#化学每日一文# 【热点文章】 大别山区金寨县杂交天麻和红天麻质量差异分析
引用本文：巩晴晴, 俞年军, 王广政, 等. 大别山区金寨县杂交天麻和红天麻质量差异分析[J]. 化学试剂, 2022，44（11）:1650-1656.
DOI: 10.13822 /j.cnki.hxsj.2022.0130
背景介绍
天麻，作为农民新兴的增产增收中药材之一，为兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎，具有镇静、抗惊厥、增智健脑等药理作用。天麻成分复杂，主要含有酚类、苷类、甾醇等化学成分。对含有多变量的天麻药材进行整合，统一分析，旨在全面反映中药质量的差异性十分重要。金寨县位于大别山腹地，自然环境优良，天麻种植规模大，产量高，是皖西天麻的主要产地之一，探究杂交天麻与红天麻品种间内在质量差异性问题，对于推动金寨天麻的广泛生产有重要意义。
文章亮点
1. 通过指纹图谱结合主成分综合评价分析大别山区金寨县天麻质量差异性；
2. 采用中药指纹图谱软件结合6个成分含量测定以及主成分综合评价对21批金寨天麻药材进行分析；
3.比较了大别山金寨县杂交天麻和红天麻的质量差异性，探究其差异在品种间的规律。
内容介绍
1实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1.2 实验方法
1.2.1 HPLC色谱条件
色谱柱：C18柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；检测波长270 nm；柱温35 ℃；进样量10 μL；体积流量1.0 mL/min；流动相为甲醇（B）-0.1%磷酸溶液（A），0 ~ 20 min，8% B；20 ~ 55 min，8% B→40% B；55 ~ 60 min，40% B→50% B；60 ~ 65 min，50% B→8% B；65 ~ 70 min，8% B。
1.2.2 供试品溶液的制备
采集新鲜天麻样品后，按2020《中国药典》所载方法处理成粉。精密称取1.0 g天麻粉，加入25 mL稀乙醇，称重，超声处理40 min，冷却，称重，用提取溶剂补足减少的重量。取滤液10 mL浓缩，用10%甲醇溶解定容至10mL量瓶中，约取1 mL溶液用0.45 μm膜滤过，即得。
2结果与讨论
2.1 方法学考察
2.1.1 线性关系考察
加10%甲醇制成含0.333 mg/mL天麻素、0.729 mg/mL对羟基苯甲醇、0.335 mg/mL巴利森苷E、0.616 mg/mL巴利森苷B、0.272 mg/mL巴利森苷C、0.996 mg/mL巴利森苷A的混合对照品溶液。精密量取0.5、1、2、3、4、5 mL此溶液，置5 mL容量瓶中，制成对照品溶液。
2.1.2 精密度试验
2.1.3 重复性试验
2.1.4 稳定性试验
2.1.5 加样回收率试验
精密称取已测定的6种成分含量的天麻药材粉末（S15）9份，每份0.5 g，分成3组，每组3份，分别精密加入0.121 mg/mL天麻素、0.058 mg/mL对羟基苯甲醇、0.061 mg/mL巴利森苷E、0.11 mg/mL巴利森苷B、0.032 mg/mL巴利森苷C、0.143 mg/mL巴利森苷A的0.5、0.7、1.0 mL混合对照溶液，照1.2.1项下色谱条件进样测定，计算平均加样回收率。
2.1.6 天麻药材含量测定
