细胞无菌检测
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
#第三方检测机构##细胞无菌检测#
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
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小王子来到地球上，与玫瑰邂逅。
他与玫瑰之间的感情，虽然经历波折与痛苦，但他们始终都在对方的心上，彼此呼唤着两人独有的爱称。
这本《小王子的情书集》，2021年在遗物中被发现，是《小王子》之父安东尼·圣-埃克苏佩里（以下简称安托万），与妻子康苏爱萝·圣-埃克苏佩里（以下简称康苏爱萝），从1930年到1944年之间往来的168封书信。
原来小王子和玫瑰故事的现实版，就是安托万本人与他的妻子。
从一封封感情真挚而热烈的书信中，让我们更多了解了小王子与玫瑰间的趣事，也更多体会到，在长久的分离中，仅仅依靠热情还不够，还要有坚定的信念，永恒的信任，以及长久对抗孤独和思念的勇气。
正如书封上写的一样，“情书记录了‘小王子’与‘玫瑰’初见时的惊喜与忐忑，‘狐狸’出现时的混乱与争吵，‘小王子’出走后双方的思念与原谅。”
01 初遇时，喜爱可以冲破万难
康苏爱萝出生于1901年，比安托万小一岁。这个美丽的女子在嫁给安托万之前，曾经结过两次婚。
第一次为了逃避家中安排的婚姻，仓促嫁给一名墨西哥公务员，但是因为没什么感情基础，一年后就离婚了。
之后于1926年，嫁给了一位作家，不过也好景不长，短短一年后，作家就去世了，给康苏爱萝落下一笔遗产。
1930年，在作家的追悼会上，康苏爱萝与安托万相识，并迅速坠入爱河。
他们于一年后的1931年4月22日结婚，从此开始了15年聚少离多的生活。
安托万和康苏爱萝定情于康苏爱萝前夫的追悼会上，这听起来有点讽刺，所以在当时，他们两人都遭到了很多的质疑和批评。
在安托万给康苏爱萝的信中，他将这些窘境表达出来。
“你想象不到自从你离开之后上演了多少闹剧……有人过来跟我说，我欺骗了所有人。”
“我忧郁地从餐厅走到书房，在书房里度过忧郁的时光。”
但是当感情真正来袭时，两个人互相勉励，共同进退，一定可以冲破万难找到彼此，可以说，当爱正浓时，一切的问题都不是问题。
不过，小王子和玫瑰的初遇，因为他们之间的不同，也因为他们的聚少离多，最初就蒙上了一层灰暗的阴影。
安托万说：“从前有一个男孩，他发现了一件珍宝。但是对孩子来说，这件珍宝实在太过于美丽，以至于他的双眸不知道如何去欣赏，双手不知该如何去把握。于是孩子变得忧郁了。”
02 相守间，是孤独与信任的考验
热恋的日子总是美好而热烈的，恨不得每天都在一起，每时每刻都能想起对方说过的话。
遇到什么事都会想，对方会怎么做？
安托万与康苏爱萝也一样，他们与寻常新婚夫妻没两样，但又不一样。
他们之间的爱语是那么多，那么绵长。即便长期两地分居，但从文字中，依然能感受到那份炙热的爱。
不过，当激情褪去时，如果想要长相厮守，考验就变多了。
首先是应对孤独。
康苏爱萝在信中不止一次提到自己得病了，从手术室出来时，却见不到最想见的丈夫。
而安托万后来去到北非执行飞行任务，他们之间的通信因为战争原因，总是不能寄到爱人手里。
安托万在信中说：“我太冷了，冷到字迹都看不清晰了。”
无尽的呼唤与等待，让他们产生猜忌、争吵，还有疲惫。
长久忍受孤独与等待，让他们一齐转向了别人的怀抱。
康苏爱萝给安托万的信里有埋怨：“如果他把《小王子》题赠给了我，如果他带我去了华盛顿……但是亲爱的，你会带我前往其他丈夫不带妻子去的地方。”
安托万给康苏爱萝的信里有指责：“我和你分开已经漫漫三载了，这就像一场流亡。
我很清楚自己爱着你，这个世界上我爱的只有你。但您对我造成过太多伤害，那么频繁，那么强烈。”
不过，小王子与玫瑰仿佛注定就要一生绑在一起，哪怕分离，哪怕出走，最终都能走回对方的心里。
15年间的通信，从热恋期的狂喜，到疲惫期的争吵，再到后来的相守与渴望，也仿佛注定了，小王子最终会在流浪中离开。
03 出走半生，他们唯一的孩子叫作《小王子》
安托万爱他的作品，也爱他的飞行员生涯。
