'is——标准溶液中相应的D15-金刚烷胺或D4 -金刚乙胺峰面积；
V——残余物定容体积，单位为毫升（mL）；
m——供试试样的质量，单位为克（g）；
ρ——提取液稀释倍数；
1 000——换算系数。
测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留3位有效数字。
9重复性
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 0162-2011
代替SN 0162-1992
出口水果中甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵、噻菌灵残留量的检测方法
高效液相色谱法
（转载自：https://t.cn/A6pv8dEk）
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的规定起草。
本标准是对SN 0162-1992《出口水果中甲基托布津残留量检验方法》的修订，与
SN 0162-1992相比主要变化如下：
——文本结构不同：SN 0162-1992 按GB/T 1.1-1987编写，本标准按GB/T 1.1-2009 编写；
——检测物质增多：SN 0162-1992 只有甲基硫菌灵，本标准增加了硫菌灵、多菌灵、苯菌灵和噻菌灵；
——检测对象增多：SN 0162- 1992只有柑橘，本标准增加了苹果、梨、桃子和葡萄；
——删除SN 0162-1992的抽样内容（SN 0162-1992“2 抽样和制样”）；
——增加了试样制备与保存（见本标准“6 试样制备与保存”）；
——检测方法不同：SN 0162-1992采用气相色谱法，本标准采用高效液相色谱法；
——增加了测定低限、回收率（见本标准“8测定低限、回收率”）。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准由中华人民共和国湖南出入境检验检疫局负责起草。.
本标准主要起草人：王美玲、张莹、黄志强、胡宇东、李拥军、焦艳娜、颜鸿飞。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
——SN 0162-1992。
1范围
本标准规定了出口水果中甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵、噻菌灵残留量的高效液相色谱检测方法和液相色谱-质谱/质谱确证方法。
本标准适用于出口柑橘、苹果、梨、桃子和葡萄中甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵、噻菌灵残留量的测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
用乙腈提取试样中残留的农药，经固相萃取小柱净化后，采用高效液相色谱法检测，外标法定量，液相色谱-质谱/质谱法确证。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的- -级水。
4.1乙腈：液相色谱级。
4.2 甲醇：液相色谱级。
4.3甲苯。
4.4乙酸。
4.5氯化钠。
4.6氢氧化钠。
4.7氢氧化钠溶液（0.5 mol/L） ：称取2.0 g氢氧化钠，用水溶解并定容至100 mL。
4.8 0. 1%乙酸甲醇溶液：取1 mL乙酸，用甲醇稀释并定容至1 000 mL。
4.9 甲苯-乙腈（1+3，体积比）：量取100 mL甲苯，加入300 mL乙腈，混匀。
4.10甲醇-水（1+1，体积比）：量取100 mL甲醇，加入100 mL水，混匀。
4.11标准物质：甲基硫菌灵（thiophanate-methyl，CAS号：23564-05-8）、硫菌灵（thiophanate，CAS号：25564-06-9）、多菌灵（carbendazim，CAS号：10605-21-7）、噻菌灵（thiabendazole，CAS号：148-79-8）。
4.12标准贮备液：分别准确称取适量的上述标准品，用甲醉配制成1.0 mg/mL的标准贮备液。多菌灵需先用少量盐酸溶解后，再用甲醇溶解定容。-18℃下避光保存。
4.13混合标准中间液：分别准确移取1.0mL单个农药的标准贮备液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为100μg/mL的混合标准中间液，-18℃下避光保存。
4.14标准工作溶液；根据需要，临用时吸取一定量的混合标准中间液，用甲醇-水（4.10）稀释配成适当浓度的混合标准工作溶液。