取21批金寨天麻药材，平行3份，按1.2.2方法制备溶液，按1.2.1色谱条件进行测定，记录峰面积，计算天麻除去含水量后的6种化学成分含量（见表3）。结果表明，各成分含量RSD分别为天麻素27.809%、对羟基苯甲醇38.964%、巴利森苷E 25.238%、巴利森苷B 24.231%、巴利森苷C 36.680%、巴利森苷A 35.379%。
2.2 天麻药材指纹图谱的建立及共有峰的标定
2.2.1 天麻药材指纹图谱的建立
分别精密称取21批1.0 g金寨天麻药材，按1.2.2方法制备溶液，1.2.1色谱条件测定，在图谱软件中，设置S15为参照图谱，时间窗宽度为0.1min，校正后确定了11个共有峰，得到天麻药材指纹图谱叠加图，见图1；生成金寨天麻药材的共有模式特征图谱，见图2。
2.2.2 天麻药材指纹图谱共有峰的标定
与对照品的图谱进行比较指认了其中6个共有峰，分别为天麻素（2号峰）、对羟基苯甲醇（3号峰）、巴利森苷E（5号峰）、巴利森苷B（8号峰）、巴利森苷C（9号峰）、巴利森苷A（10号峰）。
2.2.3 天麻药材指纹图谱的相似度评价
计算大别山区金寨县天麻药材相似度，结果见表4，21批杂交天麻和红天麻药材的相似度全在0.900以上。
2.3 聚类分析
采用SPSS 23.0软件，以21批天麻药材共有峰的峰面积为变量，生成聚类分析图，见图3。当分类距离为15时，S1 ~ S13杂交天麻、S17、S21样品聚为一类；S15 ~ S16红天麻、S18 ~ S20红天麻、S3、S14各批样品聚为一类。
2.4 主成分分析（PCA）
PCA是将药材的无数个成分变量根据实验结果截取少量实验数据，所选取的少量实验数据对于复杂的中药体系而言，恰恰能够代表主成分数据以表征中药材数据的整体情况[11-13]。为了进一步分析金寨县杂交天麻和红天麻药材间的差异，以主成分的特征值和累积贡献率，整合SPSS对21批天麻药材数据进行PCA分析。
2.5 杂交天麻和红天麻两种变型综合评价
采用3个主成分对21批2种天麻变型进行综合评价。综合评价函数F = 0.41331*F1＋0.28718*F2＋0.09140*F3，杂交天麻和红天麻化学成分各主成分值、综合得分，见表8，结果表明，对大别山区金寨县杂交天麻和红天麻品种间综合得分顺序与品种之间并没有明显相关性，而是表现出一种无序性。
2.6 讨论
本实验条件参考了《中国药典》2020版一部第59页天麻含量测定项下内容、结合田孟华等[14]用70%乙醇水浴回流提取、李平等[15]用稀乙醇超声提取处理，分析天麻有效成分的差异性。考察了回流法、超声提取法，同时比较以不同浓度乙醇作为提取溶剂，结果发现使用50%乙醇超声提取简便高效；在提取时间上考察了超声提取30、40、50 min，发现在40 min各色谱峰响应度、成分分离较好；本实验考察了在220、270 nm双波长检测条件下的色谱峰情况，发现在270 nm条件下能更好地完成实验；同时比较了乙腈（B）-0.1%磷酸水（A）、甲醇（B）-水溶液（A）、甲醇（B）-0.1%磷酸水（A）等梯度洗脱情况，发现采用甲醇（B）-0.1%磷酸水（A）进行梯度洗脱时色谱峰较好。
3结论
本实验就金寨天麻药材建立综合评价函数，结果表明金寨县综合得分较高的天麻在杂交天麻和红天麻间均有存在，但是杂交天麻与红天麻的综合得分存在明显的差异性。实验比较了大别山金寨县杂交天麻和红天麻的质量差异性，探究其差异在品种间的规律，以期推动金寨天麻的广泛生产。
引用本文：巩晴晴, 俞年军, 王广政, 等. 大别山区金寨县杂交天麻和红天麻质量差异分析[J]. 化学试剂, 2022，44（11）:1650-1656.