出生在那时，飞行员注定要为战争服务，而战争的代价之一，就是付出生命。
1943年，在短暂的相聚后，安托万重返战场，康苏爱萝则留在纽约。此时他们的心境，仿佛回到了曾经，仿佛没有经历过伤害与离别，他们的婚姻到达了美满而飘逸的巅峰时刻。
但就像流星的光芒一闪而过一样，这样平静而悠远的关系，却在1944年戛然而止。
在《小王子的情书集》中，康苏爱萝给安托万的最后一封信定格在1944年7月30日，此后她再也没有收到过回信。
因为在7月31日，安托万去执行飞行任务，之后便失踪了，再也没有人见过他。直到8月10日，康苏爱萝才从报纸上得知这一消息。
仿佛是小王子回去了自己的星球，仿佛一个漫长的故事终于结束了。
他们之间唯一的孩子，就是那部在争吵与猜忌中诞生的《小王子》，安托万当时甚至没有把《小王子》题献给康苏爱萝，不过后来他在信中也表示了歉意与后悔。
小王子与玫瑰的故事，壮烈如彗星般耀眼，在孤独中造就华美词句。
他们彼此深深爱着对方，也因为这份爱，彼此深深受了伤害。
他们之间虽然长久分离，但是从书信的字里行间中，却总能体会到那份炽烈而纯真的感情。
无论是安慰还是伤害，爱对于爱着的人来说，都是永恒的。
写在最后
爱能治愈，亦能伤人。这是一柄双面铜镜，热恋时能模糊对方的缺点，冷静时又能模糊对方的优点。
小王子与玫瑰的故事已经结束，但是正如书中序言所说：“故事结束，传奇开始。”
《小王子》为当时乃至今天的读者，开始了一段传奇旅行，而《小王子的情书集》，则是传奇书写者的前世今生。#读书，我们是认真的[超话]#
他与玫瑰之间的感情，虽然经历波折与痛苦，但他们始终都在对方的心上，彼此呼唤着两人独有的爱称。
这本《小王子的情书集》，2021年在遗物中被发现，是《小王子》之父安东尼·圣-埃克苏佩里（以下简称安托万），与妻子康苏爱萝·圣-埃克苏佩里（以下简称康苏爱萝），从1930年到1944年之间往来的168封书信。
原来小王子和玫瑰故事的现实版，就是安托万本人与他的妻子。
从一封封感情真挚而热烈的书信中，让我们更多了解了小王子与玫瑰间的趣事，也更多体会到，在长久的分离中，仅仅依靠热情还不够，还要有坚定的信念，永恒的信任，以及长久对抗孤独和思念的勇气。
正如书封上写的一样，“情书记录了‘小王子’与‘玫瑰’初见时的惊喜与忐忑，‘狐狸’出现时的混乱与争吵，‘小王子’出走后双方的思念与原谅。”
01 初遇时，喜爱可以冲破万难
康苏爱萝出生于1901年，比安托万小一岁。这个美丽的女子在嫁给安托万之前，曾经结过两次婚。
第一次为了逃避家中安排的婚姻，仓促嫁给一名墨西哥公务员，但是因为没什么感情基础，一年后就离婚了。
之后于1926年，嫁给了一位作家，不过也好景不长，短短一年后，作家就去世了，给康苏爱萝落下一笔遗产。
1930年，在作家的追悼会上，康苏爱萝与安托万相识，并迅速坠入爱河。
他们于一年后的1931年4月22日结婚，从此开始了15年聚少离多的生活。
安托万和康苏爱萝定情于康苏爱萝前夫的追悼会上，这听起来有点讽刺，所以在当时，他们两人都遭到了很多的质疑和批评。
在安托万给康苏爱萝的信中，他将这些窘境表达出来。
“你想象不到自从你离开之后上演了多少闹剧……有人过来跟我说，我欺骗了所有人。”
“我忧郁地从餐厅走到书房，在书房里度过忧郁的时光。”
但是当感情真正来袭时，两个人互相勉励，共同进退，一定可以冲破万难找到彼此，可以说，当爱正浓时，一切的问题都不是问题。
不过，小王子和玫瑰的初遇，因为他们之间的不同，也因为他们的聚少离多，最初就蒙上了一层灰暗的阴影。
安托万说：“从前有一个男孩，他发现了一件珍宝。但是对孩子来说，这件珍宝实在太过于美丽，以至于他的双眸不知道如何去欣赏，双手不知该如何去把握。于是孩子变得忧郁了。”
02 相守间，是孤独与信任的考验
热恋的日子总是美好而热烈的，恨不得每天都在一起，每时每刻都能想起对方说过的话。
遇到什么事都会想，对方会怎么做？
安托万与康苏爱萝也一样，他们与寻常新婚夫妻没两样，但又不一样。
他们之间的爱语是那么多，那么绵长。即便长期两地分居，但从文字中，依然能感受到那份炙热的爱。
不过，当激情褪去时，如果想要长相厮守，考验就变多了。
首先是应对孤独。