4.15 石墨化碳氨基复合小柱：6 mL，500 mg或相当者。
4.16滤膜；有机系，0. 45μm。
5仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪，配紫外检测器。
5.2 高效液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.3 捣碎机。
5.4 涡旋混匀器。
5.5 离心机（最大转速10000 r/min）。
5.6 固相萃取装置。
5.7旋转蒸发仪。
5.8 氮气吹干仪。
5.9 电子天平：感量为0.0001号和0.01 g。
5.10 塑料离心管：50 mL，具塞。
5.11 尖嘴刻度离心管：5 mL。
6试样制备与保存
6.1试样制备
从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，充分绞碎，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封作为试样，标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
6.2 试样保存
将试样于-18℃保存。
7测定步骤
7.1提取
称取5 g（精确至0.01 g）经捣碎样品于50 mL塑料离心管中，加入3 mL水，于涡旋混匀器上混合：1 min，再加入适量氢氧化钠溶液（4. 7），使试液的pH调至7~8，并加入2.0 g氯化钠，于混匀器上混匀。先用10 mL乙腈提取一次，涡旋混合3 min，以5000 r/min离心2 min。取上层清液于另一25 mL离心管中，残渣再加入10 mL乙腈，重复提取一次，合并上清液。提取液在氮气吹干仪上40℃下浓缩至近1 mL。加入0.5 mL乙酸甲醇溶液（4.8）混匀，准备过柱净化。
7.2 净化
将石墨化碳氨基复合小柱连接到固相萃取装置，用6 mL甲苯-乙腈溶液（4.9）预淋洗后，加入上述提取液（7.1），控制流速为0.5 mL/min，并用20 mL甲苯-乙腈溶液（4. 9）洗脱。收集所有流出液，在旋转蒸发仪上40℃下浓缩至近1 mL后，转移至尖嘴刻度离心管中，并用2 mL乙腈洗涤旋转蒸发瓶2次，合并洗涤液，在氮气吹干仪上40℃下浓缩至近0.5 mL，用甲醇水溶液（4.10）定容至1.0 mL，过0.45μm有机相微孔滤膜后，供高效液相色谱仪测定。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱条件
7.3.1.1 色谱柱：C18柱，250 mm×4.6 mm（内径），粒度5μm，端基封尾或相当者。
7.3.1.2 流动相：梯度洗脱程序见表1。
image.png
7.3. 1.3流速：1.0 mL/min。
7.3.1.4检测波长：276 nm。
7.3.1.5柱温：30℃。
7.3.1.6进样量：20μL。
7.3.2色谱测定
按照上述检测条件测定样液和混合标准工作溶液。以色谱峰面积按外标法定量。在上述色谱条件下待测物的参考保留时间分别为7.03 min（多菌灵）、8.55 min（噻蘭灵）、9.32 min（甲基硫菌灵）、13.32 min（硫菌灵）。标准溶液的液相色谱图参见图A.1。
7.4空白试验.
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。
7.5结果计算和表述
用色谱数据处理机或按照式（1）计算样品中待测物的残留量，计算结果需扣除空白。
image.png
式中：
Xi——试样中某农药组分的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ai——样液中某农药组分的峰面积；
ci——标准工作溶液中某农药组分的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；
Ais——标准工作溶液中某农药组分的峰面积；
m——最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。
注：苯菌灵在分析过程中已分解成多菌灵，故：
a） 当样品只施用苯菌灵农药时，苯菌灵定量结果以多菌灵计；
b） 当样品只施用多菌灵农药时，与多菌灵标液比对可得多菌灵定量结果；
c） 当样品同时施用苯菌灵和多菌灵农药时，苯菌灵+多菌灵合量结果以多菌灵计；
d） 检测甲基硫菌灵、硫菌灵农药残留时，需同时检测多菌灵。
7.6阳性样品的确证
7.6.1确证方法
对于高效液相色谱法检出的阳性样品，用液相色谱-质谱/质谱法进行定性确证。
7.6.2液相色谱 条件