DOI: 10.13822 /j.cnki.hxsj.2022.0130
背景介绍
天麻，作为农民新兴的增产增收中药材之一，为兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎，具有镇静、抗惊厥、增智健脑等药理作用。天麻成分复杂，主要含有酚类、苷类、甾醇等化学成分。对含有多变量的天麻药材进行整合，统一分析，旨在全面反映中药质量的差异性十分重要。金寨县位于大别山腹地，自然环境优良，天麻种植规模大，产量高，是皖西天麻的主要产地之一，探究杂交天麻与红天麻品种间内在质量差异性问题，对于推动金寨天麻的广泛生产有重要意义。
文章亮点
1. 通过指纹图谱结合主成分综合评价分析大别山区金寨县天麻质量差异性；
2. 采用中药指纹图谱软件结合6个成分含量测定以及主成分综合评价对21批金寨天麻药材进行分析；
3.比较了大别山金寨县杂交天麻和红天麻的质量差异性，探究其差异在品种间的规律。
内容介绍
1实验部分
1.1 主要仪器与试剂
1.2 实验方法
1.2.1 HPLC色谱条件
色谱柱：C18柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；检测波长270 nm；柱温35 ℃；进样量10 μL；体积流量1.0 mL/min；流动相为甲醇（B）-0.1%磷酸溶液（A），0 ~ 20 min，8% B；20 ~ 55 min，8% B→40% B；55 ~ 60 min，40% B→50% B；60 ~ 65 min，50% B→8% B；65 ~ 70 min，8% B。
1.2.2 供试品溶液的制备
采集新鲜天麻样品后，按2020《中国药典》所载方法处理成粉。精密称取1.0 g天麻粉，加入25 mL稀乙醇，称重，超声处理40 min，冷却，称重，用提取溶剂补足减少的重量。取滤液10 mL浓缩，用10%甲醇溶解定容至10mL量瓶中，约取1 mL溶液用0.45 μm膜滤过，即得。
2结果与讨论
2.1 方法学考察
2.1.1 线性关系考察
加10%甲醇制成含0.333 mg/mL天麻素、0.729 mg/mL对羟基苯甲醇、0.335 mg/mL巴利森苷E、0.616 mg/mL巴利森苷B、0.272 mg/mL巴利森苷C、0.996 mg/mL巴利森苷A的混合对照品溶液。精密量取0.5、1、2、3、4、5 mL此溶液，置5 mL容量瓶中，制成对照品溶液。
2.1.2 精密度试验
2.1.3 重复性试验
2.1.4 稳定性试验
2.1.5 加样回收率试验
精密称取已测定的6种成分含量的天麻药材粉末（S15）9份，每份0.5 g，分成3组，每组3份，分别精密加入0.121 mg/mL天麻素、0.058 mg/mL对羟基苯甲醇、0.061 mg/mL巴利森苷E、0.11 mg/mL巴利森苷B、0.032 mg/mL巴利森苷C、0.143 mg/mL巴利森苷A的0.5、0.7、1.0 mL混合对照溶液，照1.2.1项下色谱条件进样测定，计算平均加样回收率。
2.1.6 天麻药材含量测定
取21批金寨天麻药材，平行3份，按1.2.2方法制备溶液，按1.2.1色谱条件进行测定，记录峰面积，计算天麻除去含水量后的6种化学成分含量（见表3）。结果表明，各成分含量RSD分别为天麻素27.809%、对羟基苯甲醇38.964%、巴利森苷E 25.238%、巴利森苷B 24.231%、巴利森苷C 36.680%、巴利森苷A 35.379%。
2.2 天麻药材指纹图谱的建立及共有峰的标定
2.2.1 天麻药材指纹图谱的建立
分别精密称取21批1.0 g金寨天麻药材，按1.2.2方法制备溶液，1.2.1色谱条件测定，在图谱软件中，设置S15为参照图谱，时间窗宽度为0.1min，校正后确定了11个共有峰，得到天麻药材指纹图谱叠加图，见图1；生成金寨天麻药材的共有模式特征图谱，见图2。
2.2.2 天麻药材指纹图谱共有峰的标定
与对照品的图谱进行比较指认了其中6个共有峰，分别为天麻素（2号峰）、对羟基苯甲醇（3号峰）、巴利森苷E（5号峰）、巴利森苷B（8号峰）、巴利森苷C（9号峰）、巴利森苷A（10号峰）。
