22.8.28 吉吉究极&Loopy未命名
批判完周六的自己后，终于看了两场，也都心满意足了。
下午的究极气氛还挺舒服的，想玩的时候上去玩一下，想休闲的时候后面随便走走。之前和别人看了在山中湖的一段Ignite的视频，今天听到了，感觉还不错。中间小船无预警扑下来还是有点吓人的。
P1 第一次看阿澜，solo表演备受好评，下面直呼你券有了，那确实有了。看下来感觉很适合当偶像呢。
P2 上一次和纸兔合影还是在前团体，当时被绿毛捕获了。之前熹熹说，不知道去日本后触碰到了什么开关，咋变得恁可爱。可爱捏。今天穿了东北乐天金鹰的球衣来和仙台人合影，没想到去了一年没看过鲁迅像[哆啦A梦害怕]
晚上来到了Loopy，这个地方，与其说是Livehouse，感觉更像Studio，观众席的大小也就和人广地下差不多吧。因为知道了没有舞台，所以难得买了vip站在第一排，试一试低头看Live是什么感觉。挂脖子上的GoPro目前看下来高度正合适，这周整理下录像，看看有什么能发的。不过有摄影观众在的话，站第一排动作还是受限了，以后还是得回归后面舞池。
昨天跟成员说过普通定期公演非必要不远征，那么这一场生诞就属于特殊公演了。诸如生诞、毕业、甚至解散Live，都是值得请假远征的。这一场vip赠了手机全员合影和全员握手，这两项东西，虽然很多人觉得没用，但是味儿到位了。穗P毕竟是懂行的，这场Live给我的感觉就是很多该有的元素都有了：比如地偶全明星生祝视频、生日会交流、嘉宾Collabo、团T安可。如果这场在下午或者上海，大家不急着赶车的话，不说绝杀，但也是很棒的生诞了。
P3 昨天随便合的熹熹，今天认真并催促着赶车前后都合了。所以说前后特典心情是完全不一样的。前特典想的是后物贩赶车可能就跑路了，先拍一张再说。在外面候场时，听到了漏音，根据漏音的内容聊了下这首ufoufo。结束后，这个衣装是史上初了，第一次见到穿别的团T来特典的。不过俺喜欢偶像穿偶像T捏[送花花]
P4 第一次见到ururu时，是去年5月的福州。ururu的可爱是大家的共识，我也不用再多加夸奖。这次Live上的ururu，让我想起了去年Overheat在nerve时的上场，一样跳得非常尽兴。满头大汗地跳了这么多歌，给我这次杭州之行圆满地收了尾。最后，再次祝生日快乐！
写完这篇repo，车刚到莘庄。大家晚安！上海周边再见
批判完周六的自己后，终于看了两场，也都心满意足了。
下午的究极气氛还挺舒服的，想玩的时候上去玩一下，想休闲的时候后面随便走走。之前和别人看了在山中湖的一段Ignite的视频，今天听到了，感觉还不错。中间小船无预警扑下来还是有点吓人的。
P1 第一次看阿澜，solo表演备受好评，下面直呼你券有了，那确实有了。看下来感觉很适合当偶像呢。
P2 上一次和纸兔合影还是在前团体，当时被绿毛捕获了。之前熹熹说，不知道去日本后触碰到了什么开关，咋变得恁可爱。可爱捏。今天穿了东北乐天金鹰的球衣来和仙台人合影，没想到去了一年没看过鲁迅像[哆啦A梦害怕]
晚上来到了Loopy，这个地方，与其说是Livehouse，感觉更像Studio，观众席的大小也就和人广地下差不多吧。因为知道了没有舞台，所以难得买了vip站在第一排，试一试低头看Live是什么感觉。挂脖子上的GoPro目前看下来高度正合适，这周整理下录像，看看有什么能发的。不过有摄影观众在的话，站第一排动作还是受限了，以后还是得回归后面舞池。
昨天跟成员说过普通定期公演非必要不远征，那么这一场生诞就属于特殊公演了。诸如生诞、毕业、甚至解散Live，都是值得请假远征的。这一场vip赠了手机全员合影和全员握手，这两项东西，虽然很多人觉得没用，但是味儿到位了。穗P毕竟是懂行的，这场Live给我的感觉就是很多该有的元素都有了：比如地偶全明星生祝视频、生日会交流、嘉宾Collabo、团T安可。如果这场在下午或者上海，大家不急着赶车的话，不说绝杀，但也是很棒的生诞了。
