#富田铃花[超话]##富田鈴花#
20221104 Instagram
万圣节我穿了一直都很照顾我们的编舞师TAKAHIRO老师的穿搭
其实在很早以前，就已经跟他本人聊起…想在万圣节打扮成TAKAHIRO老师的样子
没想到居然送给我一条他一直以来都在穿的裤子。
我会真的真的真的，一辈子珍惜它的！！！
裤子上还绣着TAKAHIRO老师自己的标志呢
材质非常轻，穿着动起来也非常灵活，甚至感觉自己舞蹈技术都长进了
当然了，不能仅停留在感觉，它也鼓励着我继续精进自己的舞蹈
希望自己能够把从成为偶像时在TAKAHIRO老师身上学到的和感受到的他内在的能量延续下去。
真的非常感谢
并感谢每一位前来参加见面会的人！
下一次是周日。
#suzygram#
#日向坂46#
#TAKAHIRO# 老师
20221104 Instagram
万圣节我穿了一直都很照顾我们的编舞师TAKAHIRO老师的穿搭
其实在很早以前，就已经跟他本人聊起…想在万圣节打扮成TAKAHIRO老师的样子
没想到居然送给我一条他一直以来都在穿的裤子。
我会真的真的真的，一辈子珍惜它的！！！
裤子上还绣着TAKAHIRO老师自己的标志呢
材质非常轻，穿着动起来也非常灵活，甚至感觉自己舞蹈技术都长进了
当然了，不能仅停留在感觉，它也鼓励着我继续精进自己的舞蹈
希望自己能够把从成为偶像时在TAKAHIRO老师身上学到的和感受到的他内在的能量延续下去。
真的非常感谢
并感谢每一位前来参加见面会的人！
下一次是周日。
#suzygram#
#日向坂46#
#TAKAHIRO# 老师
DND-26,溶酶体绿色荧光探针（LysoTracker Green DND-26）为绿色荧光标记的溶酶体探针，可对活细胞中的酸性隔室进行染色，并已被证明可选择性地积聚在肺泡 II 型 (AT2) 细胞的层状体中.具有504/511nm的最大激发/发射波长。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料，该类探针具有几大重要的特点：
选择性标记酸性细胞器；
纳摩尔级（nM）浓度即可有效标记活细胞；
具有多色探针提供，可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度，推荐工作液浓度为50-75nM；
【注意】：为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min～2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30min～2h（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】：对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
LysoTracker系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料，该类探针具有几大重要的特点：
选择性标记酸性细胞器；
纳摩尔级（nM）浓度即可有效标记活细胞；
具有多色探针提供，可根据情况对样品进行多标实验。
LysoTracker Green DND-26的使用方法
使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
1.工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度，推荐工作液浓度为50-75nM；
【注意】：为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。
2.染色
2 .1 对于贴壁细胞1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min～2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30min～2h（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注意】：对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
#肺癌# 肺癌EGFR突变都有哪些药
EGFR 是肺癌最常见的突变类型，也是靶向药中发展最快、药物最多的突变之一。一代药物吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼，二代药物阿法替尼、达克替尼，三代药物奥希替尼、阿美替尼等给无数患者带来希望。
但是即使已经出现了一、二、三代靶向药，肺癌患者仍然可能出现靶向耐药，为了解决EGFR靶向耐药的问题，四代 EGFR 靶向药已在研发或临床试验当中。另外，研究人员还尝试通过双靶向疗法、免疫疗法联合等手段来解决EGFR 靶向耐药的问题。
一、二、三代EGFR靶向药的区别
最早出现的肺癌靶向药物被称为第一代靶向治疗药物，包括吉非替尼、厄洛替尼等。这些药物与靶点的结合并不牢固，结合一段时间就分开了，因此被称为可逆的靶向药物。
以阿法替尼为代表的二代靶向治疗药物会不可逆地与靶点结合，永久地锁住靶点，不让它“作恶”，同时二代相比一代作用靶点更加广泛，这是二代靶向药物与一代靶向药物在作用机理上最显著的区别。
三代靶向药物为奥希替尼，相比于一代、二代EGFR-TKI，三代EGFR-TKI奥希替尼可以有效穿透血脑屏障,更好的发挥颅内抗肿瘤疗效，被广大肺癌患者誉为抗癌“神药”。
另外，以上靶向药物作用靶点均为EGFR 19号外显子缺失突变（Del19)、EGFR 21号外显子突变（L858R），对于EGFR20外显子插入突变的效果并不显著。但随着研究人员对EGFR20外显子插入突变的了解，2021年，两款针对EGFR外显子20插入突变的药物接连被美国FDA获批，标志着EGFR外显子20插入突变患者将迎来新的转机，不再无药可医！
Rybrevant：21年5月，美国食品和药物管理局（FDA）批准EGFR-MET双特异性抗体Rybrevant（amivantamab-vmjw），用于治疗接受含铂化疗失败后病情进展、EGFR基因外显子20插入突变阳性的转移性非小细胞肺癌成人患者。
Exkivity：21年9月，美国食品和药物管理局（FDA）已批准创新药物Exkivity（mobocertinib，TAK-788），用于治疗先前接受含铂化疗期间或之后病情进展、经FDA批准的检测方法证实为EGFR基因外显子20插入突变阳性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌成人患者。
EGFR 是肺癌最常见的突变类型，也是靶向药中发展最快、药物最多的突变之一。一代药物吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼，二代药物阿法替尼、达克替尼，三代药物奥希替尼、阿美替尼等给无数患者带来希望。
但是即使已经出现了一、二、三代靶向药，肺癌患者仍然可能出现靶向耐药，为了解决EGFR靶向耐药的问题，四代 EGFR 靶向药已在研发或临床试验当中。另外，研究人员还尝试通过双靶向疗法、免疫疗法联合等手段来解决EGFR 靶向耐药的问题。
一、二、三代EGFR靶向药的区别
最早出现的肺癌靶向药物被称为第一代靶向治疗药物，包括吉非替尼、厄洛替尼等。这些药物与靶点的结合并不牢固，结合一段时间就分开了，因此被称为可逆的靶向药物。
以阿法替尼为代表的二代靶向治疗药物会不可逆地与靶点结合，永久地锁住靶点，不让它“作恶”，同时二代相比一代作用靶点更加广泛，这是二代靶向药物与一代靶向药物在作用机理上最显著的区别。
三代靶向药物为奥希替尼，相比于一代、二代EGFR-TKI，三代EGFR-TKI奥希替尼可以有效穿透血脑屏障,更好的发挥颅内抗肿瘤疗效，被广大肺癌患者誉为抗癌“神药”。
另外，以上靶向药物作用靶点均为EGFR 19号外显子缺失突变（Del19)、EGFR 21号外显子突变（L858R），对于EGFR20外显子插入突变的效果并不显著。但随着研究人员对EGFR20外显子插入突变的了解，2021年，两款针对EGFR外显子20插入突变的药物接连被美国FDA获批，标志着EGFR外显子20插入突变患者将迎来新的转机，不再无药可医！
Rybrevant：21年5月，美国食品和药物管理局（FDA）批准EGFR-MET双特异性抗体Rybrevant（amivantamab-vmjw），用于治疗接受含铂化疗失败后病情进展、EGFR基因外显子20插入突变阳性的转移性非小细胞肺癌成人患者。
Exkivity：21年9月，美国食品和药物管理局（FDA）已批准创新药物Exkivity（mobocertinib，TAK-788），用于治疗先前接受含铂化疗期间或之后病情进展、经FDA批准的检测方法证实为EGFR基因外显子20插入突变阳性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌成人患者。
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