2.2.3 天麻药材指纹图谱的相似度评价
计算大别山区金寨县天麻药材相似度，结果见表4，21批杂交天麻和红天麻药材的相似度全在0.900以上。
2.3 聚类分析
采用SPSS 23.0软件，以21批天麻药材共有峰的峰面积为变量，生成聚类分析图，见图3。当分类距离为15时，S1 ~ S13杂交天麻、S17、S21样品聚为一类；S15 ~ S16红天麻、S18 ~ S20红天麻、S3、S14各批样品聚为一类。
2.4 主成分分析（PCA）
PCA是将药材的无数个成分变量根据实验结果截取少量实验数据，所选取的少量实验数据对于复杂的中药体系而言，恰恰能够代表主成分数据以表征中药材数据的整体情况[11-13]。为了进一步分析金寨县杂交天麻和红天麻药材间的差异，以主成分的特征值和累积贡献率，整合SPSS对21批天麻药材数据进行PCA分析。
2.5 杂交天麻和红天麻两种变型综合评价
采用3个主成分对21批2种天麻变型进行综合评价。综合评价函数F = 0.41331*F1＋0.28718*F2＋0.09140*F3，杂交天麻和红天麻化学成分各主成分值、综合得分，见表8，结果表明，对大别山区金寨县杂交天麻和红天麻品种间综合得分顺序与品种之间并没有明显相关性，而是表现出一种无序性。
2.6 讨论
本实验条件参考了《中国药典》2020版一部第59页天麻含量测定项下内容、结合田孟华等[14]用70%乙醇水浴回流提取、李平等[15]用稀乙醇超声提取处理，分析天麻有效成分的差异性。考察了回流法、超声提取法，同时比较以不同浓度乙醇作为提取溶剂，结果发现使用50%乙醇超声提取简便高效；在提取时间上考察了超声提取30、40、50 min，发现在40 min各色谱峰响应度、成分分离较好；本实验考察了在220、270 nm双波长检测条件下的色谱峰情况，发现在270 nm条件下能更好地完成实验；同时比较了乙腈（B）-0.1%磷酸水（A）、甲醇（B）-水溶液（A）、甲醇（B）-0.1%磷酸水（A）等梯度洗脱情况，发现采用甲醇（B）-0.1%磷酸水（A）进行梯度洗脱时色谱峰较好。
3结论
本实验就金寨天麻药材建立综合评价函数，结果表明金寨县综合得分较高的天麻在杂交天麻和红天麻间均有存在，但是杂交天麻与红天麻的综合得分存在明显的差异性。实验比较了大别山金寨县杂交天麻和红天麻的质量差异性，探究其差异在品种间的规律，以期推动金寨天麻的广泛生产。
#马嘉祺弈局斩雾二十驭风# #马嘉祺 一起去未来# 前几天jin盐了，补一下[抱一抱][抱一抱]
Day30.
老实说我不是因为嘉祺上楼的，由于记性差到一定境界我已经记不清知道他的契机是什么了。但我知道他的时间是在十八岁生日之后，也就是2020年12月。当时谁都不了解，后面了解了也就喜欢上了٩(๑^o^๑)۶
Day29.
啊让我好好想想，当时仅仅了解团还不具体只看了些物料跟视频_
初印象：高音很顶，不爱说话，但是综艺感拉满的男团队长
现印象：坚韧内敛，温柔自谦，有野心懂礼貌，做事靠谱有底线，平时话不多但真要接触照样如鱼得水。感觉他身上有种魔力，默不作声呆在角落，也总能让人一眼注意到他。在我看来，只要了解马嘉祺，就算不喜欢他也绝对讨厌不起来。(✧∇✧)
Day28.
其实对嘉祺自了解开始就一直挺有好感的，只是真要说入坑从团粉到团偏再到马唯，我还是愿意把真正入坑归到属性马唯的开始，那我就算是很晚入坑了，今年运动会之后算是一个真正的契机。原因也很朴实无华，就是我见不得一些我早就不舒服的感觉一直保持下去了。
对嘉祺最大的改观是626，是知道他要复读的时候，当时我还是个僵尸粉只签到也不一定天天签，那个rs......我不明白为什么有人能对一个素未谋面的人有这么大的恶意，如若仅仅因为成绩，那我更不理解了，我看到毫无关系的人对着一个18岁的学生铺天盖地的谩骂和讥讽，我觉得我那天也是第一次见识到原来语言能这么冰冷，已经记不起当时自己作何感想了。但是我听到他要复读的消息的时候，我真的打心眼里的佩服，无关粉丝无关其他，就是我觉得真爷们儿，算是彻彻底底的改观吧。
Day30.
