【标记紫萁小菇及同化标记物在天麻种胚中的运输途径】兰 进 贺秀霞 汤以佳 徐锦堂 朱永懿
(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所, 北京, 100094;
中国农业科学院原子能利用研究所, 北京,100094)

摘 要 :用3H一葡萄糖对紫萁小菇进行氚标记,然后用标记的紫萁小菇伴播天麻种子,观察发现标记紫萁小菇仅由天麻胚柄状细胞侵入,在天麻种胚细胞中同化的标记化合物由细胞壁进入并由胞压运输到细胞内,形成原球茎后同化标记物由维管组织运输。
关键词 :天麻种子; 标记紫萁小菇; 放射性自显影

前言:
天麻(Gastrodia elata Bl.)属兰科(Orchidaceae)非自养型植物。其种子构造简单,无胚乳及其它营养贮备,仅由胚及种皮构成。研究发现天麻种胚细胞中含有一些多糖及脂肪等营养物质,但不足以提高种子萌发的营养。试验证明,无外源营养供给,天麻种子不能发芽,蜜环菌对天麻种子萌发有明显的抑制作用。徐锦堂等从天麻发芽原球茎中分离到12种可供天麻种子发芽的萌发菌菌株,其中确认紫萁小菇(Mycena osmundicola Lange)菌是最优良的一种,这一突破性的进展,使天麻种子发芽率提高30-40%。天麻有性繁殖研究也进入了一个新阶段。徐锦堂等利用光学显微镜及电子显微镜对天麻消化紫萁小菇的过程进行了大量观察研究。这些工作多是建立在双方相互作用解剖特征基础上,缺少对作用双方物质运输途径的研究。本文在前人研究基础上,采用连续切片进行光镜放射性自显影观察,追踪标记紫萁小菇及同化产物在天麻种胚中的轨迹,了解标记物在天麻种胚及原球茎中积累运输情况,为系统地揭示天麻生长发育规律提供理论依据。
1 材料与方法
1.1材料 同位素标记化合物
H一葡萄糖[D一(6-H-glu)],由中国科学院上海核技术研究所提供,比活度30Ci/mmol。
1.2方法
1.2.1菌种标记培养
母种菌种培养:配制PDA培养基。马铃薯(去皮)200g,葡萄糖20g,琼脂18g,水1000ml,按常规配制,pH5.5。经高压灭菌后,在无菌条件下,将培养基分装无菌试管中,每管2 ml,25℃放置2d。无菌条件下溶化加入H一葡萄糖,引入剂量50μci/ml,摇匀,摆成斜面培养基。用60Coγ辐照灭菌。25℃培养2d,确认无杂菌污染后,接入紫萁小菇菌种,25℃培养,15d后转接二级菌种。
树叶菌种培养:将青杠树落叶洗净,摆放到培养皿中的海棉上,加水,高压灭菌后,接入标记的一级菌种,25℃培养,20d后可播种。
1.2.2标记紫萁小菇伴播天麻种子 实验所用天麻种子采自药用植物研究所真菌室经人工授粉结的果实。在无菌条件下,将天麻果抖出种子,播种到染有紫萁小菇的菌叶上。
1.2.3样品制备
光镜样品制备:取被标记紫萁小菇侵染的天麻种子及由种子萌发形成的原球茎,用水反复冲洗.用5O% EDTA浸洗2min,再流水冲洗。分别用FAA液固定24h,经清洗,系列梯度酒精脱水,浸蜡,石蜡包埋,常规石蜡切片,切片厚度7~8μm。切片经祷片、脱蜡、复水后,移入暗室涂布乳胶。
自显影制备:暗室红灯下,取定量的核一4乳胶(北京401研究所研制),置于无离子水洗净的乳胶杯中,以一定浓度水杨酸钠溶液作增感剂,在42℃恒温水浴中搅拌15min,静止片刻.在乳胶涂布箱中,用涂布法在已脱蜡的切片上涂布核乳胶膜,晾干,置切片于暗盒中,加硅胶干燥袋,密封,置4℃冰箱中曝光20d。
显影、定影:切片曝光后,用D-19b显影液显影3min,停影后,用F-5酸性坚膜定影液定影20min,流水冲洗,稍晾干,经系列梯度酒精脱水,同时用番红一固绿二重染色,最后,用光学树脂封片,待观察。

