多灶性脉络膜炎，受连累的不只是 “脉络膜”！
多灶性脉络膜炎是一种病因不明的后部脉络膜视网膜炎症性疾病，因为一般都同时存在玻璃体炎和前葡萄膜炎，所以经常统称为多灶性脉络膜炎和全葡萄膜炎（Multifocal choroiditis and panuveitis，MCP）。
大多数MCP患者为双眼发病（66～79％），但双眼脉络膜炎症程度经常不一致。MCP炎症可能完全静止或者没有任何症状，也可能反复发作，逐渐加重。
视物模糊和视力下降是最常见的主诉，此外还有闪光感和飞蚊症。虽然脉络膜是最主要受累的眼组织，但其他眼部表现也非常明显。
在多灶性脉络膜炎中，52%的患者可以观察到轻度至中度的非肉芽肿性角膜后沉淀物（KP）、瞳孔后粘连、前房细胞和闪辉。
轻度到中度的玻璃体细胞活动性炎症也更为常见，76～100%的MCP患者可以观察到。在同一项研究中，33%的眼睛出现了并发性白内障，12%MCP患者已经是做过白内障手术的人工晶状体眼。
通过生物显微镜检查可以见到，在MCP急性期眼底多个圆形到椭圆形、视网膜色素上皮（RPE）水平灰黄色病变，大小从50～350μm不等，数量从几个到100多个，分散在眼底的后极部和中周部。
这些病灶可以单独发生，或成簇、条纹状排列分布，平行于视网膜锯齿缘。病变有明显的视盘周围和鼻侧中周部分布倾向。活动性病变消退后，病灶演变为圆形萎缩性脉络膜瘢痕，有突起感觉和不同程度的色素沉着。
此外，视盘充血和水肿在MCP中也是常见的表现，Reddy医生及其同事检查的MCP 患者68只眼睛中，34%发生视盘水肿。
多灶性脉络膜炎患者中，黄斑囊样水肿（cystoid macular edema，CME）的发生率，文献报道的并不一致。在Dreyer和Gass等医生及其附属医院研究的患者中，发生的比例为14%，而在美国国家眼科研究所研究的MCP患者中发生CME的比例为41%。
32～46%的MCP患者中，我们还可以观察到脉络膜新生血管膜（choroidal neovascular membranes，CNVMs），主要位于黄斑或视盘周围。
在Thorne医生和同事报告的66例（122只眼）MCP患者中，CNVMs是导致45% MCP患者视力低于0.1的主要因素。视网膜血管炎和视网膜视盘新生血管也有部分报道。
多灶性脉络膜炎虽然是主要发生在脉络膜的炎症，但我们的眼睛作为一个精细复杂的器官，其他结构也会受到影响。积极消除炎症，防止炎症复发是最重要的治疗方法，好好配合医生治疗，珍惜我们的心灵之窗！
参考文献：
1. Diagnosis & Treatment of Uveitis Second Edition (2013). C Stephen Foster. Albert T Vitale
2. Ryan’s Retina (2018). Andrew P. Schachat
图1. 炎症控制后MCP多发病灶
图片来自《Diagnosis & Treatment of Uveitis》
图2. 多灶性脉络膜炎视盘旁萎缩
图片来自《Diagnosis & Treatment of Uveitis》
多灶性脉络膜炎是一种病因不明的后部脉络膜视网膜炎症性疾病，因为一般都同时存在玻璃体炎和前葡萄膜炎，所以经常统称为多灶性脉络膜炎和全葡萄膜炎（Multifocal choroiditis and panuveitis，MCP）。
大多数MCP患者为双眼发病（66～79％），但双眼脉络膜炎症程度经常不一致。MCP炎症可能完全静止或者没有任何症状，也可能反复发作，逐渐加重。
视物模糊和视力下降是最常见的主诉，此外还有闪光感和飞蚊症。虽然脉络膜是最主要受累的眼组织，但其他眼部表现也非常明显。
在多灶性脉络膜炎中，52%的患者可以观察到轻度至中度的非肉芽肿性角膜后沉淀物（KP）、瞳孔后粘连、前房细胞和闪辉。
