琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量
#生物试剂#
琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量
二．材料与方法
1 材料
RNA样品
2 仪器、用具
电泳仪、电泳槽、凝胶样品梳、微波炉、移液器等
3 试剂
(1) 1×TAE 电泳缓冲液
(2) 溴化乙锭溶液（EB）[有毒，小心操作]
(3) 琼脂糖
(4) 6×加样缓冲液
4 方法
(1) 选择孔径大小适合的点样梳，垂直架在胶版的一端，使点样梳底部离电泳槽水平面的距离为0.5-1mm。
(2) 称取0.25g琼脂糖，加入25ml 1×TAE电泳缓冲液中，微波炉加热使琼脂糖溶解均匀。
(3) 于50ml的离心管中加入1.25μl EB (10mg/ml)。
(4) 待凝胶冷却至50℃左右，将凝胶倒入50ml离心管中。
(5) 将离心管中的凝胶溶液轻轻倒入电泳凝胶板上，除去气泡。
(6) 待凝胶凝固后，小心取出点样梳。
(7) 在电泳槽中加入1×TAE 电泳缓冲液，将胶板放入电泳槽中（点样孔一端靠近电泳槽的负极），使电泳缓冲液没过胶面。
(8) 待测样品中加入1/6体积的6×上样缓冲液，混合后，移液枪点样，记录样品点样顺序及样量。
(9) 连接电泳槽与电泳仪之间的电源线，正极为红色，负极为黑色。
(10) 开启电源，开始电泳，最高电压不超过5V/cm。
(11) 当指示剂跑过胶板的2/3，可终止电泳；切断电源后，将电泳凝胶块放在凝胶成像仪中观察，拍照。
电泳检测：1%琼脂糖凝胶电泳，检测RNA完整性，观察18s、28s条带。
这里，RNA电泳要特别注意胶的浓度和质量。首先，浓度不宜过高，1%-1.2%为宜。其次，每次配胶不宜过多，最好现用现配，但是一次配100ml，3-5次可用完也可。溶胶时一定要溶解彻底并且均匀，否则倒胶时产生气泡，影响电泳效果。晾胶时，要以稍高于体温为佳，温度过高会导致胶体过软，给点样造成困难。倒胶时，注意胶的厚度，原则是宁厚勿薄，胶板过薄点样孔盛放不下点样量，样品溢出导致弥散。胶板如果很厚，一般要晾置20分钟以上，否则胶体晾置不彻底，拔掉梳子会破坏点样孔，同时胶体密度也会变得不均一，影响电泳效果。
对于RNA电泳，电泳液的要求也很高，最好每次都使用新的电泳液，因为RNA极易降解，所以不宜与其他电泳液混用。同时，要注意电泳液的配制，为1×TAE，如果电泳液配制有误则会导致电压不稳，或者电压无法上升。
最后，保证了电泳液和胶体质量以后，就可以进行点样了。点样时，要注意点样量，以3μl为宜，与loading-buffer混匀后要用移液枪将其完全吸取，完全点入点样孔内，不要有溢出，同时点样时力度不宜过大，否则会使枪头捅漏胶板，样品流入电泳液，导致电泳失败。
电泳条件，由于RNA自身易降解的特点，建议使用高电压，短时间电泳方式，130-140v电压，10-15分钟即可。电泳时间长短会影响带型的相对位置，所以不能单纯靠对比Marker来断定。
品科研-生物试剂,化学试剂,科研试剂超市www.pinkeyan.com、4000-685-696
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琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量
二．材料与方法
1 材料
RNA样品
2 仪器、用具
电泳仪、电泳槽、凝胶样品梳、微波炉、移液器等
3 试剂
(1) 1×TAE 电泳缓冲液
(2) 溴化乙锭溶液（EB）[有毒，小心操作]
(3) 琼脂糖
(4) 6×加样缓冲液
4 方法
(1) 选择孔径大小适合的点样梳，垂直架在胶版的一端，使点样梳底部离电泳槽水平面的距离为0.5-1mm。