6. 结果与分析

标记紫萁小菇伴播天麻种子后,在菌丝侵入初期,标记物大量集中分布于天麻胚柄状细胞中,表明紫萁小菇菌丝仅由天麻胚柄状细胞侵入胚体,标记菌丝形成菌丝结出现在胚柄状细胞上部2~3层原胚细胞中,同时发现显影银粒在胚柄状细胞以上的原胚细胞和顶端分生细胞中,在原胚细胞中显影银粒多分散在多糖颗粒上,表明胚柄状细胞上部2~3层原胚细胞具有消化、分解萌发菌的能力并将其同化产物通过细胞壁及胞压运输到上部原胚细胞及顶端分生细胞中。观察还发现在胚柄状细胞上部4~5层原胚细胞中,不形成菌丝结,紫萁小菇菌丝被完全消化,在这些细胞中有大量显影银粒存在,在胚顶上层原胚细胞分解、消化吸收,被同化的标记物由胞压作用,通过细胞间传递达到顶端分生细胞中。分生细胞获得营养,分裂旺盛,胚体膨大,突破种皮而萌发,形成原球茎。原球茎分化产生营养繁殖茎,并分化出维管组织,在新形成的维管组织中发现大量显影银粒,表明随着种胚的发育,维管组织的形成,天麻种胚消化萌发菌获得的营养物质是通过维管组织进行运输,以满足其生长的需要。

3.讨论

通过放射性自显影观察标记紫萁小菇同化物的踪迹,表明天麻胚柄状细胞具有分解、消化菌丝的功能,当分生细胞开始分裂后,种胚顶端分生组织中已云集大量同化的标记化合物,在天麻种胚没有形成原球茎前,同化紫萁小菇的营养物质靠细胞壁及胞压作用,进行传递和输送,当顶端分生细胞开始分裂,突破种皮而萌发,形成原球茎,随着组织的分化,同化标记物由维管组织运输,从理论上进一步证明天麻种子萌发靠同化侵入的紫萁小菇获得营养。在新形成的营养繁殖茎维管组织中也发现了许多显影银粒,说明紫萁小菇不仅在天麻种子发芽及原球茎形成时供给营养,而在分化出营养繁殖茎及营养繁殖茎生长阶段,都需要从萌发菌获得营养。这些同化的标记物如何参与天麻种子萌发与原球茎形成的新陈代谢过程及其超微结构的变化还有待于借助电子显微镜放射性自显影技术进一步观察研究。

参考文献

冉砚珠,徐锦堂. 1988.蜜环菌抑制天麻种子发芽的研究.中药通报, 13(10)15~17
徐锦堂,冉砚珠,郭顺星. 1990.天麻种子发芽营养来源的研究.中国医学科学院学报, 12(5):431~434
徐锦堂,郭顺星. 1989.供给天麻种子萌发营养的真菌-紫萁小菇. 真菌学报, 8(3):221~226
徐锦堂,牟春,冉砚珠. 1990.天麻种子萌发动态及紫萁小菇菌丝侵入的细胞学观察. 中国医学科学院学报, 12(5):313~317
徐锦堂,牟春. 1990.天麻原球茎生长发育与紫萁小菇及蜜环菌的关系. 植物学报, 32(l):26~31【来源】易姑网

【揭开日本制造业之王「发那科」 大赚近50年的秘密 】

#发那科# 靠着大量使用自家生产的机器人,被誉为#日本[超话]# 最强制造业,但近来在#中美贸易战#的冲击下,发那科的业绩表现也遭到波及;为了解这家位于#富士山[超话]# 脚下的神秘机器人王国,《财讯》飞到日本,独家采访创业第2代会长稻叶善治,不仅揭开发那科大赚近50年的秘密,也透露发那科在面对市场逆境时的经营心法。

东京新宿高速巴士总站里,往富士山河口湖的巴士一到站,乘客鱼贯上车,仔细观察可以发现,其中几乎半数来自#欧美# 、#中国[超话]# 等国外游客,他们专程为了对一般人开放的7、8月间,到富士山朝圣。这次《财讯》记者也朝着富士山前进,不过目的地不是富士山,而是山脚下的黄色#机器人[超话]# 王国─日本发那科公司。

进入发那科总公司采访会长,绝对是跑工具机线记者的梦想,即使日本记者也不例外;因为这家公司之前可说是异常低调,虽是一致公认的绩优股、模范生,但也被形容为「谜样的公司」、「蒙上一层面纱的企业」、实施「秘密主义」等,早年还以拒绝受访著称,能取得的公开资料有限,更难以直接与经营层对话。