轻度到中度的玻璃体细胞活动性炎症也更为常见，76～100%的MCP患者可以观察到。在同一项研究中，33%的眼睛出现了并发性白内障，12%MCP患者已经是做过白内障手术的人工晶状体眼。
通过生物显微镜检查可以见到，在MCP急性期眼底多个圆形到椭圆形、视网膜色素上皮（RPE）水平灰黄色病变，大小从50～350μm不等，数量从几个到100多个，分散在眼底的后极部和中周部。
这些病灶可以单独发生，或成簇、条纹状排列分布，平行于视网膜锯齿缘。病变有明显的视盘周围和鼻侧中周部分布倾向。活动性病变消退后，病灶演变为圆形萎缩性脉络膜瘢痕，有突起感觉和不同程度的色素沉着。
此外，视盘充血和水肿在MCP中也是常见的表现，Reddy医生及其同事检查的MCP 患者68只眼睛中，34%发生视盘水肿。
多灶性脉络膜炎患者中，黄斑囊样水肿（cystoid macular edema，CME）的发生率，文献报道的并不一致。在Dreyer和Gass等医生及其附属医院研究的患者中，发生的比例为14%，而在美国国家眼科研究所研究的MCP患者中发生CME的比例为41%。
32～46%的MCP患者中，我们还可以观察到脉络膜新生血管膜（choroidal neovascular membranes，CNVMs），主要位于黄斑或视盘周围。
在Thorne医生和同事报告的66例（122只眼）MCP患者中，CNVMs是导致45% MCP患者视力低于0.1的主要因素。视网膜血管炎和视网膜视盘新生血管也有部分报道。
多灶性脉络膜炎虽然是主要发生在脉络膜的炎症，但我们的眼睛作为一个精细复杂的器官，其他结构也会受到影响。积极消除炎症，防止炎症复发是最重要的治疗方法，好好配合医生治疗，珍惜我们的心灵之窗！
参考文献：
1. Diagnosis & Treatment of Uveitis Second Edition (2013). C Stephen Foster. Albert T Vitale
2. Ryan’s Retina (2018). Andrew P. Schachat
图1. 炎症控制后MCP多发病灶
图片来自《Diagnosis & Treatment of Uveitis》
图2. 多灶性脉络膜炎视盘旁萎缩
图片来自《Diagnosis & Treatment of Uveitis》
细胞无菌检测
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
#第三方检测机构##细胞无菌检测#
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
#第三方检测机构##细胞无菌检测#
中空玻璃与真空玻璃到底有什么区别？真空玻璃就是将两片平板玻璃四周密封起来，中间留间隙，将间隙抽成真空并密封排气孔。两片玻璃内表面镀有一层或两层透明低辐射膜。而中空玻璃名为“中空”实际上不空，两层玻璃中间注有“氩气”，大多数情况下“气”是空气，质量好些的是氩气，由于肉眼看不到气体，所以就说成“空”的。空玻璃是将两层玻璃之间抽成“真空”，基本上可以说已无气体，是真的空了。到底，中空玻璃与真空玻璃有什么区别呢？中空玻璃与真空玻璃有什么区别？相比之下真空玻璃则比中空玻璃的性能更加优异。真空玻璃具有超凡的隔热保温性能，使用它作为窗户玻璃，使冬天房间迅速暖和，室内暖气不易散失，减少了供暖和空调使用的费用，节约了能源。夏天室内使用空调，冷气不易外逸。隔声性能好，防止了噪声的干扰，创造安静的环境。另外，在冬天，即使室外温度很低，窗玻璃室内一侧也很难结露，它保证了清楚视野，不用经常清洗结露玻璃
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