老实说我不是因为嘉祺上楼的，由于记性差到一定境界我已经记不清知道他的契机是什么了。但我知道他的时间是在十八岁生日之后，也就是2020年12月。当时谁都不了解，后面了解了也就喜欢上了٩(๑^o^๑)۶
Day29.
啊让我好好想想，当时仅仅了解团还不具体只看了些物料跟视频_
初印象：高音很顶，不爱说话，但是综艺感拉满的男团队长
现印象：坚韧内敛，温柔自谦，有野心懂礼貌，做事靠谱有底线，平时话不多但真要接触照样如鱼得水。感觉他身上有种魔力，默不作声呆在角落，也总能让人一眼注意到他。在我看来，只要了解马嘉祺，就算不喜欢他也绝对讨厌不起来。(✧∇✧)
Day28.
其实对嘉祺自了解开始就一直挺有好感的，只是真要说入坑从团粉到团偏再到马唯，我还是愿意把真正入坑归到属性马唯的开始，那我就算是很晚入坑了，今年运动会之后算是一个真正的契机。原因也很朴实无华，就是我见不得一些我早就不舒服的感觉一直保持下去了。
对嘉祺最大的改观是626，是知道他要复读的时候，当时我还是个僵尸粉只签到也不一定天天签，那个rs......我不明白为什么有人能对一个素未谋面的人有这么大的恶意，如若仅仅因为成绩，那我更不理解了，我看到毫无关系的人对着一个18岁的学生铺天盖地的谩骂和讥讽，我觉得我那天也是第一次见识到原来语言能这么冰冷，已经记不起当时自己作何感想了。但是我听到他要复读的消息的时候，我真的打心眼里的佩服，无关粉丝无关其他，就是我觉得真爷们儿，算是彻彻底底的改观吧。
仙女们！咱们追星图的不就是开心快乐嘛！趁早粉龚俊！
粉龚俊：你不用担心别人说你正主腿短，个矮，垫鞋垫。
粉龚俊：你不用担心别人说你正主腰粗水桶，不锻炼。
粉龚俊：你不用担心正主一年到头不营业，他脚丫子都露出来泡脚跟你分享打游戏！
粉龚俊：你不用担心正主发些似是而非的话常虐粉，他自己直心眼，你要发的复杂点他估计都看不懂（
粉龚俊：你不用忍受别人嘴你正主没资源在家躺平闲抠脚，他自己恨不得一天工作18的小时！
粉龚俊：你不用担心别人嘴你正主现代装帅，古装怎么这么丑，他不要太太太太帅别人就知足了色
粉龚俊：你不用在担心正主红毯见光死 。a知道什么
叫红毯救命药嘛
粉龚俊：你说你手控这不巧了么，你说你颜狗这不巧了么，你说你腹肌狗这 不巧了么，你说你事业批这不巧了么，你说你就喜欢少年感？？草！这不巧了么！！！！
粉龚俊：你不用担心别人说你正主腿短，个矮，垫鞋垫。
粉龚俊：你不用担心别人说你正主腰粗水桶，不锻炼。
粉龚俊：你不用担心正主一年到头不营业，他脚丫子都露出来泡脚跟你分享打游戏！
粉龚俊：你不用担心正主发些似是而非的话常虐粉，他自己直心眼，你要发的复杂点他估计都看不懂（
粉龚俊：你不用忍受别人嘴你正主没资源在家躺平闲抠脚，他自己恨不得一天工作18的小时！
粉龚俊：你不用担心别人嘴你正主现代装帅，古装怎么这么丑，他不要太太太太帅别人就知足了色
粉龚俊：你不用在担心正主红毯见光死 。a知道什么
叫红毯救命药嘛
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