到底有多神秘?发那科让我印象最深刻的是,即使是公关部门,名片上,也没有电子邮件地址;虽然觉得不方便,但马上能够理解,公司为保护技术所做的各种努力,可说是到了滴水不漏的程度。

一直到近几年,会长稻叶善治开始出现在公开场合,才让外界得透过一点一滴的极少数机会,一窥这家神秘公司的真实面貌。

为什么发那科如此让外界急切地想深入了解?从产品面来看,它的电脑数值控制器(CNC)在全球市占率达到5成;工业用机器人是全球4强之一,占有率约2成;拜iPhone等产品之赐,加工智慧型手机金属外壳的高速钻孔机(Robodrill)市占率高达8成。「一旦发那科停工,全球主要的制造业都会受影响。」曾有媒体如此形容这家公司的重要性。

从财务面来看,它实施无负债经营,手头现金超过6000亿日圆(根据日本Riskmonster公司统计,2018年度现金的金额为6071亿日圆,排名日本第5。)此外,营业利益率多次超过40 %。从员工最在意的薪资面来看,2018年平均年薪1347万日圆,在上市公司排名第21。8月16日总市值3.7兆日圆,在东京证交所第1类股排名31名。「称它是最会赚钱的日本制造业,一点都不为过。」业内人士形容。

看起来根本是打遍天下无敌手,但企业经营本来就不可能一帆风顺,最近发那科在业绩上的表现,遇上了逆风。

在2020年3月底为止的2019年度,发那科集团净利估计将比前1年度锐减61%为603亿日圆,营业利益大减56%为713亿日圆,营业额则减少18%为5242亿日圆;而且营业利益率将降到13.6%,虽然仍高于全产业平均的3.7%,却是自1993年以来、26年来首次跌破20%。

发那科的业绩下滑,关键就在中美贸易战!根据日本工具机工业会统计,2018年工具机订单金额连续两年创新高,但预估2019年金额将比前1年减少约12%为1.6兆日圆,主因是美中贸易摩擦使得对中国的出口减少。

就在这个转折的关键,发那科的下一步,可谓至关重要。为此《财讯》双周刊向发那科提出了采访申请,8月初来到山梨县忍野村,进入占地53万坪的发那科总部,采访了第2代的会长稻叶善治,独家揭露他对中美贸易战的看法。

本刊还进入生产工厂,直击发那科最自豪的技术之一─用机器人如何制造机器人,见证这全球机器人霸主,是如何成为全球制造业重要的幕后推手。「我们一点不神秘啊!不知道大家为什么这样说。」身着标准黄色外套的稻叶善治似乎有一点无奈又无辜地微笑着对我说。多数日本媒体都同意,发那科的改变,关键是从2013年开始,或许更精准地说,是从稻叶善治开始。

不过,发那科这一切的起点,要回溯到创办人稻叶清右卫门的旷世发明。

1956年,毕业于#东京大学[超话]# 工学部的他,开发出数值控制和伺服装置,让以前倚赖人工的机械加工,可以靠数值资料来操作。1972年从富士通公司将NC部门独立出来,资本额20亿日圆,取名发那科(FANUC),意思是富士自动数位控制(Fuji Automatic NUmerical Control),从公司成立之初,就明确地以自动化为发展目标。

1974年,发那科开发出自己工厂用的机器人,1977年开始对外销售,1982年与美国通用汽车成立合资公司,1986年与美国奇异成立合资公司,透过汽车等业者,在海外打响知名度。

稻叶清右卫门带领公司以强大的研发力著称,1979年度单一公司营业额为500亿日圆,到他卸下公司各项职务的2012年度,集团营业额成长为4983亿日圆。

2013年名誉会长稻叶清右卫门彻底离开经营的第1线,稻叶善治将公司改采集团领导的体制,分成现有的3大事业部门。当时稻叶善治接受《东洋经济周刊》采访时指出,发那科变成大组织后,部门间的联络或指示的体系变得冗长,这样会无法跟上急遽变化的市场,因此分成3个事业部,只是回到原点,也就是富士通时代的作法,让各事业本部负责,快速决策。

这3个事业部分别是:第1、工厂自动化(FA)部门,主要产品包括CNC(电脑数值控制器)、伺服马达等,在集团营业额的占比约30%。第2、机器人部门,包括焊接机器人、协作机器人等,可搬的重量从500公克到2.3吨,营业额占比约31%。第3是数控工具机(Robomachine)部门,产品有高速钻孔机、电动射出成形机等,其中高速钻孔机因为加工苹果手机外壳等产品而大卖,此部门占营业额的比重约26% 。

