DND-26,溶酶体绿色荧光探针(LysoTracker Green DND-26)为绿色荧光标记的溶酶体探针,可对活细胞中的酸性隔室进行染色,并已被证明可选择性地积聚在肺泡 II 型 (AT2) 细胞的层状体中.具有504/511nm的最大激发/发射波长。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点:
选择性标记酸性细胞器;
纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;
具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料,该类探针具有几大重要的特点:
选择性标记酸性细胞器;
纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞;
具有多色探针提供,可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50-75nM;
【注意】:为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
#复旦·科研新动态# 【Chemical Society Reviews封面综述!】2022年10月31日,复旦大学生命科学学院鲁伯埙/丁澦、信息科学与工程学院费义艳和华东师范大学化学与分子工程学院邢栋合作在Chemical Society Reviews期刊以封面论文的形式发表了题为“Emerging degrader technologies engaging lysosomal pathways”(靶向溶酶体途径的降解新技术)的重磅综述论文。https://t.cn/A6oTbcLO
简介
动物细胞立体结构图组成动物体的细胞称为动物细胞(Animal Cell),植物细胞和动物细胞大体上相同,都有细胞核、细胞质和细胞膜。但是也有不同的地方:这就是植物细胞在细胞膜外面有一层厚而坚硬的细胞壁,而动物细胞没有细胞壁。
结构
动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜,没有细胞壁,液泡不明显,含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核;它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器:细胞核,双层膜,包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的,粗面内质网表面附有核糖体,参与蛋白质的合成和加工;光面内质网,表面没有核糖体,参与脂类合成。
特性
动物细胞与微生物细胞和植物细胞相比较具有下列特性。
①动物细胞没有细胞壁,细胞适应环境的能差。
②动物细胞的体积比微生物细胞大几千倍,稍小于植物细胞的体积。
③大部分动物细胞在肌体内相互粘连以集群形式存在,在细胞培养中大部分细胞具有群体效应、锚地依赖性、接触抑制性以及功能全能性。
动物细胞立体结构图组成动物体的细胞称为动物细胞(Animal Cell),植物细胞和动物细胞大体上相同,都有细胞核、细胞质和细胞膜。但是也有不同的地方:这就是植物细胞在细胞膜外面有一层厚而坚硬的细胞壁,而动物细胞没有细胞壁。
结构
动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜,没有细胞壁,液泡不明显,含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核;它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器:细胞核,双层膜,包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的,粗面内质网表面附有核糖体,参与蛋白质的合成和加工;光面内质网,表面没有核糖体,参与脂类合成。
特性
动物细胞与微生物细胞和植物细胞相比较具有下列特性。
①动物细胞没有细胞壁,细胞适应环境的能差。
②动物细胞的体积比微生物细胞大几千倍,稍小于植物细胞的体积。
③大部分动物细胞在肌体内相互粘连以集群形式存在,在细胞培养中大部分细胞具有群体效应、锚地依赖性、接触抑制性以及功能全能性。
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