今天在给cck的行李箱断舍离的时候,发现了很多我之前送给cck的小玩意,不管是我随便送给他的,还是精心准备后送给他的,他都很珍惜的留着,就连我前年圣诞节懒得买苹果,故而简陋包装后送给他的棒棒糖他都没吃,原封不动地放在那。还有一个丑袋子,是我去年买衣服商家送的,我嫌不够好看随便扔给了他,他也留到了现在,我问他这些没用的东西为什么不扔掉,他说‘因为这是飞飞送给我的,我舍不得扔',呜呜呜,真的有被狠狠戳到,被别人放在心上的感觉真的很不赖,我爱我的猪咪丛[爱你][爱你]
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细胞增殖(3)实验原理(CellTiter-Glo™)
[微风]实验原理(CellTiter-Glo™)
ATP腺嘌呤核苷三磷酸(简称三磷酸腺苷)参与生物体内多种酶促反应,是活细胞新陈代谢的一个指标,其含量直接反应了细胞的数量及细胞状态:实验过程中向细胞培养基加入等体积CellTiter-Glo™试剂,测量发光值,在光信号和体系中,发光值与ATP量成正比,而ATP又和活细胞数正相关,因此可通过检测ATP含量得细胞活力。
[微风]CTG方法优势:
(1)同普通的MTT、CCK8法相比,CellTiter-Glo™发光活细胞检测系统的检测试剂具有最高灵敏度和较长的信号持续时间,此系统已经广泛地应用在生命科学研究领域中,如一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等;
(2)CellTiter-Glo™试剂和细胞培养中的常用培养基兼容,如RPMI1640、MEM、DMEM和 Ham's F12,也不受酚红和有机溶剂的影响,误差小,准确率高。
[微风]目的:考察目的基因对细胞的增殖能力产生的影响或药物对细胞增殖能力的影响
[微风]材料:目的细胞
[微风]步骤:
细胞收集——细胞铺板——(药物处理)——细胞培养0、24、48、72、96小时后加入CellTiter-Glo™溶液用微孔板震荡器5分钟,于室温放置10分钟-酶标仪检测荧光值
[微风]结果:如图#生信分析##生物信息学##生物信息学[超话]##医学生Medic[超话]#
[微风]实验原理(CellTiter-Glo™)
ATP腺嘌呤核苷三磷酸(简称三磷酸腺苷)参与生物体内多种酶促反应,是活细胞新陈代谢的一个指标,其含量直接反应了细胞的数量及细胞状态:实验过程中向细胞培养基加入等体积CellTiter-Glo™试剂,测量发光值,在光信号和体系中,发光值与ATP量成正比,而ATP又和活细胞数正相关,因此可通过检测ATP含量得细胞活力。
[微风]CTG方法优势:
(1)同普通的MTT、CCK8法相比,CellTiter-Glo™发光活细胞检测系统的检测试剂具有最高灵敏度和较长的信号持续时间,此系统已经广泛地应用在生命科学研究领域中,如一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等;
(2)CellTiter-Glo™试剂和细胞培养中的常用培养基兼容,如RPMI1640、MEM、DMEM和 Ham's F12,也不受酚红和有机溶剂的影响,误差小,准确率高。
[微风]目的:考察目的基因对细胞的增殖能力产生的影响或药物对细胞增殖能力的影响
[微风]材料:目的细胞
[微风]步骤:
细胞收集——细胞铺板——(药物处理)——细胞培养0、24、48、72、96小时后加入CellTiter-Glo™溶液用微孔板震荡器5分钟,于室温放置10分钟-酶标仪检测荧光值
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细胞增殖(2)
CCK-8方法优势:
(1)操作简单,避免细胞计数过程中人为因素的影响;
(2)细胞用量少,检测灵敏度高,稳定;
(3)可反复用酶标仪读板,检测时间灵活,不影响细胞进行后续实验;
(4)CCK-8产生的Formazan是水溶性的,无需换液,尤其适用于悬浮细胞,与MTT法相比更方便,更安全。
目的:考察目的基因对细胞的增殖能力产生的影响或药物对细胞增殖能力的影响
材料:目的细胞、稳转株(空载、目的基因)
步骤:
细胞收集——细胞铺板——(药物处理)——细胞培养0、6、24、48、72小时后加入CCK-8处理,酶标仪检测
结果:如图
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节选自:iNature(ID:Plant_ihuman)
CCK-8方法优势:
(1)操作简单,避免细胞计数过程中人为因素的影响;
(2)细胞用量少,检测灵敏度高,稳定;
(3)可反复用酶标仪读板,检测时间灵活,不影响细胞进行后续实验;
(4)CCK-8产生的Formazan是水溶性的,无需换液,尤其适用于悬浮细胞,与MTT法相比更方便,更安全。
目的:考察目的基因对细胞的增殖能力产生的影响或药物对细胞增殖能力的影响
材料:目的细胞、稳转株(空载、目的基因)
步骤:
细胞收集——细胞铺板——(药物处理)——细胞培养0、6、24、48、72小时后加入CCK-8处理,酶标仪检测
结果:如图
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节选自:iNature(ID:Plant_ihuman)
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