7.6.2.1色谱柱：C18柱，150 mm×4.6 mm（内径） ，粒度5μm，端基封尾或相当者。
7.6.2.2流动相：梯度洗脱程序见表1。
7.6.2.3流速：0. 5mL/ min。
7.6.2.4柱温：30℃。
7.6.2.5进样量：10μL。
7.6.3 质谱条件
7.6.3.1离子源：电喷雾离子源。
7.6.3.2扫描方式：正离子。
7.6.3.3检测方式：多反应监测（MRM）。
7.6.3.4 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件见附录B。
7.6.3.5喷雾电压、去集簇电压、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度，参考条件见附录B。
7.6.4定性确证结果的判定
在相同的实验条件下，样液中被测物的质量色谱峰保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的样液谱图中，所选择的离子对均出现，各定性离子的相对丰度与标准品离子的相对丰度相比，误差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。在上述色谱和质谱条件下，标准溶液的多反应监测色谱图参见图C.1。
image.png
8测定低限、回收率
8.1测定低限
甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵和噻菌灵的测定低限均为0.05mg/kg。
8.2回收率
不同样品基质添加浓度及回收率数据见表3~表7。
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SN/T 0162-2011
代替SN 0162-1992
出口水果中甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵、噻菌灵残留量的检测方法
高效液相色谱法
（转载自：https://t.cn/A6pv8dEk）
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的规定起草。
本标准是对SN 0162-1992《出口水果中甲基托布津残留量检验方法》的修订，与
SN 0162-1992相比主要变化如下：
——文本结构不同：SN 0162-1992 按GB/T 1.1-1987编写，本标准按GB/T 1.1-2009 编写；
——检测物质增多：SN 0162-1992 只有甲基硫菌灵，本标准增加了硫菌灵、多菌灵、苯菌灵和噻菌灵；
——检测对象增多：SN 0162- 1992只有柑橘，本标准增加了苹果、梨、桃子和葡萄；
——删除SN 0162-1992的抽样内容（SN 0162-1992“2 抽样和制样”）；
——增加了试样制备与保存（见本标准“6 试样制备与保存”）；
——检测方法不同：SN 0162-1992采用气相色谱法，本标准采用高效液相色谱法；
——增加了测定低限、回收率（见本标准“8测定低限、回收率”）。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准由中华人民共和国湖南出入境检验检疫局负责起草。.
本标准主要起草人：王美玲、张莹、黄志强、胡宇东、李拥军、焦艳娜、颜鸿飞。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
——SN 0162-1992。
1范围
本标准规定了出口水果中甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵、噻菌灵残留量的高效液相色谱检测方法和液相色谱-质谱/质谱确证方法。
本标准适用于出口柑橘、苹果、梨、桃子和葡萄中甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵、噻菌灵残留量的测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
用乙腈提取试样中残留的农药，经固相萃取小柱净化后，采用高效液相色谱法检测，外标法定量，液相色谱-质谱/质谱法确证。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的- -级水。
4.1乙腈：液相色谱级。
4.2 甲醇：液相色谱级。
4.3甲苯。
4.4乙酸。
4.5氯化钠。
4.6氢氧化钠。
4.7氢氧化钠溶液（0.5 mol/L） ：称取2.0 g氢氧化钠，用水溶解并定容至100 mL。
