最近的WB就是不断解决上一个问题迎来下一个问题
之前常用的一抗被师兄建库用完了没告诉我 ,他新买的另一个牌子的我跑不出来,于是等了个货期买回原来的抗体
紧接着发现三批蛋白怎么都压不齐,一开始以为是浓缩胶配短了,刻意加少了分离胶无效,尝试几次后发现是因为有一批蛋白加的loading和其他的不是一个牌子
期间有一批蛋白条带位置一直不对,翻实验记录发现是因为那批蛋白变性时,自己的loading用完了,借用的师兄的loading是非变性的[跪了]所以跑出来的不是单体
然后0306提新一批蛋白的时候,因为multi tasking,把蛋白丢95度煮了快两个小时(完全忘记[裂开])且冰上超声的时候有冰碴掉到试管里,所以浓度和其他批次有壁,调内参废了老鼻子劲,可喜可贺的是,这次WB终于压齐了胶,并且有了貌似有趋势的带
于是今天我又又又又又新提了一批蛋白,摩拳擦掌想在下周三组会前show我的WB趋势,小心翼翼避免了上述所有坑
结果,我转完膜封闭之前把膜拎起来发现55kD以上的marker都还在胶上,百思不得其解,刚刚翻实验记录才发现,转膜的时候调电流手上调的是脑子里想的数值的一半[裂开]还堂而皇之写在了实验记录上,自己完全没发现有什么不对[跪了]
现在已经配完新胶了,准备重新跑,今天的新知识就是,转完膜别急着拆滤纸,记得先掀开大kD一侧的膜看看胶上还有没有颜色[跪了]
之前常用的一抗被师兄建库用完了没告诉我 ,他新买的另一个牌子的我跑不出来,于是等了个货期买回原来的抗体
紧接着发现三批蛋白怎么都压不齐,一开始以为是浓缩胶配短了,刻意加少了分离胶无效,尝试几次后发现是因为有一批蛋白加的loading和其他的不是一个牌子
期间有一批蛋白条带位置一直不对,翻实验记录发现是因为那批蛋白变性时,自己的loading用完了,借用的师兄的loading是非变性的[跪了]所以跑出来的不是单体
然后0306提新一批蛋白的时候,因为multi tasking,把蛋白丢95度煮了快两个小时(完全忘记[裂开])且冰上超声的时候有冰碴掉到试管里,所以浓度和其他批次有壁,调内参废了老鼻子劲,可喜可贺的是,这次WB终于压齐了胶,并且有了貌似有趋势的带
于是今天我又又又又又新提了一批蛋白,摩拳擦掌想在下周三组会前show我的WB趋势,小心翼翼避免了上述所有坑
结果,我转完膜封闭之前把膜拎起来发现55kD以上的marker都还在胶上,百思不得其解,刚刚翻实验记录才发现,转膜的时候调电流手上调的是脑子里想的数值的一半[裂开]还堂而皇之写在了实验记录上,自己完全没发现有什么不对[跪了]
现在已经配完新胶了,准备重新跑,今天的新知识就是,转完膜别急着拆滤纸,记得先掀开大kD一侧的膜看看胶上还有没有颜色[跪了]
#虾圈有钱崽[超话]#给自己的角色娃拍个大头贴!(均为20cm)
永宁小妖 哈哈哈(娃衣是手作定制)
方天择 i方(裸 有没有娃妈可以出一下胖胖体也可以穿的超星星学院校服[泪])
林修崖 崖宝
疾冲 急冲冲
北堂墨染 瓶瓶墨染
魏无羡 兔牙羡
言冰云 肖禁言
唐三糖三
顾魏 贵哥2.0(一直还没给他买医生服[允悲])
蔡丁 小丁壳
时影 白仙仙
5号病人 肖五号
顾一野 特种小战(裸,有没有帅气军装推荐)
——————————————————
暂时没有
梁老板 没脚小凤 北京小爷 外卖小哥
张小凡 春生 盛阳
退娃坑一年了,最近新出的娃也没有关注,如果有新出的角色娃希望大家多多推荐[打call]
永宁小妖 哈哈哈(娃衣是手作定制)
方天择 i方(裸 有没有娃妈可以出一下胖胖体也可以穿的超星星学院校服[泪])
林修崖 崖宝
疾冲 急冲冲
北堂墨染 瓶瓶墨染
魏无羡 兔牙羡
言冰云 肖禁言
唐三糖三
顾魏 贵哥2.0(一直还没给他买医生服[允悲])
蔡丁 小丁壳
时影 白仙仙
5号病人 肖五号
顾一野 特种小战(裸,有没有帅气军装推荐)
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暂时没有
梁老板 没脚小凤 北京小爷 外卖小哥
张小凡 春生 盛阳
退娃坑一年了,最近新出的娃也没有关注,如果有新出的角色娃希望大家多多推荐[打call]
下下个周五我要做开心超人!要去见星星了啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊
前提是我不晕过去...所以最近都在做运动!
第一次挤坑真的好害怕[跪了]
八年了...已经八年没看过团体演唱会
我一个路人粉刷官网撞大运抢到票
正好也去香港玩一圈!
最开始是想4月直接飞首尔看EXO的
但是一方面对开销没有概念 一方面实在不敢一个人去 事实上连票都抢不到 是我想太多咯[开学季]
但今年一定也要去见地人!!!
前提是我不晕过去...所以最近都在做运动!
第一次挤坑真的好害怕[跪了]
八年了...已经八年没看过团体演唱会
我一个路人粉刷官网撞大运抢到票
正好也去香港玩一圈!
最开始是想4月直接飞首尔看EXO的
但是一方面对开销没有概念 一方面实在不敢一个人去 事实上连票都抢不到 是我想太多咯[开学季]
但今年一定也要去见地人!!!
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