慢慢地,稻叶善治也开始和股东交流对话,倾听他们的声音。2015年3月发那科第1次设立和股东对话的部门;同年,还决定股息发放率比先前倍增为60%,原因是手头资金已经存到1兆日圆,因此要回馈给股东。

更重要的是,2016年稻叶善治拔擢副社长山口贤治为社长,当年他才47岁,对1家快50年的老公司来说,把这么重要的位置交出去,稻叶善治却毫不手软,开始推动年轻化。

东京大学研究所毕业的山口精通机器人技术,38岁就当上总公司工厂的厂长,39岁当上专务董事,虽是不可多得的人才,但也是13年来第1次出现非稻叶家族的社长,今年4月还接下执行长的重责大任,未来表现值得期待。

甚至,发那科更主动打破过去给人封闭的印象,现在也开始和其他公司携手合作,采取开放的态势,例如2016年和美国思科等4家公司联合打造IoT平台FIELD(FANUC Intelligent Edge Link & Drive,发那科智慧边缘连接和驱动)系统,2017年开始推动,透过感测器,可以立即掌握工厂内机器人或工具机的工作状况,在发生故障前就预先知道;最特别的是,即使厂内设备有新有旧、厂牌也不尽相同,仍能透过这个平台,提高整体的效率。

光靠发那科自己的成效有限,透过和多家厂商结盟,并对外部企业开放,让相关业者容易设计应用程式,也才能提高使用者的方便性,这样的策略的确奏效,如今伙伴企业已超过500家。

一手推动发那科改革的稻叶善治,外界想像应该是霸气十足,但当本刊记者问到中美贸易战导致发那科获利减少时,在会议室接受专访的稻叶善治,语气平和而诚恳、不疾不徐地回答,「公司对短期业绩的波动不以为意,也从来不公布中期或长期计画,因为我们追求的是永续经营。」一点也感受不到焦虑或急迫感。

稻叶善治之前就公开表示,即使现在接单和营业额状况严峻,发那科仍持续每年约1000亿日圆规模的设备投资,就是为长远的未来做打算。

而这样的经营模式,正是发那科屹立近50年的成功关键。稻叶善治受访时不断强调「专注」,不会无限扩张产品线,例如机器人领域中,只做「工业用机器人」,现在的3大事业群也有1个共通点,就是创业以来的核心─控制。

发那科维持创办人对研发的坚持:「技术有历史,但是技术人员没有过去,只有创造」,而研发的目标就是用更少的零件、提高产品信赖性,并且成本比别人低。稻叶善治说:「研发人员占总员工数的1/3」,为了把研发做到极致,不惜投注成本。2017年度研发费用是529.56亿日圆,占营业额的比率达7.3%,已经连续两年超过7%。

稻叶善治笑着说:「我也很希望客户能买新机器啊!可是如果客户希望用旧机器,即使是30、40年的老机器,我们也一定会设法修到好!」发那科在全球108国共263个据点提供维修服务,得知客户有需求时会快速赶到,而且终生维修产品,早已成为发那科的企业文化。

发那科还坚持在日本国内研发、生产。稻叶善治说明原因是,开发者和生产工厂可以即时交换意见,而且这些机器的买主是企业,并非一般消费者,不需要在消费地生产。外界认为,避免技术外流也是重要原因。公司也会高薪延揽优秀人才,因此在日本上市公司的薪资排名中,发那科2018年的平均年薪是1347万日圆,如果比较生涯薪资,则高达4.9亿日圆,在上市公司排名第11。

全球自动化制造的趋势明确,但工业用机器人等硬体愈来愈难以差异化,加上AI、IoT等技术快速发展的情况下,发那科如何维持霸主的地位,值得拭目以待。

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43个汉字简化后的现实预兆:繁体字的重要性

汉字是个神物,有预兆性的,简化汉字,更在日后的现实生活中得到全面应验。一起看看:

1. 親(亲):亲不见,处处留情乱播种,子女难得在身边。

2. 產(产):产不生,人流手术随处见。良田抛荒到处是,不要五谷只要钱。

3. 鄉(乡):乡无郎,个个都往城里赶。村中难见青年面,只有老弱和病残。

4. 愛(爱):爱无心,试问几人是真情。逢场作戏到处有,只要有钱就是亲。

5. 備(备):备无人,难道藏备靠天神。资源枯竭田占尽,不虑儿孙好自身。

6. 厰(厂):厂空空,企业资金投楼中。苛捐杂税乱收费,人去楼空自然穷。

7. 麵(面):面无麦,个中原由你去猜。面粉没有麦香味,其实掺了吊白块。

8. 進(进):进不佳,走到井里成鱼虾。事业犹如水中月,求财恰似镜中花。

9. 應(应):应无心,口头许诺难成真。耍奸弄猾不要脸,难怪世间无诚信。

10. 衛(卫):卫无行,不知怎能去远征?自己家园都难保,何以天下享太平?