4.8 0. 1%乙酸甲醇溶液：取1 mL乙酸，用甲醇稀释并定容至1 000 mL。
4.9 甲苯-乙腈（1+3，体积比）：量取100 mL甲苯，加入300 mL乙腈，混匀。
4.10甲醇-水（1+1，体积比）：量取100 mL甲醇，加入100 mL水，混匀。
4.11标准物质：甲基硫菌灵（thiophanate-methyl，CAS号：23564-05-8）、硫菌灵（thiophanate，CAS号：25564-06-9）、多菌灵（carbendazim，CAS号：10605-21-7）、噻菌灵（thiabendazole，CAS号：148-79-8）。
4.12标准贮备液：分别准确称取适量的上述标准品，用甲醉配制成1.0 mg/mL的标准贮备液。多菌灵需先用少量盐酸溶解后，再用甲醇溶解定容。-18℃下避光保存。
4.13混合标准中间液：分别准确移取1.0mL单个农药的标准贮备液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为100μg/mL的混合标准中间液，-18℃下避光保存。
4.14标准工作溶液；根据需要，临用时吸取一定量的混合标准中间液，用甲醇-水（4.10）稀释配成适当浓度的混合标准工作溶液。
4.15 石墨化碳氨基复合小柱：6 mL，500 mg或相当者。
4.16滤膜；有机系，0. 45μm。
5仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪，配紫外检测器。
5.2 高效液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.3 捣碎机。
5.4 涡旋混匀器。
5.5 离心机（最大转速10000 r/min）。
5.6 固相萃取装置。
5.7旋转蒸发仪。
5.8 氮气吹干仪。
5.9 电子天平：感量为0.0001号和0.01 g。
5.10 塑料离心管：50 mL，具塞。
5.11 尖嘴刻度离心管：5 mL。
6试样制备与保存
6.1试样制备
从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，充分绞碎，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封作为试样，标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
6.2 试样保存
将试样于-18℃保存。
7测定步骤
7.1提取
称取5 g（精确至0.01 g）经捣碎样品于50 mL塑料离心管中，加入3 mL水，于涡旋混匀器上混合：1 min，再加入适量氢氧化钠溶液（4. 7），使试液的pH调至7~8，并加入2.0 g氯化钠，于混匀器上混匀。先用10 mL乙腈提取一次，涡旋混合3 min，以5000 r/min离心2 min。取上层清液于另一25 mL离心管中，残渣再加入10 mL乙腈，重复提取一次，合并上清液。提取液在氮气吹干仪上40℃下浓缩至近1 mL。加入0.5 mL乙酸甲醇溶液（4.8）混匀，准备过柱净化。
7.2 净化
将石墨化碳氨基复合小柱连接到固相萃取装置，用6 mL甲苯-乙腈溶液（4.9）预淋洗后，加入上述提取液（7.1），控制流速为0.5 mL/min，并用20 mL甲苯-乙腈溶液（4. 9）洗脱。收集所有流出液，在旋转蒸发仪上40℃下浓缩至近1 mL后，转移至尖嘴刻度离心管中，并用2 mL乙腈洗涤旋转蒸发瓶2次，合并洗涤液，在氮气吹干仪上40℃下浓缩至近0.5 mL，用甲醇水溶液（4.10）定容至1.0 mL，过0.45μm有机相微孔滤膜后，供高效液相色谱仪测定。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱条件
7.3.1.1 色谱柱：C18柱，250 mm×4.6 mm（内径），粒度5μm，端基封尾或相当者。
7.3.1.2 流动相：梯度洗脱程序见表1。
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7.3. 1.3流速：1.0 mL/min。
7.3.1.4检测波长：276 nm。
7.3.1.5柱温：30℃。
7.3.1.6进样量：20μL。
7.3.2色谱测定
按照上述检测条件测定样液和混合标准工作溶液。以色谱峰面积按外标法定量。在上述色谱条件下待测物的参考保留时间分别为7.03 min（多菌灵）、8.55 min（噻蘭灵）、9.32 min（甲基硫菌灵）、13.32 min（硫菌灵）。标准溶液的液相色谱图参见图A.1。
7.4空白试验.