(2) 称取0.25g琼脂糖，加入25ml 1×TAE电泳缓冲液中，微波炉加热使琼脂糖溶解均匀。
(3) 于50ml的离心管中加入1.25μl EB (10mg/ml)。
(4) 待凝胶冷却至50℃左右，将凝胶倒入50ml离心管中。
(5) 将离心管中的凝胶溶液轻轻倒入电泳凝胶板上，除去气泡。
(6) 待凝胶凝固后，小心取出点样梳。
(7) 在电泳槽中加入1×TAE 电泳缓冲液，将胶板放入电泳槽中（点样孔一端靠近电泳槽的负极），使电泳缓冲液没过胶面。
(8) 待测样品中加入1/6体积的6×上样缓冲液，混合后，移液枪点样，记录样品点样顺序及样量。
(9) 连接电泳槽与电泳仪之间的电源线，正极为红色，负极为黑色。
(10) 开启电源，开始电泳，最高电压不超过5V/cm。
(11) 当指示剂跑过胶板的2/3，可终止电泳；切断电源后，将电泳凝胶块放在凝胶成像仪中观察，拍照。
电泳检测：1%琼脂糖凝胶电泳，检测RNA完整性，观察18s、28s条带。
这里，RNA电泳要特别注意胶的浓度和质量。首先，浓度不宜过高，1%-1.2%为宜。其次，每次配胶不宜过多，最好现用现配，但是一次配100ml，3-5次可用完也可。溶胶时一定要溶解彻底并且均匀，否则倒胶时产生气泡，影响电泳效果。晾胶时，要以稍高于体温为佳，温度过高会导致胶体过软，给点样造成困难。倒胶时，注意胶的厚度，原则是宁厚勿薄，胶板过薄点样孔盛放不下点样量，样品溢出导致弥散。胶板如果很厚，一般要晾置20分钟以上，否则胶体晾置不彻底，拔掉梳子会破坏点样孔，同时胶体密度也会变得不均一，影响电泳效果。
对于RNA电泳，电泳液的要求也很高，最好每次都使用新的电泳液，因为RNA极易降解，所以不宜与其他电泳液混用。同时，要注意电泳液的配制，为1×TAE，如果电泳液配制有误则会导致电压不稳，或者电压无法上升。
最后，保证了电泳液和胶体质量以后，就可以进行点样了。点样时，要注意点样量，以3μl为宜，与loading-buffer混匀后要用移液枪将其完全吸取，完全点入点样孔内，不要有溢出，同时点样时力度不宜过大，否则会使枪头捅漏胶板，样品流入电泳液，导致电泳失败。
电泳条件，由于RNA自身易降解的特点，建议使用高电压，短时间电泳方式，130-140v电压，10-15分钟即可。电泳时间长短会影响带型的相对位置，所以不能单纯靠对比Marker来断定。
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千级洁净室标准参数是由空气质量，空气流动，温度，湿度，压力，大气压力，洁净度，灰尘，细菌，甲醛，臭氧，电磁波等参数组成的。
一般情况下，千级洁净室的洁净度应符合100级标准，其中细菌浓度应低于100个/m³，超细颗粒物浓度应低于0.1μm/m³，灰尘浓度应低于5μm/m³，甲醛浓度应低于0.08mg/m³，臭氧浓度应低于0.1ppm，电磁波强度应低于5V/m。空气质量是千级洁净室标准参数的重要组成部分，它用来衡量洁净室内的空气质量，以确保其空气质量达到规定的要求。一般来说，空气中的粉尘浓度应低于0.5μm/m³，较大颗粒物浓度应低于0.3μm/m³，超细颗粒物浓度应低于0.1μm/m³。
空气流动是洁净室内部空气流动状况的衡量，它可以帮助洁净室内部污染物的分布更加均匀，以便更有效地控制和消除污染物。一般情况下，千级洁净室的空气流动应满足大气压力差不超过20Pa，温度差不超过2℃，湿度差不超过5％，洁净度不低于100级。
温度和湿度是洁净室内空气状况的重要指标，它们可以帮助洁净室内的污染物保持一定的稳定性，以便更好地控制和消除污染物。一般情况下，千级洁净室的温度应在18-25℃之间，湿度应在30-65％之间。