康苏爱萝在信中不止一次提到自己得病了，从手术室出来时，却见不到最想见的丈夫。
而安托万后来去到北非执行飞行任务，他们之间的通信因为战争原因，总是不能寄到爱人手里。
安托万在信中说：“我太冷了，冷到字迹都看不清晰了。”
无尽的呼唤与等待，让他们产生猜忌、争吵，还有疲惫。
长久忍受孤独与等待，让他们一齐转向了别人的怀抱。
康苏爱萝给安托万的信里有埋怨：“如果他把《小王子》题赠给了我，如果他带我去了华盛顿……但是亲爱的，你会带我前往其他丈夫不带妻子去的地方。”
安托万给康苏爱萝的信里有指责：“我和你分开已经漫漫三载了，这就像一场流亡。
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03 出走半生，他们唯一的孩子叫作《小王子》
安托万爱他的作品，也爱他的飞行员生涯。
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1943年，在短暂的相聚后，安托万重返战场，康苏爱萝则留在纽约。此时他们的心境，仿佛回到了曾经，仿佛没有经历过伤害与离别，他们的婚姻到达了美满而飘逸的巅峰时刻。
但就像流星的光芒一闪而过一样，这样平静而悠远的关系，却在1944年戛然而止。
在《小王子的情书集》中，康苏爱萝给安托万的最后一封信定格在1944年7月30日，此后她再也没有收到过回信。
因为在7月31日，安托万去执行飞行任务，之后便失踪了，再也没有人见过他。直到8月10日，康苏爱萝才从报纸上得知这一消息。
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他们之间唯一的孩子，就是那部在争吵与猜忌中诞生的《小王子》，安托万当时甚至没有把《小王子》题献给康苏爱萝，不过后来他在信中也表示了歉意与后悔。
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【索尼WI-C300挂颈式蓝牙立体声耳机】
官方售价：379 元
我们售价：99.9元（国外版本全新盒装原封）
购买方式：
①【购买链接：https://t.cn/A6q7BTXC】
②【保存图一徽信扫馬下单】
这或许是索尼性价比最高的挂颈式蓝牙耳机了吧！音质、做工好、性价比高，国外版本全新盒装原封。
索尼的耳机主打的就是音质，清澈无杂音。索尼 WI-C300无线蓝牙耳机采用9mm驱动单元，支持蓝牙4.2和NFC连接，还支持手机免提通话和语音助手，续航时间可达8小时。颈挂式设计，拥有白色、黑色、蓝色、红色四种配色设计，仅重约15g，轻巧便携。
实际体验下来，索尼WI-C300的声音凝聚性、动态、力度感在对乐器的表现上也是十分突出的，耳机低频饱满有力，声音分离度和声场都非常大，佩戴的感觉也特别舒服，个人感觉大法的黑科技是不得不服的。音质明亮透明，中频味道，索尼 WI-C300很有青春活力，也适合表现复古一些的曲子，中高频，索尼显得很有“色彩感”，电音，小提琴，或是年轻人的嗓音这些都显得更动人，有水晶的感觉。
注：产品为全新盒装全套，无质量问题不支持七天无理由退货。
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索尼的耳机主打的就是音质，清澈无杂音。索尼 WI-C300无线蓝牙耳机采用9mm驱动单元，支持蓝牙4.2和NFC连接，还支持手机免提通话和语音助手，续航时间可达8小时。颈挂式设计，拥有白色、黑色、蓝色、红色四种配色设计，仅重约15g，轻巧便携。
实际体验下来，索尼WI-C300的声音凝聚性、动态、力度感在对乐器的表现上也是十分突出的，耳机低频饱满有力，声音分离度和声场都非常大，佩戴的感觉也特别舒服，个人感觉大法的黑科技是不得不服的。音质明亮透明，中频味道，索尼 WI-C300很有青春活力，也适合表现复古一些的曲子，中高频，索尼显得很有“色彩感”，电音，小提琴，或是年轻人的嗓音这些都显得更动人，有水晶的感觉。
注：产品为全新盒装全套，无质量问题不支持七天无理由退货。
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