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。
7.5结果计算和表述
用色谱数据处理机或按照式（1）计算样品中待测物的残留量，计算结果需扣除空白。
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式中：
Xi——试样中某农药组分的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ai——样液中某农药组分的峰面积；
ci——标准工作溶液中某农药组分的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；
Ais——标准工作溶液中某农药组分的峰面积；
m——最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。
注：苯菌灵在分析过程中已分解成多菌灵，故：
a） 当样品只施用苯菌灵农药时，苯菌灵定量结果以多菌灵计；
b） 当样品只施用多菌灵农药时，与多菌灵标液比对可得多菌灵定量结果；
c） 当样品同时施用苯菌灵和多菌灵农药时，苯菌灵+多菌灵合量结果以多菌灵计；
d） 检测甲基硫菌灵、硫菌灵农药残留时，需同时检测多菌灵。
7.6阳性样品的确证
7.6.1确证方法
对于高效液相色谱法检出的阳性样品，用液相色谱-质谱/质谱法进行定性确证。
7.6.2液相色谱 条件
7.6.2.1色谱柱：C18柱，150 mm×4.6 mm（内径） ，粒度5μm，端基封尾或相当者。
7.6.2.2流动相：梯度洗脱程序见表1。
7.6.2.3流速：0. 5mL/ min。
7.6.2.4柱温：30℃。
7.6.2.5进样量：10μL。
7.6.3 质谱条件
7.6.3.1离子源：电喷雾离子源。
7.6.3.2扫描方式：正离子。
7.6.3.3检测方式：多反应监测（MRM）。
7.6.3.4 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件见附录B。
7.6.3.5喷雾电压、去集簇电压、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度，参考条件见附录B。
7.6.4定性确证结果的判定
在相同的实验条件下，样液中被测物的质量色谱峰保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的样液谱图中，所选择的离子对均出现，各定性离子的相对丰度与标准品离子的相对丰度相比，误差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。在上述色谱和质谱条件下，标准溶液的多反应监测色谱图参见图C.1。
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8测定低限、回收率
8.1测定低限
甲基硫菌灵、硫菌灵、多菌灵、苯菌灵和噻菌灵的测定低限均为0.05mg/kg。
8.2回收率
不同样品基质添加浓度及回收率数据见表3~表7。
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中华人民共和国国家标准
GB 31656.17-2022 食品安全国家标准
水产品中二硫氰基甲烷残留量的测定 气相色谱法
（转载自：https://t.cn/A6NgRPb3）
1范围
本文件规定了水产品中二硫氰基甲烷残留量测定的制样和气相色谱测定方法。
本文件适用于鱼、虾、蟹、鳖等水产品可食组织中二硫氰基甲烷残留量的测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注明的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 30891-2014 水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中残留的二硫氰基甲烷，用二氯甲烷和正己烷混合液提取，去脂，中性氧化铝固相萃取柱净化，气相色谱测定，外标法定量。
5试剂与材料
除另有规定外，所有试剂的为分析纯水为符合GB/T 6682规定的一级水。
5.1试剂
5.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。
5.1.2甲醇（CH3ON）：色谱纯。
5.1.3 正己烷（C6H14）：色谱纯。
5.1.4 二氯甲烷（CH2Cl2）：色谱纯。
5.1.5 丙酮（CH3COCH3）：色谱纯。
5.1.6无水硫酸钠（Na2SO4）。
5.2 溶液配制
二氯甲烷-正已烷（1：1，V/V）：分别取二氯甲烷和正己烷250 mL，混匀。现用现配。
5.3 标准品
二硫氰基甲烷（Methylene bisthiocyanate，C3H2N2S2 ，CAS号：6317-18-6），含量≥99%。
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：准确称取二硫氰基甲烷标准品10 mg，用乙腈适量使溶解并稀释定容至50mL棕色容量瓶，配制成浓度为200μg/mL的标准储备液。-18℃以下保存，有效期3个月。
