DND-26,溶酶体绿色荧光探针(LysoTracker Green DND-26)为绿色荧光标记的溶酶体探针,可对活细胞中的酸性隔室进行染色,并已被证明可选择性地积聚在肺泡 II 型 (AT2) 细胞的层状体中.具有504/511nm的最大激发/发射波长。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点:
选择性标记酸性细胞器;
纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;
具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点:
选择性标记酸性细胞器;
纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;
具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
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【《Apex英雄》新补丁将加入9张《泰坦陨落》地图】
《Apex英雄》在8月初第十四赛季上线后,创造了该游戏在线人数峰值的新纪录,其Steam的在线玩家人数首次突破了50万人,并在之后达到了511,676人的峰值纪录。可以说是非常的火爆。
《Apex英雄》的成功与Respawn工作室持续不断的内容更新是分不开的,而最近,数据挖掘者kralrindo发布推文,《Apex英雄》的新补丁将会为另一个即将到来的游戏模式加入Capture Point地点,此外它还会为其加入9张来自于《泰坦陨落》的新地图,并列出了这些地图:
1.Exoplanet
2.Homestead
3.Angel City
4.Black Water Canal
5.Boneyard
6.Crashsite
7.Rise
8.Eden
9.Colony
这看起来并不令人意外,《泰坦陨落》和《Apex英雄》都是由Respawn工作室开发的,而且两者采用了同样的世界观。而能够在《Apex英雄》中玩到《泰坦陨落》的地图,相信也是粉丝们喜闻乐见的
#Apex 英雄#
《Apex英雄》在8月初第十四赛季上线后,创造了该游戏在线人数峰值的新纪录,其Steam的在线玩家人数首次突破了50万人,并在之后达到了511,676人的峰值纪录。可以说是非常的火爆。
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