P3 昨天随便合的熹熹，今天认真并催促着赶车前后都合了。所以说前后特典心情是完全不一样的。前特典想的是后物贩赶车可能就跑路了，先拍一张再说。在外面候场时，听到了漏音，根据漏音的内容聊了下这首ufoufo。结束后，这个衣装是史上初了，第一次见到穿别的团T来特典的。不过俺喜欢偶像穿偶像T捏[送花花]
P4 第一次见到ururu时，是去年5月的福州。ururu的可爱是大家的共识，我也不用再多加夸奖。这次Live上的ururu，让我想起了去年Overheat在nerve时的上场，一样跳得非常尽兴。满头大汗地跳了这么多歌，给我这次杭州之行圆满地收了尾。最后，再次祝生日快乐！
写完这篇repo，车刚到莘庄。大家晚安！上海周边再见
【转基因猪生物反应器领域研究获重要进展】华南农业大学动物科学学院、国家生猪种业工程技术研究中心教授吴珍芳团队在转基因猪生物反应器领域取得重要研究进展，在国际上首次利用转基因猪的唾液腺作为生物反应器，高效合成一种对人的神经性疾病具有良好治疗作用的蛋白—人神经生长因子。相关研究https://t.cn/A6Saa6va近日发表于Cells杂志。
据了解，该论文是吴珍芳团队继2018年在Elife杂志发表了一篇关于“唾液腺特异表达外源消化酶的节粮环保转基因猪”的论文后，在转基因猪唾液腺生物反应器领域的又一重要研究进展。吴珍芳及其团队的李紫聪教授为上述论文的共同通讯作者。
神经生长因子（Nerve Growth Factor, NGF）对神经细胞的生长、分化和再生都有重要作用。它对一些神经性疾病，例如青光眼和阿尔茨海默病等，有良好的治疗效果。由于鼠源的NGF（mouse NGF, mNGF）与人源的NGF（human NGF, hNGF）蛋白的同源性很高，从小鼠唾液腺组织中分离纯化的mNGF蛋白已于2002年被我国政府批准作为药物用于治疗人的一些神经损伤疾病。但是mNGF蛋白的稳定性和生物活性是低于hNGF蛋白的。然而，大肠杆菌表达的hNGF蛋白有可能由于缺乏某些重要的翻译后修饰而导致其生物活性降低。因此，通过哺乳动物细胞表达的hNGF蛋白应该活性更高，更具治疗价值。
动物的唾液腺天然表达高活性的NGF蛋白，这意味者唾液腺是表达NGF蛋白的一个理想组织。此外，家畜的唾液腺是潜在的高效生物反应器，它的优点有以下四点：
一是，家畜从出生至死亡，在整个生命周期都可以在唾液腺中表达具有潜在治疗作用的药物蛋白，并分泌至唾液中。而常用的家畜乳腺或家禽输卵管生物反应器只能在产奶期或产蛋期表达药用蛋白并分泌至乳汁或鸡蛋中；
二是，雄性和雌性的转基因家畜都能用作唾液腺生物反应器来生产药用蛋白，但家畜乳腺或家禽输卵管生物反应器只能利用雌性的转基因动物；
三是，家畜每天的唾液分泌量很大，有利于高效分泌表达的药用蛋白。例如猪、山羊、牛平均每天分别分泌唾液 15、6-16、60-190升；
四是，使用手术性或非手术性的方法可以从家畜收集大量的唾液用于目的蛋白纯化。
吴珍芳团队利用piggyBac转座系统结合体细胞克隆法制备了在唾液腺中特异高效表达hNGF蛋白的转基因猪，该转基因猪在其唾液中分泌高水平高活性的hNGF蛋白。团队利用他们所建立的手术性和非手术性唾液收集法从转基因猪的口腔高效收集到大量含hNGF蛋白的唾液，利用尺寸排除色谱法从收集的唾液中成功纯化获得hNGF蛋白，并证明该hNGF蛋白对神经细胞的增殖和分化具有良好的生物活性。
为了防止从转基因猪的唾液中纯化hNGF蛋白时被内源表达的猪神经生长因子（pig NGF, pNGF）蛋白“污染”，吴珍芳团队在转hNGF基因猪的基础上利用CRISPR/Cas9系统结合同源重组，把转基因猪内源的pNGF基因用另一个拷贝的hNGF基因替换，并通过体细胞克隆法生产出携带两个拷贝的hNGF基因，且不能表达内源pNGF蛋白的双转基因猪。该转基因猪生物反应器具有巨大的应用前景。