5.4.2 标准工作液：精确量取二硫氰基甲烷标准储备液适量，用二氯甲烷稀释，配制成浓度为0. 05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL和10.0μg/mL的系列标准工作液。现用现配。
5.5 材料
中性氧化铝固相萃取柱，填料60 mg/3 mL，或相当者。
6仪器和设备
6. 1气相色谱仪， 配脉冲式火焰光度（FPD）检测器。
6.2均质机。
6.3旋转蒸发仪。
6.4 离心机。
6.5涡旋混合器。
6.6分析天平：感量0.00001 g和0.01 g。
6.7氮吹仪。
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
按GB/T 30891-2014附录B的要求制样。
a） 取均质后的供试样品，作为供试试料；
b） 取均质后的空白样 品，作为空白试料；
c） 取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
7.2 试样的保存
-18℃以下冷冻保存。
8测定步骤
8.1 提取
取试料5 g（准确至±0.05 g），置于50 mL具塞玻璃离心管中，加二氯甲烷-正己烷（1：1，V/V）15mL，立即涡旋1min，超声提取10min，4000r/min离心5min，用玻璃胶头滴管取上清液于鸡心瓶中，重复提取1次，合并2次上清液，混匀，40℃氮气吹至0.5 mL~1.0 mL，备用。
8.2净化和浓缩
取中性氧化铝固相萃取柱，上层添加无水硫酸钠1.0 g，将备用液过柱并收集，用二氯甲烷-正己烷（1：1，V/V） 2.0 mL洗涤8.1盛装提取液的鸡心瓶，过柱，并收集在15 mL玻璃试管中，再用二氯甲烷8 mL洗脱小柱，且收集在同一玻璃试管中，40℃氮气吹干，加二氯甲烷-正己烷（1：1，V/V）1.0 mL，涡旋1 min使其完全溶解，供气相色谱仪测定。
8.3标准曲线的制备
精密量取系列标准工作液适量，供气相色谱测定。以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
8.4 测定
8.4.1 色谱条件
a） 色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱（30m×0.32mm，粒径0.25μm），或相当者；
b） 进样方式：不分流进样；
c） 载气：氮气，纯度99.999%；
d） 柱流速：1.0 mL/min；
e） 进样口温度230℃，检测器温度310℃；
f） 柱温程序：初始柱温50℃，保持1 min，以25℃/min升温至180℃，保持2 min；
g） 进样量：1.0μL。
8.4.2测定法
取试料溶液和相应的标准溶液，作单点或多点校准，按外标法，以峰面积计算。标准溶液及试料溶液中二硫氰基甲烷响应值应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，标准溶液气相色谱图见附录A。
8.4.3空白试验
取空白试料，除不加药物外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
9结果计算和表述
试样中待测物的残留量按标准曲线或公式（1）计算。
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式中：
X——试样中二硫氰基甲烷残留量的数值，单位为微克每千克（μg/kg）；
Cs——标准溶 液中二硫氰基甲烷浓度的数值，单位为微克每升（μg/L）；
A——试样溶液中二硫氰基甲烷的色谱峰面积；
As——标准溶液中二硫氰基甲烷的色谱峰面积；
V——试样最终定容体积的数值，单位为毫升（mL）；
m——供试试样质量的数值，单位为克（g）。
10方法灵敏度、准确度和精密度
10.1 灵敏度
本方法的检测限为5μg/ kg，定量限为10μg/kg。
10.2 准确度
本方法在10μg/kg~500μg/kg添加浓度水平上的回收率为60%~110%。
10.3精密度
本方法批内相对标准偏差≤20% ，批间相对标准偏差≤20%。
GB 31656.17-2022 食品安全国家标准
水产品中二硫氰基甲烷残留量的测定 气相色谱法
（转载自：https://t.cn/A6NgRPb3）
1范围
本文件规定了水产品中二硫氰基甲烷残留量测定的制样和气相色谱测定方法。
本文件适用于鱼、虾、蟹、鳖等水产品可食组织中二硫氰基甲烷残留量的测定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注明的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 30891-2014 水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中残留的二硫氰基甲烷，用二氯甲烷和正己烷混合液提取，去脂，中性氧化铝固相萃取柱净化，气相色谱测定，外标法定量。
5试剂与材料
除另有规定外，所有试剂的为分析纯水为符合GB/T 6682规定的一级水。