11. 聽(听):听耳少,见此说法你别笑。你去看看开大会,能有几个不睡觉。

12. 導(导):导无道,教导哪能用这招。信口开河凭口味,自以为是不害臊。

13. 優(优):优须忧,天下忧士最难求。尤而效之罪更甚,此等之人让人愁。

14. 採(采):采无手,这种取得哪里有。不劳而获人人想,钻营取巧个个求。

15. 嚐(尝):尝无口,好坏都随感觉走。山珍海味别奢望,柴米油盐够你愁。

16. 孫(孙):子系孙,子小子系大不同。子小毕竟还是子,难道儿媳偷阿公?

17. 實(实):实无贯,家中没有朽贯钱。光有人头没钱用,这种殷实真可怜。

18. 質(质):品质坏,弄的人人都受害。食品掺毒又使假,最是中华之悲哀!

19. 敵(敌):舌为敌,言辞演说要注意。百家争鸣是摆设,必须跟我同口气。

20. 舘(馆):舍靠边,一切都以食为先。学馆武馆是饭桶,酒囊饭袋续新篇。

21. 恥(耻):耻无心,丧尽天良难以禁。弱势未能去帮助,反倒还将人家侵。

22. 曆(历):历无日,我不说出你不知。无日便是漫长夜,艰苦度日莫奢侈。



23. 寧(宁):宁无心,这样说来无人信。坐在家中有祸事,强迫拆迁官扰民。

24. 勝(胜):胜无券,只能苟且来偷生。见势一副奴才相,逢弱却是面目狰。

25. 傑(杰):杰无人,丰功伟业怎能成。名不符实到处有,以次充好假乱真。

26. 歡(欢):又欠欢,个个借钱不想还。银行催逼就跑路,反正国外有家园。

27. 難(难):又佳难,这种简化真荒唐。乐极生悲也难定,一场突变也遭殃。

28. 邊(边):边无旁,走路费力不好看。蒙古本是中华地,不知算不算边关?

29. 癡(痴):疑变知,病中有知你说痴。谎话连篇不能揭,只有糊涂才明智?

30. 筆(笔):笔不直,往往曲笔来写史。秉笔直书从来有,如今此风早丢失。

31. 樂(乐):乐无丝,是否欢乐你自知。木架丝竹方称乐,被说幸福难支持。

32. 驚(惊):心怀京,难道官家害百姓?古来受惊只是马,现在却是惊了人。

33. 賓(宾):家来兵,自古都称乱世情。贵客来家少了贝,盛宴款待心意诚。

34. 慄(栗):慄无心,律法恐惧没人信。贪污腐败到处有,权力代法才是真。

35. 懷(怀):心不挨,心中不愿怎称怀。心中不甘人不乐,难有几个笑颜开。

36. 豐(丰):丰烂透,麦穗无围还缺豆。丰收数据靠编造,年年都是产量高。

37. 窮(穷):穷不穷,保障房里住富翁。贪得无厌只恨少,此等世道真不公。

38. 達(达):达不達,全凭官爷一句话。你说该下就得下,你说上达就上达。

39. 礎(础):石出础,难怪基础不牢固。烂路断桥楼脆脆,人们口服心不服。

40. 矇(蒙):蒙无目,自焚现象视无睹。都说安居才乐业,捞钱却要害无辜。

41. 廟(庙):庙不朝,无神之论是信条。若是鬼神都不怕,自然大胆耍阴谋。

42. 網(网):无丝之网无作用,漏网之鱼实在多。无丝网,这种做法不敢当。律法好比是丝线,以权代法无规章。

43. 後(后):後变后,后代只能生一口。老来病伤难靠近,实在替你来担忧。后代本是人人俊,此种更改太无情。计划生育为国策,超生一个家园倾。

本文章来源文化学者罗志渊请仅用于文学宣传


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