该研究为生产高活性的人类药用蛋白提供了一种高效的新技术，拓展了畜牧动物在人类医学中的应用，给人类健康带来了新的福音。https://t.cn/A6Saa6v6
据了解，该论文是吴珍芳团队继2018年在Elife杂志发表了一篇关于“唾液腺特异表达外源消化酶的节粮环保转基因猪”的论文后，在转基因猪唾液腺生物反应器领域的又一重要研究进展。吴珍芳及其团队的李紫聪教授为上述论文的共同通讯作者。
神经生长因子（Nerve Growth Factor, NGF）对神经细胞的生长、分化和再生都有重要作用。它对一些神经性疾病，例如青光眼和阿尔茨海默病等，有良好的治疗效果。由于鼠源的NGF（mouse NGF, mNGF）与人源的NGF（human NGF, hNGF）蛋白的同源性很高，从小鼠唾液腺组织中分离纯化的mNGF蛋白已于2002年被我国政府批准作为药物用于治疗人的一些神经损伤疾病。但是mNGF蛋白的稳定性和生物活性是低于hNGF蛋白的。然而，大肠杆菌表达的hNGF蛋白有可能由于缺乏某些重要的翻译后修饰而导致其生物活性降低。因此，通过哺乳动物细胞表达的hNGF蛋白应该活性更高，更具治疗价值。
动物的唾液腺天然表达高活性的NGF蛋白，这意味者唾液腺是表达NGF蛋白的一个理想组织。此外，家畜的唾液腺是潜在的高效生物反应器，它的优点有以下四点：
一是，家畜从出生至死亡，在整个生命周期都可以在唾液腺中表达具有潜在治疗作用的药物蛋白，并分泌至唾液中。而常用的家畜乳腺或家禽输卵管生物反应器只能在产奶期或产蛋期表达药用蛋白并分泌至乳汁或鸡蛋中；
二是，雄性和雌性的转基因家畜都能用作唾液腺生物反应器来生产药用蛋白，但家畜乳腺或家禽输卵管生物反应器只能利用雌性的转基因动物；
三是，家畜每天的唾液分泌量很大，有利于高效分泌表达的药用蛋白。例如猪、山羊、牛平均每天分别分泌唾液 15、6-16、60-190升；
四是，使用手术性或非手术性的方法可以从家畜收集大量的唾液用于目的蛋白纯化。
吴珍芳团队利用piggyBac转座系统结合体细胞克隆法制备了在唾液腺中特异高效表达hNGF蛋白的转基因猪，该转基因猪在其唾液中分泌高水平高活性的hNGF蛋白。团队利用他们所建立的手术性和非手术性唾液收集法从转基因猪的口腔高效收集到大量含hNGF蛋白的唾液，利用尺寸排除色谱法从收集的唾液中成功纯化获得hNGF蛋白，并证明该hNGF蛋白对神经细胞的增殖和分化具有良好的生物活性。
为了防止从转基因猪的唾液中纯化hNGF蛋白时被内源表达的猪神经生长因子（pig NGF, pNGF）蛋白“污染”，吴珍芳团队在转hNGF基因猪的基础上利用CRISPR/Cas9系统结合同源重组，把转基因猪内源的pNGF基因用另一个拷贝的hNGF基因替换，并通过体细胞克隆法生产出携带两个拷贝的hNGF基因，且不能表达内源pNGF蛋白的双转基因猪。该转基因猪生物反应器具有巨大的应用前景。
该研究为生产高活性的人类药用蛋白提供了一种高效的新技术，拓展了畜牧动物在人类医学中的应用，给人类健康带来了新的福音。https://t.cn/A6Saa6v6
#酷艾英语早起团[超话]#晨读打卡20220827及外刊：Fear does not need doors and windows, it works from the inside. How grief upsets your gut health:throw the body off course使身体偏离轨道；gastrointestinal tract 胃肠道系统；胃肠道的轨道、系统。microbiome微生物群。bereavement丧亲之痛。voluntary 自主的。vagus nerve 迷走神经（控制非自主系统）。
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