大气压力是洁净室内部空气流动的重要指标，它可以帮助洁净室内的污染物更好地分布，以便更有效地控制和消除污染物。一般情况下，千级洁净室的大气压力应保持在101.3-103.3Kpa之间，并且与周围环境的大气压力保持一定的差值。
一般情况下，千级洁净室的洁净度应符合100级标准，其中细菌浓度应低于100个/m³，超细颗粒物浓度应低于0.1μm/m³，灰尘浓度应低于5μm/m³，甲醛浓度应低于0.08mg/m³，臭氧浓度应低于0.1ppm，电磁波强度应低于5V/m。空气质量是千级洁净室标准参数的重要组成部分，它用来衡量洁净室内的空气质量，以确保其空气质量达到规定的要求。一般来说，空气中的粉尘浓度应低于0.5μm/m³，较大颗粒物浓度应低于0.3μm/m³，超细颗粒物浓度应低于0.1μm/m³。
空气流动是洁净室内部空气流动状况的衡量，它可以帮助洁净室内部污染物的分布更加均匀，以便更有效地控制和消除污染物。一般情况下，千级洁净室的空气流动应满足大气压力差不超过20Pa，温度差不超过2℃，湿度差不超过5％，洁净度不低于100级。
温度和湿度是洁净室内空气状况的重要指标，它们可以帮助洁净室内的污染物保持一定的稳定性，以便更好地控制和消除污染物。一般情况下，千级洁净室的温度应在18-25℃之间，湿度应在30-65％之间。
大气压力是洁净室内部空气流动的重要指标，它可以帮助洁净室内的污染物更好地分布，以便更有效地控制和消除污染物。一般情况下，千级洁净室的大气压力应保持在101.3-103.3Kpa之间，并且与周围环境的大气压力保持一定的差值。
Sj5、基于51单片机的火灾检测设计
（仿真+程序+原理图+论文报告）
Proteus仿真版本：proteus7.8
原理图：Altium Designer
程序编译器：keil 4
编程语言：C语言
整个系统以STC89C52单片机为核心器件，配合电阻电容晶振等器件，构成单片机的最小系统。
1.烟雾采集传感器选用MQ-2，由于该传感器输出的是模拟信号，因此需要模数转换芯片ADC0832，把模拟信号转为数字信号再传给单片机；
2.温度采集使用DS18B20数字传感器，该传感器通过单总线和单片机相连；
3.火焰检测使用火焰检测模块，该模块完成了信号的检测、放大、比较等处理，最终输出高低电平信号给单片机；
4.显示设备使用1602液晶，可以在屏幕上显示实时烟雾浓度值、温度值，以及报警值等信息；
5.报警模块则采用蜂鸣器和LED灯组成，三个LED分别代表了火焰报警指示、烟雾报警指示和温度报警指示，无论哪个检测元素超标，蜂鸣器都会鸣叫报警；
6.3个按键作为操作输入设备，可以用来调节报警阈值的大小；
7.供电采用常用的USB 5V进行供电。
需要的联系！
（仿真+程序+原理图+论文报告）
Proteus仿真版本：proteus7.8
原理图：Altium Designer
程序编译器：keil 4
编程语言：C语言
整个系统以STC89C52单片机为核心器件，配合电阻电容晶振等器件，构成单片机的最小系统。
1.烟雾采集传感器选用MQ-2，由于该传感器输出的是模拟信号，因此需要模数转换芯片ADC0832，把模拟信号转为数字信号再传给单片机；
2.温度采集使用DS18B20数字传感器，该传感器通过单总线和单片机相连；
3.火焰检测使用火焰检测模块，该模块完成了信号的检测、放大、比较等处理，最终输出高低电平信号给单片机；
4.显示设备使用1602液晶，可以在屏幕上显示实时烟雾浓度值、温度值，以及报警值等信息；
5.报警模块则采用蜂鸣器和LED灯组成，三个LED分别代表了火焰报警指示、烟雾报警指示和温度报警指示，无论哪个检测元素超标，蜂鸣器都会鸣叫报警；
6.3个按键作为操作输入设备，可以用来调节报警阈值的大小；
7.供电采用常用的USB 5V进行供电。
需要的联系！
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