5.1试剂
5.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。
5.1.2甲醇（CH3ON）：色谱纯。
5.1.3 正己烷（C6H14）：色谱纯。
5.1.4 二氯甲烷（CH2Cl2）：色谱纯。
5.1.5 丙酮（CH3COCH3）：色谱纯。
5.1.6无水硫酸钠（Na2SO4）。
5.2 溶液配制
二氯甲烷-正已烷（1：1，V/V）：分别取二氯甲烷和正己烷250 mL，混匀。现用现配。
5.3 标准品
二硫氰基甲烷（Methylene bisthiocyanate，C3H2N2S2 ，CAS号：6317-18-6），含量≥99%。
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：准确称取二硫氰基甲烷标准品10 mg，用乙腈适量使溶解并稀释定容至50mL棕色容量瓶，配制成浓度为200μg/mL的标准储备液。-18℃以下保存，有效期3个月。
5.4.2 标准工作液：精确量取二硫氰基甲烷标准储备液适量，用二氯甲烷稀释，配制成浓度为0. 05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL和10.0μg/mL的系列标准工作液。现用现配。
5.5 材料
中性氧化铝固相萃取柱，填料60 mg/3 mL，或相当者。
6仪器和设备
6. 1气相色谱仪， 配脉冲式火焰光度（FPD）检测器。
6.2均质机。
6.3旋转蒸发仪。
6.4 离心机。
6.5涡旋混合器。
6.6分析天平：感量0.00001 g和0.01 g。
6.7氮吹仪。
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
按GB/T 30891-2014附录B的要求制样。
a） 取均质后的供试样品，作为供试试料；
b） 取均质后的空白样 品，作为空白试料；
c） 取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
7.2 试样的保存
-18℃以下冷冻保存。
8测定步骤
8.1 提取
取试料5 g（准确至±0.05 g），置于50 mL具塞玻璃离心管中，加二氯甲烷-正己烷（1：1，V/V）15mL，立即涡旋1min，超声提取10min，4000r/min离心5min，用玻璃胶头滴管取上清液于鸡心瓶中，重复提取1次，合并2次上清液，混匀，40℃氮气吹至0.5 mL~1.0 mL，备用。
8.2净化和浓缩
取中性氧化铝固相萃取柱，上层添加无水硫酸钠1.0 g，将备用液过柱并收集，用二氯甲烷-正己烷（1：1，V/V） 2.0 mL洗涤8.1盛装提取液的鸡心瓶，过柱，并收集在15 mL玻璃试管中，再用二氯甲烷8 mL洗脱小柱，且收集在同一玻璃试管中，40℃氮气吹干，加二氯甲烷-正己烷（1：1，V/V）1.0 mL，涡旋1 min使其完全溶解，供气相色谱仪测定。
8.3标准曲线的制备
精密量取系列标准工作液适量，供气相色谱测定。以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
8.4 测定
8.4.1 色谱条件
a） 色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱（30m×0.32mm，粒径0.25μm），或相当者；
b） 进样方式：不分流进样；
c） 载气：氮气，纯度99.999%；
d） 柱流速：1.0 mL/min；
e） 进样口温度230℃，检测器温度310℃；
f） 柱温程序：初始柱温50℃，保持1 min，以25℃/min升温至180℃，保持2 min；
g） 进样量：1.0μL。
8.4.2测定法
取试料溶液和相应的标准溶液，作单点或多点校准，按外标法，以峰面积计算。标准溶液及试料溶液中二硫氰基甲烷响应值应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，标准溶液气相色谱图见附录A。
8.4.3空白试验
取空白试料，除不加药物外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
9结果计算和表述
试样中待测物的残留量按标准曲线或公式（1）计算。
image.png
式中：
X——试样中二硫氰基甲烷残留量的数值，单位为微克每千克（μg/kg）；
Cs——标准溶 液中二硫氰基甲烷浓度的数值，单位为微克每升（μg/L）；
A——试样溶液中二硫氰基甲烷的色谱峰面积；
As——标准溶液中二硫氰基甲烷的色谱峰面积；
V——试样最终定容体积的数值，单位为毫升（mL）；
m——供试试样质量的数值，单位为克（g）。
10方法灵敏度、准确度和精密度
10.1 灵敏度
本方法的检测限为5μg/ kg，定量限为10μg/kg。
10.2 准确度
本方法在10μg/kg~500μg/kg添加浓度水平上的回收率为60%~110%。
10.3精密度
本方法批内相对标准偏差≤20% ，批间相对标准偏差≤20%。
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